[生物——选修1：生物技术实践]

请回答下列与果酒制作、微生物的培养有关的问题：

（1）葡萄酒是一种由纯果汁发酵制成的酒精饮料。在酒精发酵过程中所利用的微生物是________，检测发酵是否产生酒精的试剂是________。

（2）酒精发酵所需的微生物可以从葡萄酒中分离获得，方法是：

第一步：配制琼脂固体培养基。

第二步：对培养基进行________灭菌。

第三步：采用________法进行接种。

第四步：在20℃左右温度下培养，挑选符合要求的________。

一、[生物——选修1：生物技术实践]人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质——培养基，培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。

（1）培养微生物常用牛肉膏蛋白胨培养基，其中牛肉膏可以为微生物提供________（填“碳源”、“氮源”或“碳源和氮源”），培养基中常加入________作为凝固剂。

（2）培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加________，培养霉菌时需要将培养基的pH调至________（填“酸性”、“中性”或“碱性”）。如果要鉴定大肠杆菌，培养基中需要加入________，大肠杆菌的菌落呈现黑色；如果要纯化大肠杆菌，可采用平板划线法或________法进行接种。

（3）制作果酒时，在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。该过程中，缺氧、呈酸性的发酵液相当于一种________（功能）培养基，温度一般控制在________。

二、[生物——选修3：现代生物科技专题]

科学家利用基因工程技术创造出了“蜘蛛羊”、“抗虫棉”等转基因生物。请回答有关基因工程的问题：

（1）科学家要想成功获得上述生物，其实施基因工程的第一步是获取________，可采用________技术大量扩增上述物质。

（2）基因工程的核心步骤是________；其中启动子是________识别和结合的部位；终止子相当于一盏红色信号灯，使________（过程）在所需要的地方停止下来；标记基因的作用是________。

（3）检测目的基因是否翻译成蛋白质常用的方法是________法；在检测导入目的基因的棉花植株是否抗虫时，需要进行________水平的鉴定。

[生物——选修1：生物技术实践]

牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况,也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如下图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次。请回答下列有关问题:

（1）巴氏消毒的方法是_______________,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是______________________________。

（2）取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布,应选择的涂布工具是下图中的_______________。

（3）图中所示方法为稀释培养法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为_______________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值_______________(填“偏大”或“偏小”),原因是_______________。

（4）消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应做什么改动? _______________。

（5）从生牛奶取样培养得到的菌落中,混有各种杂菌,从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加人_______________,菌落具有_____________特征的可以认定为大肠杆菌。

[生物---一选修1:生物技术实践]

在葡萄酒酿制过程中，有许多需要注意的环节，请回答下列有关问题：

(1)用于酿制葡萄酒的主要微生物是          ，酒精发酵一般将温度控制在            。

(2)工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，需更大程度地抑制其他微生物的生长，采取的措施是对原料和设施进行          和               ,并接入合适的菌种。

(3)在制作葡萄酒的实验中，向发酵瓶中装人葡萄汁时，要留有大约           的空间。如果要继续制作葡萄醋，在发酵后期要向发酵液中通入           ，以保证发酵液处于          环境，并将发酵液置于           的温度环境中，一段时间后，发酵液中会出现醋酸菌。

根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：

（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入      制成选择培养基进行分离。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是       。

（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是            。

（3）在月季花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感，一般来说，在     期，花药培养成功率高。

（4）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是                ；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是                 。

（5）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置10天后制的豆腐乳。在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，其原因是豆腐中蛋白质被微生物产生的         分解。最终使         含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。

（6）血红蛋白的分离一般采用法和电泳法，前一种分离方法是根据来分离蛋白质。

[生物—选修1：生物技术实践]

   牛的食物主要是草茎类，其中含有大量的纤维素。牛胃内的微生物，在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用。回答下列问题：

（1）纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，组成纤维素的单体为________。牛胃中某些微生物能够产生纤维素酶，这种酶是一种复合酶，其中的________能使纤维素分解成纤维二糖。

（2）实验室培养牛胃内的微生物，分离得到高纯度纤维素分解菌的关键环节是________。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行；倒平板用的培养皿需要保持干燥，可以采用________法进行灭菌。

（3）为了从牛胃的食糜中分离出纤维素分解菌，配制的选择培养基要以________作为唯一碳源。筛选纤维素分解菌时，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是________。在涂布平板时滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，原因是________。

请回答下列生物技术实践方面的问题：

（1）在果酒的制作中，在有氧条件下酵母菌进行有氧呼吸，进行________；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，产生________。在果醋的制作中，当________都充足时，醋酸菌将糖分解成醋酸；当缺少________时，醋酸菌将乙醇→乙醛→醋酸。

（2）微生物接种的方法很多，最常用的是________和稀释涂布平板法，其操作方法各不相同，但核心都是要________，保证培养物的纯度。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行。

（3）DNA的粗提取实验中两次使用蒸馏水，但其目的不同。第一次的目的是使鸡血细胞吸水涨破；第二次的目的是________，使DNA逐渐析出。

请回答下列与大肠杆菌有关的问题：

（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于            ；它的同化作用类型是           。

（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

根据用途划分该培养基属于         培养基（选择、鉴别）。该培养基中的碳源是             ，氮源是               。

（3）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是              和               。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行             。

（4）现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释10³稀释度。各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为           。

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是                                            。

（6）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是____________。

A．制作果酒        B．制作果醋    C．制作泡菜         D．制作腐乳

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起食物中毒、肺炎、肠炎等。某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计数实验”，部分实验处理和结果如下图。（注:培养皿旁的数字代表菌落数目；实验室条件满足金黄色葡萄球菌的生长繁殖；实验操作规范；实验过程严格做好各项防护防扩散等工作）

请回答相关问题

（1）在实验室培养微生物，获得纯净培养物的关键是                    。

（2）据图，研究小组采用的是_______法分离和计数金黄色葡萄球菌。由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9mL生理盐水的4支试管______，并编号1—4号；第二步，用移液管从样品中吸取1mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推，4号试管的稀释倍数是_____。

（3）资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%—15%NaCL的肉汤中生长;本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为_______培养基，以利金黄色葡萄球菌的生长，抑制或阻止其他微生物的生长

（4）通过观察菌落特征可区分不同种类微生物，这些特征包括菌落的________、     、     和     等方面；在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确。据图可得出1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为_____。