4．
随着妊娠年龄的增加，21一三体的发病风险在不断增加．需要进行产前诊断来预防患病孩子的产生。常用的方法有：
(1)唐氏筛查：抽取孕妇血液化验，检测血清中的甲型胎儿蛋白、绒毛膜促性腺激素等指标。检测这些物质可用__________技术，以细胞工程技术生产的、纯度高的_____________为试剂进行检测，筛查出的高危孕妇还需要进一步检查鉴定。
(2)羊水检查：胎儿的某些细胞会脱落在羊水中，通过羊水穿刺，可以得到胎儿的细胞。将这些细胞通过___________技术以扩大细胞的数量，选择______的细胞进行染色体核型分析，了解胎儿细胞染色体的结构和___________是否正常。
(3)无创基因检测：在孕妇的血液中存在胎儿游离DNA片段，可以对21号染色体上的特有基因DSCR3和非21号染色体上的基因GAPDH(做参照)进行实时荧光定量PCR扩增，以测定DSCR3基因和GAPDH基因的含量，计算2种基因剂量的比值。如：
| 样品数 | DSCR3／GAPDH |
正常人 | 80 | 0.884±0.420 |
21-三体胎儿 | 5 | 1.867±0.054 |
21-三体患者 | 7 | 1.810±0.169 |
要利用胎儿游离的DNA片段扩增出相应的基因，关键是_________的设计。从上述表格看，正常人与21-三体患者的比值有差异，其主要原因是____________利用该技术筛查21-三体的胎儿是否可靠，请说明理由：_____________。