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            • 1.

              “创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识,通过实验证明痰液中含有细菌,来倡导同学们不要随地吐痰,为“创卫”添一份力。请回答下列问题:

              (1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物,该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H2O等;该培养基中微生物所需的氮源来自________,制备该培养基的步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板,其中灭菌常用的方法是_______________________________________________;培养基灭菌后,需要冷却到________ ℃左右才能倒平板,等平板冷凝后,还需要将平板倒置,主要目的是___________________________________________。

              (2)为了使实验更有说服力,某同学设置空白对照组和若干实验组,其中对照组的作用是____________________________________________________________。若在某次调查中,某一实验组平板上的平均菌落数为39个,而空白对照组的平板上出现了9个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

              (3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目,统计结果往往比实际细菌的数目要低,主要原因是:____________________________________。

            • 2.

              下面的图甲表示硝化细菌、酵母菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况,图乙表示这三种菌的增殖速度与氧气浓度之间的关系,请据图回答:

              (1)图乙中a、b、c三条曲线依次表示图甲中__________号试管中微生物在不同氧气浓度中的增殖速度。

              (2)研究发现,青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用。如果培养基中混杂了这三类微生物,请设计实验,利用改变培养基成分等培养条件,将酵母菌和硝化细菌分离出来。

              ①主要步骤:

              A.分别配制不含__________的培养基(A)和加入________的培养基(B),分别灭菌。

              B.分别接种混合液放在适宜条件下培养。

              C.观察结果。

              ②结果:在A培养基上生存的是____________,在B培养基上生存的是____________。

              (3)微生物培养过程中,获得纯净培养物的关键是________________。

            • 3.

              如图表示微生物的接种实验中的一些步骤。请回答下列有关问题:

              (1)步骤①前的一步操作是________。,该操作用到的主要仪器是________。

              (2)实验步骤②的目的是________,步骤②、③之间还需要将接种环________。

              (3)指出步骤④操作不当的地方________。

              (4)分别用三个平板培养三种细菌(E.coli、S.albus、B.subtilis),然后在培养基上打出直径为3mm的孔,并在孔中加入一定浓度的甲抗生素,经过一定时间培养后,可以在孔的周围观察到一圈清晰区,此乃抑制细菌生长所致。测量清晰区的直径(如图所示),数据如下表。

              细菌

               

              不同浓度甲抗生素条件下清晰区直径(mm)

              5μg/mL甲抗生素

              7.5μg/mL甲抗生素

              10μg/mL甲抗生素

              15μg/mL

              甲抗生素

              20μg/mL甲抗生素

              E.coli

              7

              10

              14

              16

              16

              S.albus

              5

              8

              13

              17

              B.subtilis

              5

              7

              9

              14

              19

              ①s.albus和B.subtilis对甲抗生素敏感的区别是________。

              ②有人感染E.eoli而患病,医生使用20μg/mL甲抗生素给予治疗,试用生物进化理论解释这种不明智的做法________。

              ③采养殖池中的水样1mL稀释100倍,吸取稀释后的水样1mL,接种于E.coli选择性培养基上培养。一段时间后观察菌落并计数,重复三次实验结果如图。该养殖池每mL水含有E.coli________个。

            • 4.

              根据下面的实验装置图(图甲、乙)和果酒的生产工艺流程简图(图丙)回答问题:


              (1) 图甲所示装置可用于提取________(填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”)。

              (2) 制作果酒时可选用图乙的装置。为适当提高果酒的生产速率,进气口应_________;排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,这样做的原因是_____________。

              (3)图丙为樱桃果酒生产工艺流程简图,其中冲洗的目的是_______________.樱桃榨汁前需要除去果柄,此操作是在冲洗之___(填“前”或“后”)进行的.为了提高樱桃的出汁率,在压榨前可加入一定量的____________酶.
              (4)若是从混杂的微生物中分离酵母菌应使用___________培养基.从微生物培养的角度分析,樱桃果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐和_____________.
              (5)在酒精发酵旺盛时,醋酸菌_______(填“能”或“不能)将果汁中的糖发酵成醋酸.
            • 5. 金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量人的血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题。

              (1)按细胞结构分类,金黄色葡萄球菌属于_________生物,从培养过程分析,金黄色葡萄球菌可进行____________呼吸。

              (2)用质量分数为7.5%的NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是_________________。

              (3)操作中在血平板上的接种方法是______________,接种操作前后需要对接种工具进行_____灭菌。

              (4)在制备血平板时需将pH调节至________(填“微酸性”或“微碱性”)后灭菌,待培养基____________后,再加入适量血液。按培养基功能分类,血平板属于________培养基。

              (5)经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现______________________的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是________________________________________________。

            • 6.

