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            • 1．

              [生物——选修1：生物技术实践]

              下图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，据图回答：

              （1）细菌培养基的成分一般都含有碳源、水、________、________四类，该实验所用的选择培养基只能以________作为唯一氮源，其原因是________。鉴别培养基还需添加________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成________色。

              （2）统计样品中活菌数目常用的方法是________：在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191，每毫升土壤样品溶液中的细菌数量为________×108个；与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数目较________。

              （3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________（需答两条）。

              难度：中等
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            • 2． 细菌对各种抗生素的药敏程度实验方法如下：在固体培养基中培养着状况相同的某种细菌，将含有一定浓度不同抗生素的滤纸片放置在不同固体培养基的表面，抗生素向周围扩散，如果抑制生长，则在滤纸片周围出现抑菌圈（图中里面的圈），结果如图所示．

              （1）衡量本实验结果的指标是 ______ ．
              （2）上述图中最有效的是 ______ 培养皿中的抗生素．
              （3）用上述最有效的抗生素对细菌进行处理，并测定细菌数量变化，如图所示：
              ①向培养基中加抗生素的时刻为 ______ 点．
              ②细菌种群进化是定向的，而变异是 ______ ，细菌的抗药性产生于环境变化之 ______ （填“前”“中”或“后”），抗生素对细菌变异的作用不是“诱导”，而是 ______ ．
              ③尽管有抗药性基因存在，但使用抗生素仍然能治疗由细菌引起的感染，原因在于细菌种群中 ______ ．
              难度：中等
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            • 3． 分析下列有关微生物材料，回答问题：
              右图中的4支试管代表4种微生物（固氮菌、产甲烷菌、酵母菌、幽门螺杆菌）在半固体培养基中的生长状态，其中乙试管代表幽门螺杆菌的生长状态．右表则表示2号培养基的成分与含量． 
              成分 葡萄糖 K2H2PO4 MgSO4 NaCl CaSO4 CaCO3 琼脂 蒸馏水
              含量 10g 0.2g 0.2g 0.2g 0.2g 5g 3.5g 1L
              （1）幽门螺杆菌的代谢类型可能是 ______ ．
              （2）甲、丙、丁三个试管中的微生物可能分别是 ______ 、 ______ 、 ______ ．
              （3）在2号培养基中加入人体血清后能否培养乙肝病毒，试说明原因 ______ ．
              （4）丁试管中的微生物在2号培养基内不能生长，原因是 ______ ．但与圆褐固氮菌同时接种在2号培养基上可以正常生长是因为 ______ ．
              难度：中等
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            • 4． 微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术．以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作．请回答下列问题：
              （1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自 ______ 的土壤．
              （2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用 ______ 培养基，此培养基中添加 ______ 作为微生物生长的唯一碳源．培养基灭菌采用的最适方法是 ______ 法．常用的接种方法是 ______ 和 ______ ．
              （3）接种后需密封培养，由此推测该类微生物的代谢类型是 ______ ，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取 ______ 就可获得高效菌株．
              难度：中等
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            • 5． 尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：

              KH2PO4 1.4g
              Na2HPO4 2.1g
              MgSO4•7H2O 0.2g
              葡萄糖 10g
              尿素 1g
              琼脂 15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？ ______ ，理由是 ______ ．
              （2）培养基中氮源是 ______ ，这种培养基在功能上属于 ______ 培养基，目的是只允许能合成 ______ 的微生物生长，其他微生物均不能生长．
              （3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用 ______ 法进行接种．
              （4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入 ______ ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是 ______ 法．
              难度：中等
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            • 6． 玉米（2N=20）是重要的粮食作物，经深加工可以生产酒精、玉米胚芽油等产品，如图甲表示玉米深加工过程，图乙表示为了获得玉米新品种常采用的一种育种方式，请回答以下问题：

