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            • 1.

              经人工诱变获得的天冬氨酸缺陷型菌株,菌体自身不能合成天冬氨酸,必须从外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。下图是科研人员利用“影印法”筛选天冬氨酸缺陷型菌株的部分过程(注:基本培养基中不含氨基酸,完全培养基中含所有种类的氨基酸)。回答下列问题:


                  (1)过程①接种的方法是________________。待测培养皿中的培养基是___________(答“基本”或“完全”)培养基。

                  (2)过程②是将印在同一块丝绒布上的菌落,先后转印至两个不同的平板上。该过程应该先转印到_______________(答“基本”或“完全”)培养基上,原因是____________________。

                  (3)完成②过程的转印并在28℃的培养箱中培养2天后,两个平板上出现的菌落有的相同,有的不同。完全培养基上出现的菌落A和菌落B中,不可能是天冬氨酸缺陷型菌株的是_________菌落(答“A”或“B”),原因是___________________。

                  (4)为了进一步鉴定筛选到的菌株确实是天冬氨酸缺陷型菌株,科研人员又制备了甲、乙两个平板,这两个平板中营养成分的差异是________________。将待鉴定菌种接种到两个平板中,置于适宜条件下培养一段时间后,若观察到两个平板中菌落的生长情况是__________,则说明该菌株是天冬氨酸缺陷型菌株。

                  (5)临时保存该菌种时,可将菌种接种到试管的______上,在合适的温度下培养。长期保存时可采用________的方法。

            • 2. 苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着能降解苯酚的微生物.某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如图所示,①为土壤样品,请回答下列问题:

              (1)②中培养菌株的选择培养基中应加入________作为碳源,②中不同浓度碳源的培养基________(A.影响;B.不影响)细菌的数量,如果要测定②中活细菌数量,常采用______________法.

              (2)④为对照,微生物在④中不生长、在⑤中生长,④与⑤培养基的主要区别在于_______________;使用____________法可以在⑥上获得单菌落.采用固体平板培养细菌时进行倒置培养是为了防止                             .

            • 3.

              在生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。回答下列与微生物的培养与利用有关的问题

              (1)下图是利用______________法将微生物接种到固体培养基上,把混合的菌种逐步稀释分散获得______________菌落。接种后培养基应______________放在37℃恒温培养箱中进行培养。

              分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于筛选尿素分解菌,则应除去上述培养基成分中的________,并加入______________和________物质,以补充其生活所需的碳源和氮源。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________将尿素分解为氨,使培养基pH发生改变,酚红由黄变红,使菌落周围呈现红色。

              (3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2ml稀释液涂布,得到以下统计结果:

              甲同学涂布了1个平板,统计的菌落数是260;

              乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;

              丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;

              在三位同学的统计中,____________同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果,每毫升原液中的菌体数是______________。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量______________。

            • 4.

              塑料袋造成的“白色污染”早已成为地球公害,塑料袋的自然分解需要20-1000年不等.2008年7月3日加拿大媒体报道:16岁的高中生丹尼尔-伯德从土壤中找到了一类假单胞杆菌,能将聚乙烯塑料的自然降解过程缩短至3个月,而且分解产物只有水和二氧化碳.伯德也因此被誉为“塑料袋的克星”.以下是伯德寻找到聚乙烯降解菌的大致过程.请回答:

              (l)根据你的生活经验推测,伯德这项研究的“土壤样品”最可能取自于______.
              (2)图中“…”表示对土壤悬浮液进行一系列的梯度稀释,目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞.从而能在Ⅰ号培养基表面形成单个______.接种培养后,统计菌落数,通常活菌的实际数目要比统计的菌落数_______。

              (3)对培养基灭菌的常用方法是________________。接种前需要检测使用的培养基是否被污染,方法是__________________________。

              (4)I号培养基属于______培养基,其作用是使目的菌能“脱颖而出”.如图采用的接种方法为______.

              (5)使用Ⅱ号培养基的目的是使目的菌数目增多,若对目的菌进一步培养,则其增长呈____型曲线增长。Ⅱ号培养基中必须包含水、无机盐、______等基本营养成分.从物理性质来看,Ⅱ号培养基中________(填“不能”或“能”)添加琼脂.假设该同学发现培养基上细菌数目过多连成一片,说出一种可能的原因并提出合理的处理措施。原因:__________________________;

            • 5.