              下列是与微生物培养有关的问题,请回答:

              ⑴某细菌固体培养基的组成成分是、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水,其中碳源是_____,氮源是_____。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长,该培养基属于_____培养基。按照化学成分分类,该培养基属于_____培养基。从同化作用类型看,用该培养的细菌属于_____

              ⑵一小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量.在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是 ______ ;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为 ______ .
              (3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌,操作时,接种环通过 ______ 灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是 ______ .
              (4)纯化微生物,可以用_______________方法
            • 7.

              研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。请回答下列问题:

              (1)通常采用压榨法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过布袋________除去其中的固体杂质。为了提高出油率,需要将新鲜的柚皮进行________处理,并用石灰水浸泡,作用是________________________________________________________________________。

              (2)筛选乳酸菌A时可选用________________________法接种。对新配制的培养基灭菌时常用的灭菌方法是________________。培养乳酸菌A的培养基中通常含有________、________、水和无机盐。

              (3)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

            • 8.

              下表所示配方的培养基可筛选某种细菌,该细菌可以在该培养基上生长,进而形成菌落。回答下列问题:

              KH2P04

              1.4g

              葡萄糖

              10.Og

              Na2HP04

              2.lg

              尿素

              1.Og

              MgS04•7H20

              0.2g

              琼脂

              15g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至lOOOmL

              (1)该培养基可筛选的细菌是_________________,判断的依据是_________________________________________。

              (2)如果从土壤中获取的样本含该细菌的数量较少,需要对样本中的细菌进行扩大培养,请判断能否用表格中的培养基来扩大培养___________(填“能”或“不能”),理由是____________________________________________________________。

              (3)如果需要对该细菌进行计数,则应用_________________法接种。为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌,需要在培养基中加入_________指示剂。另一种接种细菌的常用方法是_______________________。

            • 9. [选修1:生物技术实践](15分)

              临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本(如痰液、粪便等),然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:

              ⑴为了从样本中分离并获取某种致病菌单菌落,可用             法或             法将人体样本接种于固体培养基表面,再经过选择培养、鉴别等步骤实现。

              ⑵为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,取该单菌落适当稀释,接种于固体培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板的不同位置,培养一段时间后,在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A>C>D>B。由此推断,该病人目前适合使用的是抗生素        。含D的滤纸片周围的透明圈比含A、C的小,但透明圈中出现了一个菌落,这种菌落的出现可能是由于杂菌污染导致的,也可能是由于该致病菌发生了突变;若发生了基因突变,这种突变一般是否由抗生素诱发的?         ,若要证明这种致病菌发生了基因突变,可检测和比较这类细菌细胞中        (“DNA 的碱基组成”“mRNA 的含量”“ DNA 的碱基序列”)。

              ⑶为防止杂菌污染,培养基的灭菌方法是         灭菌,接种环的灭菌方法是         灭菌,接种过程应该在               旁进行。

            • 10.

              分离筛选降解纤维素能力强的微生物对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有理论和实际意义。研究人员从土壤和腐烂的秸秆中分离筛选出能高效降解纤维素的菌株,并对筛选出的菌株进行了初步研究。


              (1)对培养基进行灭菌的常用方法是___________。为在培养基表面形成单个菌落,若以________为接种工具,则用稀释涂布平板法进行接种。


              (2)先将样品悬液稀释后涂在放有滤纸条的固体培养基上进行筛选得到初筛菌株。再将初筛菌株接种到以_________为唯一碳源的培养基培养2~5天,加入__________溶液后,依据出现的颜色反应进行筛选,观察菌落特征并测量______________。同时将初筛菌株制备成的菌液放入加有滤纸条的液体培养基中,恒温振荡培养8天,观察滤纸条的破损情况。结果见表。由表可知,8种菌株中1、3、7号菌株产酶能力较强,原因是___________。

              注:①DP=(D/d)2,其中d表示菌落直径(cm),D表示透明圈直径(cm)②“+”为滤纸边缘膨胀,“++”为滤纸整齐膨胀并弯曲,“+++”为滤纸不定形“++++”为成团糊状“+++++”为半清状




              (3)为进一步研究1、3、7号菌株对秸秆降解的效果。分别用这三种菌株对秸秆进行处理,并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定。结果见下图。由图分析可知,三种菌株对______的降解最强,与第5天结果相比,第10天秸秆各组分中______的降解率变化最大。

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