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            • 1.

              下列有关微生物培养、纯化及筛选的叙述,正确的是

              A.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应立即快速挑取菌落
              B.平板划线操作中第二次及其后的划线应从上一次划线的末端开始
              C.筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源
              D.在纤维素—刚果红培养基上,能产生透明圈的为纤维素分解菌
            • 2.

              微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油,增大石油的乳化度,降低石油黏度的原理,通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题:

              (1)土壤是微生物的大本营,该类微生物应取自___________________________的土壤。

              (2)为筛选和纯化该类微生物,从功能上分,应选用__________培养基。常用的接种方法是_________和___________培养基。

              (3)接种后,应密封培养的原因是________________,培养一段时间后在培养基上形成降油圈,此时选取___________就可获得高效菌株。

              (4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计三个平板,菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为____________个/mL。该统计结果_________(填“低于”或“高于”)实际值。

            • 3.

              下列关于微生物培养的叙述,不正确的是

              A.倒置平板可防止培养皿盖上冷凝水滴落,造成污染
              B.高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子、芽孢
              C.划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落
              D.稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目
            • 4. 下表为某培养基的配方,有关叙述正确的是(  )

              A.依物理性质划分,该培养基属于液体培养基
              B.能在此培养基上生长的大肠杆菌,一定含有能合成青霉素的基因
              C.依用途划分,该培养基既属于选择培养基又属于鉴别培养基
              D.此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准 
            • 5.

              常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌。操作如下:

              (1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作,待平板冷凝后,要将平板倒置,其主要原因是______________________________________。获得纯净培养物的关键是____________________。

              (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是________。在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是__________________________。划线的某个平板经培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是______________________________。

              (3)将自然界中采集到的葡萄带回实验室,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以木糖为唯一________的固体培养基上,在适宜的条件下培养一段时间,获得能利用木糖的多个酵母菌__________。实验中所用培养基按功能属于__________培养基。

              (4)若要检测土样中的酵母菌含量,应采用__________________法。在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间,这样做的目的是______________________________。然后,将1 mL土壤溶液分别稀释10倍和100倍,各在3个平板上分别接入每种稀释度的稀释液0.1 mL,经适当培养后,6个平板上的菌落个数分别为59、57、58、2、7和5,据此可得出每升土壤溶液中的活菌数为____________个。

            • 6.

              I.现有五种不同的抗生素(甲、乙、丙、丁、戊),要测它们对金黄色葡萄球菌的作用效果。图1表示在均匀接种了金黄色葡萄球菌的固体培养基上,分别于不同位置加入2mg不同的抗生素的实验结果(图中●为添加点)。图2表示这五种抗生素对成人产生毒副作用的剂量。请回答:



                            图1                                                  图2


              (1)由图1可知,_______种抗生素的抗菌效果最好。

              (2)如果给予剂量为2mg,那么________种抗生素最适宜成人使用,理由是_____________。

              (3)已知丁种抗生素作用的原理是抑制金黄色葡萄球菌细胞壁的形成,由此推测该种抗生素对成人的毒副作用较小的可能原因之一是___________________________。

              (4)为保证培养基上能均匀地生长出一层金黄色葡萄球菌,将菌液接种到固体培养基上时宜进行____________(填“涂布平板”或“平板划线”)操作。实验过程中,与用于计数的平板接种不同的是本实验要保证滴加到培养基上的菌液_______________,以缩短培养时间。

              (5)本实验过程中所使用的无菌技术,除用来防止培养物(金黄色葡萄球菌)被其他外来微生物污染外,还能_______________。



              II.人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛,以便通过乳腺生物反应器生产HSA,其主要技术流程如图1所示。请回答:


                                                          图1


              (1)如图1所示,将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中,该技术称为_________技术;供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞,其原因是_________________________。

              (2)胚胎移植时,为使代孕母牛能处于适合的生理状态,需要用激素对其进行_______处理。

              (3)采用SRY-PCR法进行性别鉴定的基本程序是提取牛胎儿成纤维细胞的DNA,经PCR反应体系扩增SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段,然后用SRY特异性探针对扩增产物进行检测。

              ①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外,还应含有____________;其中,dNTP的作用是____________________________________,引物应选用图2中的________(填图中标号,图2中I、II、III、IV是引物,箭头是延伸方向)。




                                            图2


              ②若扩增产物含大量SRY基因片段,则该种牛胎儿成纤维细胞______(填“能”或“不能”)用作图1所示技术流程中转化过程的受体细胞。

            • 7. 现有两种固体培养基,已知其配制时所加的成分如下表:

              用这两种培养基分离土壤中的两种微生物,你认为它们适于分离(     )

              A.甲培养基适于分离自养型自生固氮菌;乙培养基适于分离异养型自生固氮菌
              B.甲培养基适于分离酵母菌;乙培养基适于分离真菌
              C.甲培养基适于分离异养型自生固氮菌;乙培养基适于分离自养型自生固氮菌
              D.甲培养基适于分离异养型共生细菌;乙培养基适于分离异养型共生固氮菌
            • 8. 胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得,流程如下:

              (1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时,可选用______________或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环,其目的是______________________。

              (2)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供________和________。

              (3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和________以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用________方式加热以防止温度过高;萃取液浓缩前需进行过滤,其目的是__________________。

              (4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为____________。

            • 9.

              如表是某微生物固体培养基的配方。请回答下列问题:

              成分

              含量

              成分

              含量

              蛋白胨

              10.0 g

              乳糖

              5.0 g

              蔗糖

              5.0 g

              KHPO2

              2.0 g

              MgSO4·7H2O

              0.2 g

              12.0 g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000 mL

                  (1)根据培养基的成分分析,所培养微生物的同化作用类型是____________,表中的“?”应该是________________________。

                  (2)如图所示在用稀释涂布平板法进行接种时,不能得到的是图____________。统计饮用水中大肠杆菌数目时,____________(填“需要”或“不需要”)设置对照,原因是___________________。

                  (3)若要分离分解尿素的细菌需将培养基中的____________换成____________;若要鉴定分解尿素的细菌还需在培养基中添加____________指示剂。

            • 10.

              (1)亚硝酸盐在特定的条件下会转变成致癌物—— _________。

              (2)倒平板时,要将冷凝后的平板倒置的原因是___________________________ 。

              (3)统计微生物数目常用的两种方法是_________________和_________________。

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