在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。

(1) 下图是利用____________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。

 (2) 分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述_______成分，并加入______物质，以补充______源。若用于培养纤维素分解菌，应加入________物质，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入_______染料，含纤维素分解菌将形成__________圈。

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示，请据图回答有关问题：

（1）过程①②合称为______________________。从功能上看，Ⅰ号培养基属于____________；该培养基中必须以_______作为唯一碳源。 Ⅱ号培养基的接种方法为___________________。

（2）对配制的培养基采用的灭菌方法是__________________________________。

（3）在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的______________；也可将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图所示情况，可判断图中周围___

_________的菌落含有所需菌种。

（4）如果高温淀粉酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择下图中的______（填写字母）固定化工艺。

　：

(1)本研究构建重组质粒时可选用四种限制酶，其识别序列如图所示。为防止酶切片段的自身连接，可选用的限制酶组合是________或________。

A．①②　　B．①③　　C．②④　　D．③④

(2)设置菌株Ⅰ为对照，是为了验证__________________不携带纤维素酶基因。

(3)纤维素酶基因的表达包括________和________过程。与菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有________________。

(4)在以纤维素为唯一碳源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株________不能存活，原因是____________________________________________________。

(5)在利用纤维素生产酒精时，菌株Ⅳ更具优势，因为导入的重组质粒含有__________，使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新而造成的酶的流失，提高酶的利用率。

下表为某微生物培养基的配方，请回答相关问题：

（1）配制培养基流程是_____________________________________并灭菌，常用的灭菌方法是______________。       

（2）根据培养基的成分判断，该培养基能否用于分离土壤中分解尿素的细菌？_______，原因是_________________________________。

（3）为检测尿素分解菌是否存在，在接种之前还应进行的操作是往培养基中加入_________，若有尿素分解菌的存在，则将会出现_____________。

（4）玉米是重要的粮食作物，是很好的生物学实验材料，在副食品生产上有广泛的应用，经深加工后可生产酒精、玉米胚芽油、葡萄糖等产品（流程如下）。请回答相关问题：

①玉米秸杆富含纤维素，水解用的纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即______________________________________。

②玉米胚芽油不易挥发，可选用萃取法提取，萃取的效率主要取决于____________________________。

③提高萃取效果的方法一般是_______________________________________________________________。

植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，回答下列问题：

（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中葡萄糖苷酶可将______分解成_________。

（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成______色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心__________的。

（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养（成分见下表）：

据表判断，培养基甲__________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是__________；培养基乙________(填"能"或"不能")用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是____________。

农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤，可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌。已知该除草剂（含氮有机物）在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明。请分析回答：_______________

（1）获得纯净培养物的关键是___________________________。

（2）在选育过程中，应将土壤浸出液接种于_______________________选择培养基上。接种前需要对培养基应进行______________灭菌。通过比较单菌落周围___________的大小，可筛选出高效的目的菌株。实验结果如图显示的A～E五种菌株中，___________是最理想的菌株。_______________

（3）若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是________________。培养过程中，常选择菌落数在________________区间的平板统计计数。________________

（4）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括___________________三种组分，_____________纤维素最终被水解成________________ 。 

（5）分离分解尿素的细菌时，需要在培养基中加入______________指示剂作进一步的鉴定。

蓝色牛仔裤常选用质地较粗的棉布料，为了美观和穿着舒适，以往采用“石洗”法，把成捆的布料和浮石放在机器中翻滚，使它变得柔软。现在改用“生物石洗”法，用含有纤维素酶和蓝靛染料的溶液水洗布料，当达到一定柔软度时，冲洗掉纤维素酶。

（1）自然界中纤维素的来源是___________________。它是_______________的基本组成成分。纤维素酶能使布料柔软的原因是_______________。

（2）某研究性学习小组同学，为了从土壤中筛选纤维素分解菌，利用下列材料和用具进行了实验，请完善下列实验步骤。

   提示：刚果红能与纤维素形成红色复合物，纤维素分解菌在含有刚果红和纤维素的培养基上形成有透明圈的菌落。

   材料用具：采集的土样，研钵，配制纤维素分解菌培养基的各种原料，琼脂，纤维素粉，刚果红溶液，培养箱，无菌水。

   实验步骤：

   ①利用培养纤维素分解菌培养基的各种原料、琼脂及________________配制固体培养基，灭菌。

   ②将采集的土壤样品在研钵中研碎后_____________________________，制成土壤匀浆。

   ③利用无菌操作方法把土壤匀浆___________到培养基上，放在培养箱内培养一段时间。

④用显微镜观察纤维素分解菌时，要从____________________挑取材料制成临时装片。

（3）在用平板计数法纤维素分解菌数目统计时，统计的菌落数往往比活菌的实际数低，这是因为                        。

（4）如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是                ，应该保持                               等不变（至少答两项）。

(1)图中①所需微生物可从土壤中获取，获取该微生物的过程称为微生物的分离，选择培养基应以________为唯一碳源。纯化菌种时，将筛选获得的菌液稀释后用________法接种到培养基上。在筛选纤维索分解菌的过程中，常采用刚果红染色法，________能与培养基上的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物就无法形成，培养基上就会出现以纤维素分解菌为中心的________，可以此来筛选纤维索分解菌。

(2)图中②酒精发酵阶段接种的微生物是酵母菌，酒精发酵时一般将温度控制在________℃。在培养微生物的过程中，对培养基和接种环采用的灭菌方法分别是________、________。

(3)图中③产生的农作物废弃物，主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌无法直接利用农作物废弃物，原因是其________。

(4)若要利用图示中的发酵产物生产醋酸，常用的菌种为________，则下一阶段的发酵过程中应通入________。

（1）.下列操作必需在严格无菌条件下进行的是（     ）

   A．称量牛肉膏蛋白胨培养基的各种成分     B．利用平板划线法接种细菌 

   C．用酒精擦拭双手                       D．溶化牛肉膏蛋白胨培养基的各种成分

（2）按功能分，筛选该菌株时所用的培养基称为                        ；该培养基中必须添加的成分有                  （多选）等。  

A.琼脂   B．葡萄糖   C．硝酸铵   D．纤维素

（3） 刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见图)。图中降解圈大小与纤维素酶

的                      有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是              (填图中序号)

（4）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株        更适合用于人工瘤胃发酵,理由是                       。