在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。

(1) 下图是利用____________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。

 (2) 分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述_______成分，并加入______物质，以补充______源。若用于培养纤维素分解菌，应加入________物质，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入_______染料，含纤维素分解菌将形成__________圈。

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示，请据图回答有关问题：

（1）过程①②合称为______________________。从功能上看，Ⅰ号培养基属于____________；该培养基中必须以_______作为唯一碳源。 Ⅱ号培养基的接种方法为___________________。

（2）对配制的培养基采用的灭菌方法是__________________________________。

（3）在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的______________；也可将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图所示情况，可判断图中周围___

_________的菌落含有所需菌种。

（4）如果高温淀粉酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择下图中的______（填写字母）固定化工艺。

有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示.

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________。

（3）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_________________________，该实验设计是否合理？为什么？_________________________________________________________________。

(1)图中接种细菌的方法是_________。用该方法接种的目的是观察菌落的________和________。

(2)图中用于培养细菌的培养基能够为细菌提供的基本营养物质是_______________________,为确定马桶按钮上大肠杆菌数目，需在培养基中加入__________________用于鉴别。

(3)两个电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为可能原因有：

    ①__________________________      ②____________________________

(4)根据实验结果为了保证健康我们使用手机一段时间后应对手机进行______________。

A（选修一生物技术实践专题）

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答下列问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。

（2）为选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈大小，分解圈大说明该菌株降解能力________。

（3）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和________。

（4）为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。为了排除________，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。

（5）在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和________。

B（选修三现代生物科技专题）

转基因水稻“金色大米”可以帮助人们补充每天必需的维生素A。由于含有可以生成维生素A的β－胡萝卜素，呈现金黄色泽，故称“金色大米”。培育流程如下，请据图回答：

备注：已知限制酶I识别序列和切点是；限制酶II的识别序列和切点是－CTAG↑－

（1）图中a、b所示获得目的基因的方法是________；能在短时间内得到大量目的基因的方法是________。培育“金色大米”基因工程操作四步中，核心步骤是________。

（2）据图分析，在构建c的过程中，目的基因用限制酶________（填I或II）进行了切割。

（3）将重组质粒c导入番茄细胞常用的方法是________，该方法的实施与番茄叶片受损后分泌的________化合物有关。检测转化成功的番茄植株，可采用________技术检测目的基因在番茄体内是否成功翻译。

（4）若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含β－胡萝卜素量更高、效果更好，则需要通过_______工程手段对合成β－胡萝卜素的相关目的基因进行设计。

（1）根据你的生活经验推测，伯德这项研究的“土壤样品”最可能取自于               。

（2）图中“…”表示对土壤悬浮液进行一系列的                    ，目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在Ⅰ号培养基表面形成单个            。

（3）I号培养基属于     培养基，其作用是使目的菌能“脱颖而出”．如图采用的接种方法为      

             。使用Ⅱ号培养基的目的是使目的菌数目增多，培养基中必须包含水、无机盐、                   等基本营养成分，从物理性质来看，Ⅱ号培养基中不能添加                     。

（4）为避免杂菌污染培养物和环境，微生物培养的培养基在接种前和完成实验后都要进行              。接种时要在                   操作。

I:回答与微生物有关的问题：

（1）泡菜在发酵过程中，起作用的微生物主要是_____和乳酸菌，其发酵产物中含有有机酸和_____等．

（2）腌制的食物中往往含有少量的亚硝酸盐，对亚硝酸盐的定量测定可以用_____法，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与_______偶联成_____色化合物．在实验过程中，测定的是_____值，以反映溶液中亚硝酸的含量．

（5）若存在杂菌污染，欲消除污染的杂菌，最简单的方法是________

（6）在培养大肠杆菌过程中，有关操作正确的是_____．

A．玻璃刮刀和接种环一样，只需灼烧灭菌

B．培养基分装到培养皿后进行灭菌

C．倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行

D．获得的菌种如果需要保存，可置于37℃恒温保存．

II：回答与基因工程有关的问题：如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径．据图结合所学知识回答下列问题：

（1）①过程称为________，该过程中常用的酶有_________________，为了便于将含有目的基因的细胞筛选出来，所选择的质粒上应该具________．

（2）培育转基因羊的过程中，科研人员通过_______技术将重组质粒M转移到受体细胞A中，受体细胞A应该是_______（填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵）．

（3）莴苣为双子叶植物，过程②常用的方法是___________，导人该细胞后，需对该细胞进行培养，经_________过程形成愈伤组织，再分化成幼苗长成转基因莴苣植株，此过程涉及的细胞工程技术是__________，该技术的原理是 ________________。

（4）过程⑥常用的方法是用________来处理大肠杆菌，使其易于吸纳重组质粒M．

结合以下图表分析，有关说法正确的是( )

A.青霉素和利福平能抑制DNA的复制 
B.环丙沙星和红霉素分别抑制细菌的①②和③ 

C.结核杆菌的④和⑤都发生在细胞质中  

D.①～⑤可发生在人体健康细胞中

（1）根锯培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌_____ （能/不能），原因是                                  。

（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用             法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的__________就能大约推测出样品中活菌数。

（3）接种前要对培养基进行___________。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_______条件下进行。

（4） 一同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是                  ,应当怎样操作才可避免此种现象？_______________________。

（5）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是______________。对胡萝卜进行粉碎、干燥时，要特别注意干燥的__________和时间，以防止胡萝卜焦糊。

(1)绿茶是不经发酵制成的茶。在制作绿茶的工艺中．有一道工序是迅速将温度提高到70℃左右，目的是                                   ，从而保证茶叶鲜绿的颜色。

(2)红茶菌液是一种传统的活菌饮料，制作流程是制作红茶糖液一接种红茶菌种一发酵一红茶菌液。红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共同体，可以用                    法分离纯化并计数。在接种活菌之前，红茶糖液要先煮沸后冷却，这是为了                                  。

(3)茶农在种植过程中喷施农药以预防害虫，但降低了茶叶的品质又污染了环境。为了解决这一难题，科学家用基因工程技术获得了具有抗虫基因的茶树体细胞，其间用到的工具是                。然后利用植物组织培养技术实现优良茶种的繁殖从而得到大量无病毒植株，其原理是        

       。在培养过程中，外植体要经过                 过程获得试管苗。

(4) 某研究小组完成对新鲜绿色茶叶进行叶绿体中色素的提取和分离实验时，由于各组操作不同，出现了以下两种不同的层析结果。出现如图结果最可能的原因是                       。实验室分离色素的方法为             法。茶叶中可能含α-淀粉酶，用               分离α-淀粉酶，α-淀粉酶相对分子质量较大，在色谱柱中移动速度      。