(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养。

(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用____________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用________法进行计数。

(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35 ℃、40 ℃、45 ℃温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________℃设计后续实验。

下图表示细胞融合技术的一些过程。阅读下列材料，并简要回答下列问题。

(注“十”代表有抗性，“-”代表无抗性）

材料一:近年来，细胞工程已进人高速发展阶段，已经成为生物学领域中一颗耀眼的明星。该工程可在细胞水平或细胞器水平上，按照人们的意愿获得新型生物或特种细胞产品。

材料二：微生物采油的关键技术是获得性能优异的菌种，应用原生质体融合技术将两种微生物进行融合，构建耐中高温采油微生物引起了科学家的广泛关注。宋绍富等人选用细菌I和细菌JD先后进行了各自抗生素抗性以及融合实验的相关研究。研究发现，I菌与JD菌对不同抗生素的抗性是不同的，测量结果见上表。

（1）上图中，若A细胞和B细胞均为植物细胞，细胞融合完成的标志是____________ ；形成的D细胞还要应用植物组织培养技术将其培养成植株。

（2）上图中，若A细胞和B细胞均为动物细胞，与植物细胞融合相比，从A细胞和B细胞到C细胞的过程中，______________是诱导动物细胞融合特有的诱导因素，该过程说明了细胞膜具有_______________。

（3）利用I菌和JD菌进行细胞融合时，首先应使用 _______________法去除菌体的细胞壁，将获取的______________保存在等渗溶液中待用。

（4）在对I菌和JD菌融合后的融合子进行筛选时，比较理想的是在培养基中添加3μg/ml红霉素（或3μg/ml利福平）与_______________两种抗生素,此种培养基称为_____________。             

胡萝卜因含有多种营养成分而备受人们青睐。其中β－胡萝卜素是一种抗氧化剂，具有解毒作用，是维护人体健康不可缺少的营养素。下图是获取胡萝卜素的二个途径，请据图回答：

（1）图中粉碎了的胡萝卜需进行[①]___________处理后再进行萃取操作，在浓缩之前，还需进行[②]____________处理。

（2）现有石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯等四种有机溶剂，最好选择____________用于胡萝卜素的萃取，主要理由是_______________________________（答对两点既可）

（3）胡萝卜素的萃取瓶口需安装冷凝回流装置，以防止____________________。

（4）途径2获取的产胡萝卜素工程菌在发酵生产时，除供给足量的水、无机盐、氧气外，还需要供给_______、________等营养物质。

(1)目的菌生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的____________。实验需要振荡培养，振荡培养的作用是__________________________________，由此推测目的菌的代谢类型是____________。

(2)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使目的菌的数量增多。

(3)转为固体培养基时，常采用平板划线法或_____________ 进行接种。平板划线法所使用的工具称_______，这种工具操作时应采用的灭菌方法是_________。接种时，在第二次及其后的划线操作时，总是从__________________开始划线。

(4)某同学将污水样液制成了10¹〜10⁴的四个稀释样液，分别取0.1mL接种到4组(每组4个)固体选择培养基上，若在10³组的4个平板上，获得的菌落数是357、39、38和37，则每升污水样液中的活菌数约为____________个。

(5)在上述实验操作过程中，获得纯净目的菌的关键是_________________。

(1)酿酒所需的微生物是        ，产生的酒精可以与            (试剂)发生显色反应。

(2)在变酸的酒的表面观察到的菌膜是           在液面大量繁殖而形成的。若要对该菌进行初步分离纯化，比较便捷的操作是：采用            法(填“平板划线”或“稀释涂布平板”)把它们接种到          (填“固体”或“液体”)培养基上，经培养得到肉眼可见的           。

(3)实验室中常用                法对培养基及器皿进行灭菌。不同培养基的具体配方不同，但一般都含有水、            、           和无机盐。

已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用__________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。

(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养，培养基灭菌采用的最适方法是____________   法。

(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用________________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用______________法进行计数。

(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中，______ ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________ ℃设计后续实验。

下表是培养某微生物的培养基的配方，请回答下列问题：

(1)培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是____________________。培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行________处理。

(2)在配制培养基时，除考虑营养条件外，还要考虑________、____________和渗透压等条件。

(3)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)；操作者的双手需进行清洗和________；空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质________，还能损伤DNA的结构。

(4)分离纯化微生物最常使用的接种方法是__________和________________。