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            • 1.
              为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离和培养等工作。回答下列问题:
              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。为了检测培养基平板灭菌是否合格,可在涂布接种前, ______ ;然后,将1mL水样稀释1000倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.lmL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为 ______ 。
              (2)该小组釆用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过 ______ 灭菌,为了将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落,在第二次及以后的划线时,一定要 ______ 。示意图A和B中, ______ 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。通常,对获得的纯菌种可以依据 ______ 对细菌进行初步的鉴定和分类。
              (3)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培筹。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中 ______ 的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高 ______ 的利用率。
            • 2.
              尿素是一种重要的农业肥料,经微生物分解后能更好的被植物利用.某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌(目的菌).培养基成分如下表所示.
              KH2PO4 NaHPO4 MgSO4•7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
              1.4g 2.1g 0.2g 10g lg 15g
              将表中物质溶解后,用蒸馏水定容到100mL.实验过程如图所示:
              回答下列问题:
              (1)该培养基能筛选出目的菌的原因是______.
              (2)图中将细菌转到固体培养基上接种时,可采用的方法是______.初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定:在培养基中加入______指示剂,接种并培养初步筛选的菌种,若指示剂变成______色,则可说明该菌种能够分解尿素.
              (3)在实验中,下列材料或用具需要灭菌的是______,需要消毒的是______(填序号).
              ①培养细菌的培养基与培养皿
              ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管
              ③实验操作者的双手
              (4)在进行分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约50个菌落,而其他同学只选择出大约20个菌落.A同学的实验结果产生的原因可能有______(填序号).
              ①所取土样不同 ②培养基被污染 ③接种操作错误 ④没有设置对照实验
              (5)实验结束后,使用过的培养基应该进行______处理后,才能倒掉.
            • 3.
              苹果干腐病是一种名为茶藤子葡萄座腔菌真菌引起的疾病,病菌通常由枝条伤口入侵感染,在伤口处形成溃疡。某中学的科研小组计划分离出该真菌,并进行药物防治实验,为苹果干腐病的防治提供合理的建议。经过查阅资料,确定了分离时所用的PDA培养基配方,如表所示:
              物质 马铃薯 葡萄糖 自来水 氯霉素
              含量 200g 20g 1000mL 0.3g
              该真菌在上述PDA培养基上生长时有特定的形态特征:辐射状白色匍匐菌丝,绒毛状。
              (1)要获得菌落,则上表中还应添加的成分是 ______ 。氯霉素的作用是 ______ 。培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、 ______ 、倒平板。等平板冷却凝固后,将平板 ______ ,以防止冷凝水污染培养基。
              (2)用剪刀从染病枝条溃疡处剪取1×1cm2的患病组织,并用0.1%的升汞进行消毒,置于培养基中心,在合适条件下进行培养,共培养五组。待菌落形态特征稳定后,用 ______ 法将该致病菌分别转移至含有等量0.5%苦水碱剂、40%福美砷、清水的上述PDA培养基中进行抗药性实验,并每隔24h记录一次最后划线区域的菌落数目。
              ①选取 ______ 的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏的菌落数目。
              ②记录结果如下:
              小组 0.5%苦水碱剂 40%福美砷 清水
              菌落数目 2 8 17
              从结果分析可知, ______ 能很好的抑制该真菌的生长,适合防治苹果干腐病。
            • 4. 请根据所学知识回答下列生物技术实践中的有关问题:
              (1)通过花药培养产生花粉植株,该过程依据的生物学原理是    . 在花药培养中,常常会出现    的变化,因此需要对培养出来的植株做进一步的鉴定和筛选.
              (2)在配制用于植物组织培养的MS培养基时,往往需要加入适量的蔗糖,理由是    
              (3)分解纤维素的微生物可以从土壤中分离获得,分离的基本过程如下:土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落.其中选择培养的目的是增加    的浓度,以确保能够从样品中分离到所需的微生物,鉴别该种微生物需要加入的特殊物质是    ,该物质能够与纤维素反应生成红色复合物;如果某个菌落的周围出现了透明圈,说明该种微生物能够    
              (4)食品安全检测时通常采用大肠杆菌作为致病微生物的指示菌,为测定哪些菌落属于大肠杆菌,可选用    培养基对该菌落进行鉴定,大肠杆菌的菌落在该培养基上呈现    色.
            • 5. 选用下列实验材料能得到预期实验结果的是(  )
              A.用35S标记噬菌体研究DNA的半保留复制
              B.用人的成熟红细胞观察DNA、RNA的分布
              C.用富含枯枝落叶的土壤分离纤维素分解菌
              D.用T细胞和骨髓瘤细胞融合制备单克隆抗体
            • 6. 美国科学家发现了一种能将溶解在水中的铀还原成难以溶解的铀的地杆菌,可缩小铀污染的范围,而其他的细菌则不能在含铀的环境中生存.科学家为了研究这种地杆菌的生理特性,需对其进行分离和培养.请回答:
              (1)培养基中一般含细菌生长所需的水、无机盐、 等.制备培养基时常用的灭菌方法是 灭菌.接种时使用的接种环灭菌方法是 灭菌.
              (2)为分离出能够还原铀的地杆菌,可在培养基中加入  , 从用途上看,这种培养基称为 培养基.
              (3)对地杆菌计数时,常采用的方法是 法.在稀释倍数为106倍下涂布了三个平板(每次取0.1mL),统计菌落数分别为240、250、260,则稀释前1mL菌液中所含细菌为 个.
              (4)获取地杆菌后如要临时保存,可将其接种在 培养基上,等长成菌落后放在4℃的冰箱中保存.
            • 7. 炭疽杆菌是一类需氧芽胞杆菌,其代谢过程会将大量的代谢产物排出胞外.由炭疽杆菌引起的炭疽病是一种人畜共患、死亡率较高的急性传染病.对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过如图所示的实验确诊.请据图回答下列问题:

              (1)噬菌体的主要化学成分是 ,上述实验中噬菌体与炭疽杆菌的种间关系属于
              (2)微生物接种的方法很多,最常用的是 ,经上述方法获得的纯种微生物如需长期保存,可采用 的方法.
              (3)②是将分离培养获得的可疑菌挑选出来进行接种,此过程中对配制的液体培养基等需采取的灭菌方法是 ,该培养基所用的碳源为 (无机碳/有机碳).
              (4)在过程⑧中细菌大量繁殖,并因为 的积累而使液体培养基变浑浊.取培养后的等量菌液加入A、B试管,再将如图处理后的两试管放在35℃环境下培养6小时后观察,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组 (高或低),则证明疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除.
            • 8. 下列关于应用生物技术获得生物产品的过程,请回答下列问题:
              (1)酿酒时某同学尝试用罐头瓶制作果酒,在培养过程中,每隔12h左右将瓶盖拧松一次,此后再拧紧,这样做的主要目的,一是 ,二是避免氧气进入和杂菌污染.在酸性条件下,可用 来检测果酒发酵是否成功.如下图是采用纯化酵母菌培养的两种接种方法接种后培养的效果图.

              判断图A所用接种方法的依据是 ,图B的接种方法是
              (2)大量扩增DNA时可用PCR技术,该技术利用了DNA的 原理,通过控制 来控制双链的解聚与结合.PCR扩增得到的DNA序列长度是固定的,原因是 .
              (3)玫瑰在人们生活中具有多种用途.某同学在进行玫瑰组织培养时,可以选取生长旺盛的嫩枝做 , 并要进行 处理.
              (4)在玫瑰精油的提取实验中用(方法)提取,收集的乳浊液水油分层,需向其中加入 . 要除去分液得到的油层中的水分,还需向其中加入无水 .
            • 9. 研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示.

              (1)柚皮易焦糊,宜采用法提取柚皮精油,新鲜的橘皮要用 浸泡处理,该过程得到的糊状液体可通过 除去其中的固体杂质.
              (2)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供 .电泳法纯化乳酸菌素时,若分离带电荷相同的蛋白质,则其分子量越大,电泳速度 .
              (3)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈.可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果.
              (4)橘皮油也可用萃取法来提取,原因是 .分析图,提高萃取效果的方法是 、 .
            • 10. 玉米(2N=20)是重要的粮食作物,经深加工可生产酒精、玉米胚芽油等产品.下面图甲表示玉米深加工流程,图乙表示为了获得玉米新品种常采用的一种育种方式,请回答下列问题.

              (1)玉米秸秆中的纤维素在纤维素酶的作用下最终被水解成葡萄糖才能供给酵母菌利用,纤维素酶是由3种组分组成的复合酶,其中的可将纤维二糖分解成葡萄糖.纤维素分解菌能合成纤维素酶,人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌.分离纤维素分解菌常用的方法是 ;其实验流程是:土壤取样→选择培养→→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落.
              (2)使用选择培养基从土壤中分离纤维素分解菌,对培养基的要求是 . 如果还要对土壤中该类微生物进行计数,则接种方法是 
              (3)玉米胚芽油不易挥发,宜选用压榨法或法从玉米胚芽中提取.
              (4)在育种过程中,若改变图乙‚过程所使用的培养基中的 ,则可能不会形成愈伤组织,而是形成胚状体.若愈伤组织没有形成根,但分化了芽,其原因可能是 .
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