              在生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。回答下列与微生物的培养与利用有关的问题:

              (1)下图是利用______________法将微生物接种到固体培养基上,把混合的菌种逐步稀释分散获得单个菌落。接种后培养基应______________放在37℃恒温培养箱中进行培养。

              (2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O、琼脂。若此培养基用于筛选尿素分解菌,则应除去上述培养基成分中的________,并加入______________和_____________。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________将尿素分解为氨,使培养基pH发生改变,使菌落周围呈现红色。

              (3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2ml稀释液涂布,得到以下统计结果:

              甲同学涂布了1个平板,统计的菌落数是260;

              乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;

              丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;

              在三位同学的统计中只有一位同学的统计结果是相对准确可信的,按照该同学的结果,每毫升原液中的菌体数是______________。

              (4)实验结束后,使用过的培养基应该进行_____________处理后,才能倒掉。

              (5)用这种方法测定密度,实际活菌数量要比测得的数量______,因为_______________. 

            • 6. A.炭疽杆菌能使人畜患炭疽病,主要引起皮肤炭疽和肺炭疽等。对炭疽病疑似患者,可通过甲图所示鉴定炭疽杆菌的实验进行确诊,其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌。

              (1)炭疽杆菌在细胞结构上_______(“有”或“无”)成形细胞核,根据炭疽病的发病部位,你猜测炭疽杆菌的代谢方式应为__________。
              (2)若要从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌,可将患者皮肤脓胞渗出物接种于特定的固体培养基表面,如乙图所示。图中A和D所示的接种方法分别叫:____________和____________
              (3)甲图中制备的液体培养基时需采取______________法灭菌。甲乙两图中的各组培养基中都必须含有的营养成分有水、无机盐、____________.接种可疑菌后,需将三角瓶置于35℃下的摇床上振荡培养24小时,可疑菌会大量繁殖,液体培养基变浑浊。
              (4)甲图中,对照组与实验组试管同时培养6小时后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组______(高/低),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。此判断的依据是 ______     
              B.下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了质粒和目的基因中相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
                  
              (1)质粒载体作为基因工程的工具,应具有的基本条件有________________(答出两点即可),而作为基因表达载体,除了满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
              (2)根据表格分析,经BamHⅠ酶切后得到的DNA片段_____________("可以"或"不可以")与经HindⅢ酶切后的产物连接,理由是________________.
              (3)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用两种限制酶切割,即BelⅠ酶和___________。酶切后的载体和目的基因片段,通过______酶作用后获得重组质粒.为了扩增重组质粒,需将其转入处于_________态的大肠杆菌。
              (4)转入了重组质粒的大肠杆菌可在添加了_____________的培养基表面长出菌落。若用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中______________。
            • 7.

              选考题:【生物——选修1:生物技术与实践】

              细菌荚膜的观察是微生物形态结构观察的基本内容之一。硅酸盐细菌在无氮培养基、钾细菌培养基及硅酸盐细菌培养基上均能生长,形成较厚的荚膜。下表1为无氮培养基的配方,表2是每种培养基上每个稀释度的菌落数及菌落直径的情况。请回答下列问题:


              (1)根据无氮培养基的配方可知,从物理性质上看该培养基属于_____________培养基;从  功能上看,该培养基属于_____________培养基,理由是__________________________。

              (2)常见的培养基用___________________灭菌。

              (3)为统计硅酸盐细菌的数目,应采用_____________法进行接种,该方法的所有操作都应在_____________附近进行。

              (4)进行上述实验的同时也设置了空白对照,若空白对照的培养基中_____________,说明培养基灭菌合格。根据表2中的数据可以得出,用_____________培养基筛选硅酸盐细菌的效果最好。

            • 8. 研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。

              (1)柚皮易焦糊,宜采用____________法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。

              (2)筛选乳酸菌A的操作中,对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。

              (3)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

            • 9.

              某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)实验的主要步骤如图所示。请分析回答问题:

              (1)培养基中加入化合物A的目的是筛选______,这种培养基属于____________培养基。

              (2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的____________,实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是____________。

              (3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量____________的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量__________。(两空均填“增加”或“减少”)

              (4)某同学计划统计污水池中目的菌的总数,他选用10-4、10-5、10-6稀释液进行涂布平板,每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验是________________,此对照实验的目的是证明培养基制备过程中________________。

            • 10.

              某生物兴趣小组为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示。请分析回答问题:


              (1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理:在以尿素为唯一氮源的培养基中加入         指示剂,细菌合成的        将尿素分解为         ,pH升高,使指示剂变为红色。

              (2)培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌,这种培养基属于        培养基。

              (3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的               ,实验中需要振荡培养,原因是                                      

              (4)下图是利用            法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。通常还可以           方法分离到一个细胞繁殖形成的菌落。

              (5)关于图中的操作方法和结果,叙述正确的是             

               A.操作时要将接种环放在火焰上灼烧灭菌

               B.划线操作须在火焰旁进行

               C.多次划线后培养才可以分离到一个细胞繁殖形成的菌落

               D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

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