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            • 1.

              现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质,利用动物细胞培养的方法能够鉴定它们是否有毒性,并比较二者毒性的强弱,请完成下列实验报告。

              I.实验材料:小白鼠胚胎。

              Ⅱ.药品用具:胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。

              Ⅲ.实验原理:________________________________________________,根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。

              Ⅳ.实验步骤:

              (1)制备细胞悬液:把小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬液。

              (2)进行细胞培养:

              ①取标记好的A、B、C三个洁净的培养瓶,______________________________。

              ②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙,___________,并将培养瓶摇匀。

              ③把三个培养瓶放在37℃(适宜温度)的细胞培养箱中培养。

              (3)制作临时装片:

              ①当细胞繁殖到大约第8代左右时,同时从细胞培养箱中取出三个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,使培养的细胞从瓶壁上脱落,再加入动物细胞固定液迅速杀死细胞,将细胞固定在不同的分裂时期。

              ②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬液。滴在与培养瓶有相同编号的载玻片中央,加1-2滴一定浓度的 __________ 染色,3-5 min后,盖上盖玻片,制成临时装片。

              (4)镜检和统计:把临时装片放在显微镜下,寻找处于 _______  期的细胞,并与 小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片对比以确认发生上述变异的细胞,同时统计该期变异的细胞占细胞总数的百分数(Q值)。

              V.实验结果:

              培养瓶

              A

              B

              C

              Q值

              1.3%

              12.5%

              0.1%

              Ⅵ.实验结论: ___________________________________________

            • 2. 某研究小组以同一品种芹菜根尖和花粉母细胞为材料,开展芹菜染色体核型分析实验。图1、图2是从两种材料的30个显微图像中选出的两个典型图像。请回答下列问题:

              图1图2


              (1) 将剪取的芹菜幼根置于2 mmol·L-1的8- 羟基喹啉溶液中处理,以提高根尖细胞中有丝分裂的____期细胞的比例,便于染色体观察、计数。 

              (2) 实验中用纤维素酶和果胶酶混合液分别处理根尖、花粉母细胞,目的是___________。再用低浓度的KCl处理一段时间,使细胞适度膨胀,便于细胞内的____更好地分散,但处理时间不能过长,以防细胞______。 

              (3) 图1是____细胞的染色体,判断的主要依据是____________。 

              (4) 分析根尖细胞染色体核型时,需将图像中的______进行人工配对;根据图1、图2能确定该品种细胞中未发生的变异类型有____(填下列标号)。 

              ①基因突变 ②单体 ③基因重组 ④三体

            • 3.

              下图为相关实验过程或所得结果示意图,分析并回答问题:
                                   

              图1     图2                   图3                    图4             图5

              (1) 若图l中试管内为新鲜的苹果汁(已加入斐林试剂),经水浴加热后,试管内有________色沉淀出现。

              (2) 若图2为白色洋葱鳞片叶外表皮置于质量浓度为0.075 g/mL的胭脂红溶液中(胭脂红是一种水溶性的大分子食用色素,呈红色),在光学显微镜下观察到的图像,则A处的颜色为________。

              (3) 图3是利用洋葱根尖进行的有丝分裂实验图像,细胞D与细胞E的染色体数之比为________。 

              (4) 在探究培养液中酵母菌种群数量动态变化的实验中,某同学在显微镜下观察血球计数板计数室内的酵母菌,若该同学观察到每个小方格内的酵母菌平均数量如图4所示(已知菌液被稀释了100倍),则1 mL酵母菌原液中含酵母菌________个。

              (5) 图5是利用新鲜菠菜叶进行色素提取和分离的实验结果,若取材合适且提取色素的过程操作很规范,但得到的滤纸条上的色素带颜色均非常淡,可能的原因除了滤纸条湿度大,没有预先干燥处理外,最可能的原因还有________________。若欲探究不同植物新鲜叶片中色素种类与含量的差异,请你写出实验的主要思路:_____________________________________。

            • 4.

              细胞周期失控是癌症的一个标志性特征,细胞周期素依赖性激酶(CDK)4和6是细胞周期的关键调节因子,CDK4/6在许多细胞中均过度活跃,导致细胞增殖失控。在雌激素受体阳性乳腺癌中,CDK4/6的过度活跃也非常频繁。I brance是一种口服CDK4/6抑制剂。为了验证I brance对乳腺癌细胞体外生长的作用,请根据以下提供的实验材料,完善实验思路,并回答以下问题。

                  说明:细胞的数量通过测定相应培养瓶的吸光度值表示,具体操作过程不做要求;细胞抑制率=(1-实验组吸光度值/对照组吸光度值);CDK4/6活性可用抗原抗体法进行检测,具体检测过程不做要求。

                  材料和用具:细胞培养瓶、乳腺癌细胞(MCF-7)悬液、乳腺癌细胞培养液、MTT仪器(测定细胞培养液的吸光度)、不同浓度的I brance溶液(用生理盐水配制)、生理盐水、CDK4/6活性检测试剂

                  (1)实验思路:

                  实验结果:①实验组细胞的抑制率高于对照组,在三组实验组中,I brance浓度越高抑制率越大。

                  ②CDK4/6活性在对照组中最高,在三组实验组中,I brance浓度越高CDK4/6活性越低。

                  (2)根据(1)中的思路和结果,设计一张表格用以记录实验结果。


                  (3)研究发现实验组处于细胞周期S期细胞的比例均显著减小,且随着药物剂量增加,S期细胞的比例减少,由此推测CDK4/6在细胞周期中的作用机理是________________。虽然药物I brance抑制乳腺癌细胞的生长十分有效,但在后期的临床研究中,发现其也可引起患者中性粒细胞数目显著下降,根据这一结果,推测其可能影响免疫系统的第________________(选填“一”“二”或“三”)道防线。

            • 5.

              如图所示表示“观察植物细胞的有丝分裂”实验的主要操作步骤。请据图回答问题:

              (1) 步骤甲称为__________________。

              (2) 步骤乙的目的是______________________________。

              (3) 步骤丙常用的化学试剂是____________________。

              (4)在步骤丁的操作过程中,将酥软的根尖放在载玻片上的水滴中,盖上盖玻片后,还要进行的操作是____________________________________。

              (5) 某学校不同班级学生在同一天不同时间进行了上述实验,结果发现实验效果有明显差异。为了探究该实验取材的最佳时间,请你简要写出实验的主要思路:____

            • 6.

              利用小麦(6N=42)、大麦(2N=14)为材料,在25 ℃恒温条件下培养并观察其根尖细胞分裂周期及各分裂时期的细胞频率,结果如下表所示。请据表分析并回答:

              植物的

              种类

              前期

              /%

              中期

              /%

              后期

              /%

              末期

              /%

              分裂期

              /h

              细胞周

              期/h

              小麦

              67.30

              10.20

              9.10

              13.40

              1.2

              14.0

              大麦

              65.10

              12.10

              9.30

              13.50

              1.0

              10.4


              (1) 制作根尖临时装片的过程为取材→____________(用箭头和文字表示)。该过程需对根尖细胞的染色体进行染色,下列染色的试剂中不可选择的是____。

              A. 苯酚品红染液    B. 苏丹Ⅲ染液

              C. 龙胆紫溶液 D. 醋酸洋红溶液

              (2) 每种植物取4个根尖,每个根尖装片选取处于____较多的3个视野,统计其细胞数,进而计算出各个分裂时期占分裂期的细胞频率。实验时需选取多个根尖及视野以进行____________,从而减少实验误差。

              (3) 请在相应坐标图(如图)中,画出小麦分裂期细胞内一条染色体上的DNA数目变化曲线。

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