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            • 1.

              李斯特菌广泛存在于各类食品中,李斯特菌在李斯特菌显色培养基上培育时菌落会呈现蓝绿色。在目前发现的16种李斯特菌中单增李斯特菌是唯一对人有致病性的一种,与其他李斯特菌相比,单增李斯特菌还能合成并分泌磷脂水解酶,使培养基中的磷脂被分解而在单增李斯特菌菌落周围出现白色晕环。

              (1)与单增李斯特菌相比,其他李斯特菌不能合成并分泌磷脂水解酶的根本原因是_____________________。

              (2)现要检测某食品中是否含有其他李斯特菌和单增李斯特菌,进行了相关实验:

              ①将该食品样品加入经___________灭菌的李斯特菌选择培养液中培养,培养的目的是_________________。

              ②将经过培养的菌液接种到鉴定李斯特菌的培养基上,常用的接种方法有___________________。鉴定李斯特菌的培养与李斯特菌选择培养液相比,还需额外添加显色剂、__________和__________。

              ③将接种后的培养基置于适宜条件下进行培养。一段时间后若培养基上出现___________的菌落,则说明该食品中含有单增李斯特菌。

            • 2. 木聚糖酶系可以将半纤维素(一种多糖)转化为单细胞蛋白和其他有用物质。有些嗜热菌能产生耐热木聚糖酶,在食品工业上具有较高的潜在应用价值。现欲从温泉中分离能分解半纤维素的嗜热菌,并从中筛选木聚糖酶高产菌株,获得耐热木聚糖酶。回答下列问题:
              (1)实验中配制好的培养基灭菌通常使用______________________,牛奶常用巴氏消毒法,该方法的操作是_______________________________。 
              (2)取适量体积的样品涂布在富含__________且其为唯一碳源的固体培养基上,置于恒温培养箱中培养,菌落长出后,挑取单个菌落并进行一系列操作,然后在培养基上用__________法接种培养,进行菌株的__________。最后将得到的菌株接种到__________(填“固体”或“液体”)培养基中富集。 
              (3)将富集后的菌株接种于固体培养基上,待菌落长出后用0.1%的__________染色1h,再用1mol/LNaCl脱色。菌落周围会出现__________,筛选__________的菌落即为木聚糖酶高产菌株。
            • 3.

              皮肤作为人体最大的器官,拥有达1.8m2的表面积,其主要功能是作为物理屏障,保护机体免受外来生物或有毒物质的侵害。同时,皮肤也是人体与外界环境接触的部位,因此常驻有各类微生物,包括细菌、真菌和病毒等。通过微生物培养技术能了解我们皮肤表面的微生物分布情况。回答下列问题:

              (1)微生物生长繁殖所需要的营养物质有碳源、水、_________、_________四大类。由于不同种类微生物的菌落特征表现不同,因此可以利用_________(填“固体”或“液体”)培养基来培养,通过观察菌落特征对微生物进行初步的鉴定和分类。

              (2)有同学通过制备牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养附着在皮肤表面的细菌。制备该培养基的操作步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。在溶化之后、灭菌之前需要调节______;灭菌后,待培养基冷却至______℃左右时,在酒精灯火焰旁倒平板;待平板冷却凝固后,需要将平板____________。

              (3)利用平板划线法分离纯化某细菌的操作中,使用________法对接种环进行灭菌。第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始,目的是____________。

            • 4. 酵母菌是来源于自然界的菌种,它种类繁多、分布很广、繁殖极快。如何筛选、纯化、诱导对葡萄酒发酵有利的酵母菌种,是酿酒师们长期研究的课题。

              (1)像其他微生物一样,酵母需要适当的营养和合适的环境条件,培养时培养液中的营养物质主要有 ____________________等。(要求回答4种营养物质)

              (2)当酵母繁殖时,没有糖转化为酒精,此时酵母菌为 ________________呼吸.
              (3)从含有酵母菌、醋酸菌、蓝藻的培养液中分离出酵母菌,最简单的培养方法是:在 _____________并且 _______________条件下进行培养.
              (4)葡萄酒制作是否成功,发酵后需用 ____________来鉴定,在 ____________条件下,该物质与酒精反应呈现 ___________色。

              (5)为筛选和纯化酵母菌,根据用途应选用 __________________培养基,常用的接种方法 _______和 _________.扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数,取0.2mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计了三个平板,菌落数分别是200、180、220.则样品中微生物的数量为 ______________个/mL.该统计结果 ____________(低于、高于)实际值。

            • 5.