              （1）玉米秸秆的主要成分是 ______ ，酵母菌不能直接使用，要利用C1酶和CX酶分解成 ______ 后，再经 ______ 酶分解成葡萄糖才能供给酵母菌使用．
              （2）使用选择培养基从土壤中分离出能分解玉米秸秆主要成分的微生物，对培养基的要求是 ______ ，如果还要对土壤中该类微生物进行计数，则接种的方法为 ______ ．
              （3）为了使酵母菌最高效率的进行酒精发酵，需要满足的环境条件是无氧、温度为 ______ ℃．
              （4）如果在育种过程中，改变图乙②过程所使用的培养基中的 ______ 的种类及浓度配比，则可能不会形成愈伤组织，而是形成 ______ ．
              （5）如果在剥离花药时损伤了花药壁，则培育出的试管幼苗分裂中期细胞中染色体条数为 ______ ．
              难度：中等
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            • 7． 微生物在人们的生活生产中无处不在，为人类生活增添了诸多乐趣．
              （1）很多家庭都会酿酒．
              ①酿酒时先将米煮熟的目的是 ______ ．
              ②冷却到30℃后才能加酒药的原因是 ______ ．
              ③如果时常开坛盖舀酒，不久酒就会变酸，其原因是 ______ ．
              （2）中国的臭豆腐驰名中外，历史悠久．臭豆腐外观青色，但“闻着臭，吃着香”，臭豆腐的制备过程中，常用的微生物主要是 ______ ，在此过程中，豆腐相当于微生物生长的 ______ ．
              （3）在腌制泡菜过程中，主要起作用的微生物是 ______ ，用水封坛的作用是 ______ ；欲检测泡菜在腌制过程中亚硝酸盐含量，使用检测试剂后颜色的变化是 ______ ．
              （4）为获得一种能高效降解农药的细菌（目的菌），往培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转为固体培养基，常采用的接种方法是 ______ ；获得单军落后继续筛选，接种过程采用 ______ 灭菌；实验结束后，使用过的培养基应该进行 ______ 处理后才能倒掉，这样做是为了 ______ ，常用灭菌方法是 ______ ．
              难度：中等
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            • 8． 请回答下列生物技术方面的问题：
              （1）在传统发酵技术中，果醋的制作往往在果酒制作基础上进行，请用相关反应式表示： ______ ．
              （2）腐乳制作主要菌种是 ______ 它能产生 ______ 两种酶将水豆腐中两种主要大分子有机物分解成人体能吸收的具鲜味的小分子有机物．
              （3）分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O．若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述 ______ 成分，并加 入 ______ 物质．该培养基能否培养月季花药，为什么？ ______ ．
              （4）提取胡萝卜素的过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是 ______ ．胡萝卜素粗品鉴定的方法是 ______ ．
              难度：中等
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            • 9． 乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值．乳糖酶的制备及固定化步骤如下：
              （1）筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用 ______ 作为培养基中的唯一碳源．培养基中琼脂的作用是 ______ ．从功能上讲，这种培养基属于 ______ ．
              （2）培养微生物L前，宜采用 ______ 方法对接种环进行灭菌．
              （3）纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小．在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越 ______ ．
              （4）乳糖酶宜采用化学结合法（共价键结合法）进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的 ______ 确定其应用价值．除化学结合法外，酶的固定化方法还包括 ______ 、 ______ 、离子吸附法及交联法等．
              难度：中等
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            • 10． 解磷微生物能分解有机磷，可降低水体富营养化程度．如图是从湖泊污泥中筛选解磷微生物的过程示意图，下表是分离纯化的结果．请回答下列问题：
              记录项目：透明圈直径/菌落直径
              菌落编号 1 2 3
              48小时 1.6 2.8 3.0
              72小时 2.2 1.2 5.0
              96小时 2.3 1.2 4.2
              （1）培养基的成分主要有牛肉膏、蛋白胨、NaCl及无菌卵黄液，其中 ______ 主要提供有机磷．从土壤中富集解磷微生物时，应选用 ______ （固体、液体）培养基．
              （2）在倒平板前，应对玻璃器皿和培养基灭菌，灭菌方法是 ______ ．配制成l0-1浓度稀释液时，用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL，移入盛有 ______ mL无菌水的试管中，并依次配制10-2～10-10的梯度稀释液．
              （3）过程②、③为菌种分离纯化的过程，接种方法分别为 ______ 、 ______ ．
              （4）分析菌种的分离纯化结果，应选择为 ______ 号菌落进行扩大生产，原因是 ______ ．
              难度：中等
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