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            • 1.

              常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌,操作如下:

              (1)获得酵母菌纯净培养物的关键是____________________。

              (2)在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是__________________________。 划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落,造成划线无菌落可能的操作失误是________________________________。

              (3)将自然界中采集到的葡萄带回实验室,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以木糖为唯一________的固体培养基上,在适宜的条件下培养一段时间,获得能利用木糖的多个酵母菌菌落。

              (4)若要检测土样中的酵母菌含量,应采用____________法。在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间,这样做的目的是________________________________________。

            • 2. 某同学利用自己所学的生物技术自制酸奶,实验方案如下:
              材料用具:纯牛奶、原味酸钠;带盖瓶子、勺子、可调温电饭锅.
              制作方法:
              (1)将瓶子(连同盖子)、勺子放在电饭锅中加水煮沸10分钟.
              (2)瓶子稍冷却后,向瓶子中倒入牛奶,再放入电饭锅中沸水浴加热10分钟.
              (3)待牛奶冷却至40℃左右(不烫手)时倒入牛奶量1/5的酸奶作“引子”,用勺子搅拌均匀,拧紧瓶盖.
              (4)将电饭锅温度调至40℃,继续保温7-8小时.
              请回答:
              (1)将瓶子等煮沸的目的是 ______ .
              (2)“引子”指的是酸奶中的 ______ ,其在发酵过程中完成的主要化学反应是 ______ (填反应式).与该菌种比较,醋酸菌的代谢特点是 ______ .
              (3)牛奶冷却后才能导入“引子”的原因是 ______ ,将瓶盖拧紧是为了保持 ______ 条件.
              (4)适量饮用酸奶有利于改善腹胀、消化不良等症状,其原理是酸奶中的微生物能分解消化道中的部分食物且 ______ .
              (5)另一名同学在重复相同实验时,为避免杂菌污染向牛奶中加入了青霉素,结果发酵失败,原因是 ______ .
            • 3. 临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验.实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性.回答下列问题:
              (1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用______法或______法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得.
              (2)取该单菌落适当稀释,用______法接种于培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板.
              (3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A______;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B______;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明______;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的______.
              (4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素______.
            • 4. 将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。回答下列问题:
              (1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制细菌的生长,加入了链霉素的培养基属于______培养基。通常用______灭菌法对培养基进行灭菌。
              (2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有______、______(答出两点即可)。将微生物接种到培养基上,最常用的方法有______、______。
              (3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是______,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是______。
              (4)纯化的菌种可接种到试管的固体斜面培养基上在合适的温度下培养,当菌落长成后将试管放入______℃的冰箱中临时保藏。若菌种需要长期保存,可以采用______的方法在冷冻箱中保存。
            • 5. 图1表示微生物实验室培养中的部分操作。请分析回答:

              (1)步骤①的后一步的正确操作应是将平板______,这样可以防止______。
              (2)步骤②→③之间需要进行的正确操作应是______。
              (3)甲同学按步骤④进行操作,据图1分析,采用的接种方法称为______,其操作的两处不当之处分别是______、______。在老师的指导下,该同学按正确的方法重新操作,则经培养后菌落的分布情况最可能是图2中的______。
              (4)乙同学尝试采用不同于甲同学的接种方法进行实验,其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示,推测该同学接种时可能的操作失误是______。
            • 6. 图表所示配方的培养基可筛选某种细菌,该细菌可以在该培养基上生长、形成菌落。请冋答下列问题:
              KH2PO4 1.4g
              Na2HPO4 2.1g
              MgSO4•7H2O 0.2g
              葡萄糖 10.0g
              尿素 1.0g
              琼脂 15g
              将上述物质济解后,用蒸馏水定容至1000mL
              (1)该培养基可筛选的细菌是______,理由是______。
              (2)如果从土壤中获取的样本含该细菌的数量较少,则需要对样本中的细菌进行扩大培养,______用表格中的培养基,因为______。
              (3)如果对该细菌进行计数,则将得到的细菌用______法接种,为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌,需要在培养基中加入______(试剂1分)。
            • 7. 为了调查某学校附近河流的水质状况,该学校生物兴趣小组测定了河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:
              (1)如图,该小组采用的是______分离水样中的细菌。操作时,接种环通过______灭菌,在第二次及以后的操作时,总是从上一次的末端开始,这样做的目的是______。
              (2)该实验组将接种好的培养皿在恒温箱中培养时倒置,其目的是______;在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为______。
              (3)根据培养皿上菌落的平均数可以计算河水中该细菌的密度,但计算的数据要比实际活菌的数目少,原因是______。除了上述的活菌计数法外,______也是测定微生物数量的常用方法。
              (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:______。
            • 8. 蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值。某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株,做了如下实验步骤(配制了下列培养基,在适宜条件下培养):
              步骤 取样 培养基 培养结果
              土壤样品 葡萄糖,(NH42SO4,K2HPO4•3H2O,KH2PO4,NaCl,CaCl2
              MgSO4•7H2O,加水定容
              培养液a
              1mL培养液a 同上 菌落
              挑取单菌落 细菌培养基 培养液b
              (1)为实现筛选目的,步骤Ⅰ所使用的培养基配方中,应去除______并加入高浓度的______。该培养基从功能上看属于______培养基。
              (2)灭菌是否彻底或是否被污染需要检测,检测方法是______。
              (3)为实现目的菌的分离和计数,步骤Ⅱ所使用的培养基中还应加入______制成平板,采用的接种方法是______。
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