              下表是培养某微生物的培养基的配方,请回答下列问题:

              试剂

              牛肉膏

              蛋白胨

              NaCl

              琼脂

              加水定容至

              用量

              5 g

              10 g

              5 g

              20 g

              1 000 mL

              (1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、碳源、________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是____________________。培养基配制完成以后,一般还要调节pH并对培养基进行________处理。
              (2)在配制培养基时,除考虑营养条件外,还要考虑________、____________和渗透压等条件。
              (3)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行________(填“消毒”或“灭菌”);操作者的双手需进行清洗和________;空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质________,还能损伤DNA的结构。

              (4)分离纯化微生物最常使用的接种方法是__________和________________。

              (5)在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是___________________________________________________________。
            • 6.

              东湖绿道二期已向市民开放,我市某中学学生模拟公司课外兴趣小组为了调查东湖的水质状况,在东湖白马驿站区域取样后测定了水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。请回答下列问题:

              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时问,这样做的目的是________________;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为________________。如果该小组实验组平板上菌落平均数为39个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了2个菌落,这种结果说明在此次调查中培养基出现了________________现象。如果将37(即39-2)个/平板作为本组菌落数的平均值,你觉得该做法________________(填“可行”或“不可行”)。

              (2)若想确定平板上的菌落是否有大肠杆菌,一般在培养基中加入伊红美蓝,该培养基从功能上划分属于________________培养基。

              (3)该小组经讨论决定采用平板划线法分离水样中的细菌,在第二次及以后的划线操作时,应从________________开始划线,这样做的目的是________________。

              (4)如下图A和B中,________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。采用该计数方法结果往往较实际值偏________,(填“高”或“低”)原因是________________。

              (5)该小组将得烈的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养,结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中________________的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高________________的利用率。

            • 7.

              回答下列与微生物有关的问题:

              (1)在进行微生培养时,为了观察微生物的菌落特征,一般选用______(固体或液体)培养基;为了判断培养基是否成功灭菌,需要将________的培养基放在________培养。

              (2)为了从土壤中筛选出能降解尿素的菌株,需要用到__________的选择培养基。

              (3)为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种,可以在培养基上加入__________染液,将筛选获得的菌液稀释后接种到________(从用途上分析)培养基,然后挑选出产生__________的菌落作为菌种进行扩大培养。

              (4)实验结束后,使用过的培养基应该________处理后才能倒掉。

            • 8.

              欲从腐乳中分离出产蛋白酶活力高的毛霉菌株,设计了如下实验流程。回答下列问题:



              (1)毛霉属于__核生物,从生态系统的组成成分看,它属于________。在腐乳制作中,主要利用毛霉等微生物产生的_________________将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质。

              (2)步骤②进行涂布前,需将孢子悬浮液进行梯度稀释,进行梯度稀释的目的是_______________。若进行10倍稀释,一般吸取lml悬浮液注入______中,混匀。

              (3)孟加拉红培养基常用于分离霉菌及酵母菌,在孟加拉红培养基中加入氯酶素可以抑制细菌的生长。从功能上看,孟加拉红培养基属于_______培养基。

              (4)毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈,在酪蛋白培养基中筛选到三个单菌落甲、乙、丙,其菌落直径分别为3.2cm、2.8cm、2.9cm,其菌落与透明圈一起的直径分别为3.7cm、3.5cm、3.3cm。应选择菌落______(填“甲”、“乙”、“丙”)作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。

            • 9.

              马、牛羊的食物主要是草茎类,其中还有大量的纤维素。它们胃内的微生物,在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用,土壤中也存在着分解纤维素的微生物。请根据所学的知识,回答下列问题:

              (1)纤维素酶是一种复合酶,主要包括C1酶、CX酶、___________________。

              (2)在培养基中加入_______________可以鉴别纤维素分解菌,其原因是其可以与纤维素结合形成____________________,纤维素分解菌产生的纤维素酶能够将纤维素分解为葡萄糖而使其菌落周围出现________________。

            • 10.

              国家生活饮用水卫生标准规定:接种1 mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上,在37℃下经24 h培养,所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定,以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题:

              (1)用无菌三角瓶取水样前,取样器(玻璃制品)需使用_____________法灭菌。取水前的这种无菌操作的目的是____________________________。

              (2)牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后,需要冷却到50℃才能用来进行_________操作,冷凝后倒置培养。

              (3)该小组通过滤膜法测定细菌总数,将30 mL水样平均分成3份进行过滤,再将3份滤膜分别放在牛肉膏蛋白胨培养基上培养。在培养过程中,不同时间所观察到的平板上菌落特征的差异有____________(至少写出两点)。为保证可信度,应进行对照实验,对照组与实验组的区别之处是_________________ 。

              (4)在37℃下经24 h培养,结果如下表:

               

              平板1

              平板2

              平板3

              菌落数(个)

              370

              350

              380

              据上表结果判断,所取水样测定结果_____(填“符合”或“不符合”)饮用水的标准。

              (5)该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目,可将滤膜放在含__________培养基上,计算培养基上______(颜色)菌落的数目。

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