如图表示利用纤维素生产乙醇的工业流程，回答下列问题：

(1)②中的酶是含有3种组分的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将____________分解成葡萄糖。

(2)若图中①所需的微生物来自土壤，分离该微生物宜从富含纤维素的土壤中取样，采用____________法接种到含有________染液的培养基上培养，挑取培养基上________的菌落进一步扩大培养。

(3)若将100 mL该微生物培养液稀释10⁶倍，取1 mL稀释液接种到选择培养基上，形成了270个菌落，则原菌液中每毫升有该微生物________个，该方法所得测量值比实际值偏低，原因是________________________________________________________。

(4)④接种的微生物是____________

乳酸菌是一种厌氧型细菌，实验室常利用溶钙圈法对乳酸菌进行筛选，其原理是乳酸菌产生的酸性物质和CaCO₃反应而出现溶解圈，以下为乳酸菌筛选的步骤：

①制备乳酸菌筛选培养基（MRS培养基）（成分：蛋白胨、牛肉膏、无机盐、葡萄糖和水）

②调节pH，并将MRS培养基和CaCO₃溶液灭菌后混合，倒平板制备培养基。

③梯度稀释样品，选择合适的稀释倍数接种。

④挑选产生溶钙圈的菌落。

请回答下列问题：

（1）乳酸菌常用于制作泡菜，用于制作泡菜的泡菜坛要在坛盖边沿的水槽中注满水，其目的是___________，制作过程中亚硝酸盐含量的变化是______。

（2）MRS培养基中蛋白胨可以作为乳酸菌的____________，CaCO₃一方面可以用于鉴别乳酸菌，另一方面还可以________。对培养基一般采用________________法灭菌。

（3）乳酸菌筛选过程中所用的接种方法是_________。若要进一步纯化乳酸菌，可以采取的措施是________________。

工业生产中，提取天然β—胡萝卜素的方法之一：利用红酵母等微生物进行发酵，经过菌体裂解、离心后进行萃取。回答以下有关问题：

(1)若要初步确定某一菌株是否为红酵母菌株，相对简便的操作是通过_________法将菌种接种于固体培养基上，并在适宜的条件下培养一段时间，观察其形成的菌落的_____________(填2个)特征。

(2)碳源的种类对β胡萝卜素的产量有着一定的影响，有关研究结果如下：

据表分析，最佳碳源是_________。若要进一步探究最佳氮源，请简要写出实验设计思路：____________________________________________________。

(3)有科研人员尝试利用紫外线处理红酵母，以获得高产菌株。对处理所得菌株分别进行培养并经裂解、离心后，根据β—胡萝卜素_____________________的特点，可以采用有机溶剂萃取法萃取产物，并对萃取产物通过_______________法进行鉴定，鉴定过程需要用_____________样品进行对比。经定量分析后，若得到高产菌株，要对其进行长期保存，可采用__________的方法在—20℃的冷冻箱中保存。

苹果干腐病是一种名为茶藤子葡萄座腔菌的真菌引起的疾病，病菌通常由枝条伤口入侵感染，在伤口处形成溃疡。某中学的科研小组计划分离出该真菌，并进行药物防治实验，为苹果干腐病的防治提供合理的建议。经过查阅资料，确定了分离时所用的PDA培养基配方，如下表所示：

    该真菌在上述PDA培养基上生长时有特定的形态特征：辐射状白色匍匐菌丝，绒毛状。

    (1)要获得菌落，则上表中还应添加的成分是________。氯霉素的作用是______________。培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、________、倒平板。等平板冷却凝固后，将平板______________，以防止冷凝水污染培养基。

    (2)用剪刀从染病枝条溃疡处剪取1×1 cm²的患病组织，并用0.1％的升汞进行消毒，置于培养基中心，在合适条件下进行培养，共培养五组。待菌落形态特征稳定后，用______________法将该致病菌分别转移至含有等量0.5％苦水碱剂、40％福美砷、清水的上述PDA培养基中进行抗药性实验，并每隔24 h记录一次最后划线区域的菌落数目。

    ①选取______________的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致的菌落数目遗漏。

    ②记录结果如下：

    从结果分析可知，_______________能很好地抑制该真菌的生长，适合用于防治苹果干腐病。

为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是                        ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为        。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过         灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是          。

（3）示意图A和B中，         表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的            的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高      的利用率。

果胶酶能分解果胶等物质，可以用来澄清果蔬饮料，在食品加工业中有着广泛的应用。回答下列问题：

（1）果胶酶是分解果胶的酶的总称，包括            、          和         。食品工业中之所以使用果胶酶澄清果蔬饮料，是因为果胶酶能破坏植物的       结构。

（2）微生物是生产果胶酶的优良生物资源。分离和筛选能产生果胶酶的微生物，使用的培养基应该以        为唯一碳源；为了纯化该生物，需要在       （填“固体”或“液体”）培养基上接种菌种，最常用的接种方法有           和             。

（3）根据下表实验结果，      （填“能”或“不能”）确定40℃就是果胶酶的最适温度。

乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下:

产乳糖酶微生物L的筛选 产乳糖酶微生物L的培养 乳糖酶的提取纯化 乳糖酶的固定化

(1)筛选产乳糖酶的微生物L时,宜用          作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是            。从功能上讲,这种培养基属于              。 

(2)培养微生物L前,宜采用            方法对接种环进行灭菌。 

(3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明其分子量越              。 

(4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价键结合法)进行固定化,可通过检测固定化乳糖酶的            确定其应用价值。除化学结合法外,酶的固定化方法还包括              、               、离子吸附法及交联法等。

【生物一选修1:生物技术实践】

胡萝卜素广泛用于食品、饲料、化妆品、医药等工业，目前主要通过化学合成、植物提取及微生物发酵生产，回答下列问题：

（1）根据胡萝卜化学性质稳定，不溶于水，易容于有机溶剂的特点，可以采用          法提取。为保证提取效果，材料提取前要进行             处理，可以选用             （填“乙醇”或“石油醚”）作为提取剂。

（2）①现从红色淤泥中筛选出一种生产胡萝卜素的红酵母菌株，纯化并可计数的接种方法为           。要大量繁殖该菌株成选用        培养基（填“液体”或“固体”）。在研究初期，要频繁使用该菌种，应对其采用           法进行短暂保存。

②如果意外获得一种能利用纤维素的红酵母菌株，某同学在对其纯化的过程中，为避免杂菌污染，要对培养基进行            灭菌，检验培养基是否污染的方法是                                                                          。

(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是　　　　(填序号)。

①酒精灯　②培养皿　③显微镜　④无菌水

(2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

(3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是　　　　　　　　　　。 

(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见图)。图中降解圈大小与纤维素酶的　　　　　　有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是　　　　(填图中序号)。 

(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株　　　　更适合用于人工瘤胃发酵,理由是　 　　　　　　　　　　　　　　　　　。 

请回答下列与大肠杆菌有关的问题。

（1）从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于                  ，它的同化作用类型是                    。

（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

根据用途划分该培养基属于       (选择、鉴别）培养基。该培养基中的碳源是                        。

（3）在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行    (消毒、灭菌）操作者的双手需要进行清洗和      。静止空气中的细茵可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能          。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和             。通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的       。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培弃基应采用的检测方法是                                                         。 若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过        处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。