[生物——选修1：生物技术实践]

[生物——选修l：生物技术实践]

研究人员从土壤中筛选获得能降解苯酚的细菌菌株，以降解工业废水中的苯酚，其主要步骤如图所示。请回答下列问题：

(1)图②中培养目的菌株的培养基中应以________为唯一碳源，从功能上讲，该培养基属于________培养基。若要测定②中活细菌数量，应采用的接种方法是__________。在显微镜下用血细胞计数板直接计数所得到的细菌数目往往比实际活菌数目偏大，原因是______________________。

(2)若要长期保存目的菌，不采用图中⑦的保存方法，而用__________的方法。实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后才能倒掉。

(3)在接种到图中⑥之前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是______________。

【生物——选修模块1：生物技术实践】

我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆落含量进行检测，操作简图如图甲，伊红美蓝培养基配方如图乙。

回答下列相关问题：

（1）图甲中滤膜的孔径应________（“大于”或“小于”）大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？________。

（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入________（一种营养成分），以及________。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于________培养基。

（3）该小组通过统计________的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际________（“偏高”或“偏低”），理由是________。

[生物——选修1：生物技术实践专题]

   科学家发现有些细菌可分解原油，从而可消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于________培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和________。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

[生物选修1 生物技术实践]

某生物兴趣小组的同学，利用洗衣机内桶背面的污垢进行了相关实验。下图是某同学分离和培养洗衣机中微生物的部分操作步骤和实验结果示意图。

（1）图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，该操作称为________。

（2）在培养洗衣机中细菌的实验中，应在接种前检测固体培养基是否被污染，具体检测的方法是________。

（3）图2是平板划线法接种操作示意图，操作顺序是A→B→________（用字母和箭头表示）；以上操作中存在错误的步骤是________（用字母表示）。

（4）将以上接种后的平板置于培养箱中培养时需倒置，原因是________。

（5）在检测洗衣机的污垢中是否含微生物时，也有同学先将污垢制成一定浓度的水样溶液，然后用移液枪取0.1ml菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固体培养基的表面进行培养，这种方法称为________。经一段时间培养后，图3中发现有纤维素分解菌，筛选纤维素分解菌的方法是________。

下表是一种细菌培养基配方，请回答下列问题：

（1）该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供               。

（2）该培养基属于              培养基（多选）。

A．液体     B．固体      C．鉴定      D．选择         E．天然

（3）如果要对培养基的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行            。

（4）制备培养基的操作步骤是                 。（用下列字母排序）

a．倒平板     b．计算    c．溶化   d．称量    e．灭菌

A．a→b→c→d→e                          B．e→b→d→c→a      

C．b→d→c→a→e                       D．b→d→c→e→a

（5）某同学用稀释涂布平板法测定一个土壤样品中的细菌数（取10克该土壤加90ml无菌水制成稀释液）。在对应稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为：121、212、256，则每克该土壤样品中的菌落数为            。

为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是                        ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为        。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过         灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是          。

（3）示意图A和B中，         表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的            的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高      的利用率。

第三步：微生物的培养与观察。将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，并在适宜的条件下培养。分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖，而                       则不能生长繁殖。（注：实验中所用的培养基经检测符合要求，且均在无菌条件下操作）

若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定，需在上表培养基配方中添加的物质是__________________。若分离得到的是尿素分解菌，则培养基中pH升高使酚红指示剂变为_____色（1分），pH升高的原因是______。

（4）细菌的数目可以通过滤膜法来测定，例如测定饮用水中大肠杆菌的数目。将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现__________，根据培养基菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。