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            • 1. 家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力.将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药.
              (1)进行转基因操作前,需用 ______ 酶短时间处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.
              (2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 ______ ______ 之间;若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达,可以采用的方法是 ______
              (3)通过PCR技术可大量获取目的基因.PCR反应体系主要包括:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、 ______ 和与干扰素基因特异性配对的DNA引物.
              (4)培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制.通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以 ______ ,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
              (5)“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量,形成“无废弃物农业”,这主要是遵循生态工程的 ______ 原理.同时,通过饲养家禽、家畜,栽培食用菌,提高农民经济收入,使保护环境和发展经济相互协调,这又体现了生态工程的 ______ 原理.
            • 2.
              RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,具体过程如图所示:

              (1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、 ______ 、 ______  和引物A等.
              (2)过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95℃,其目的是 ______ ,该反应体系中所用的Taq酶至少应能耐受 ______ ℃.
              (3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增,理论上至少需要 ______  个引物B.
              (4)利用RT-PCR技术获取的目的基因 ______  (填“能”或“不能”)在物种之间交流;该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测,可提高检测的灵敏度,原因是 ______ .
              (5)RT-PCR过程中主要借助对 ______  的控制,影响酶的活性,从而使得化学反应有序高效地进行.
            • 3.
              玉米是重要的粮食作物,经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等.流程如图:

              (1)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精.培养酵母菌时,该水解产物为酵母菌的生长提供 ______ .发酵过程中检测酵母菌数量可采用 ______ 法或稀释涂布平板法计数.
              (2)玉米胚芽油不易挥发,宜选用 ______ 法或 ______ 法从玉米胚芽中提取.
              (3)玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖.利用 ______ 技术可使葡萄糖异构酶重复利用,从而降低生产成本.
              (4)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时,需用耐高温的 ______ 催化.PCR一般要经历三十次以上的循环,每次循环包括变性、 ______ 和 ______ 三步.
            • 4.
              家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力.将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药.
              (1)进行转基因操作前,需用 ______ 酶短时间处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.
              (2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 ______ 和 ______ 之间;若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达,可以采用的方法是 ______ .
              (3)通过PCR技术可大量获取目的基因.PCR反应体系主要包括:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、 ______ 和与干扰素基因特异性配对的DNA引物.
              (4)培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制.通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以 ______ ,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
              (5)“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量,形成“无废弃物农业”,这主要是遵循生态工程的 ______ 原理.同时,通过饲养家禽、家畜,栽培食用菌,提高农民经济收入,使保护环境和发展经济相互协调,这又体现了生态工程的 ______ 原理.
            • 5. 生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗.科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如图)

              (1)用于生产生物柴油的植物不易挥发,宜选用 ______ ______ 方法从油料作物中提取.
              (2)筛选产脂酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供 ______ ,培养基灭菌采用的最适方法是 ______ 法.
              (3)测定培养液中微生物数量,可选用 ______ 法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测 ______ ,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用 ______ 技术使脂肪能够重复使用.
              (4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的 ______ 技术.
            • 6. 资料显示,近10年来,PCR技术(聚合酶链反应技术)成为分子生物实验的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制的特性,在试管中进行DNA的人工复制(如下图),在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体.请据图回答:

              (1)加热至94℃的目的是使DNA样品的    键断裂,这一过程在生物体细胞内是通过    的作用来完成的.
              (2)通过生化分析得出新合成的DNA分子中,A=T、G=C这个事实说明DNA分子的合成遵循    
              (3)通过PCR技术使DNA分子大量复制时,若将一个用15N标记的DNA样品分子(第一代)放入试管中,以14N标记的脱氧核苷酸为原料,连续复制到第五代之后,则含15N标记的DNA分子链数占全部DNA总链数的比例为    
              (4)综合PCR技术与人体细胞内DNA合成过程可知,二者的必需条件中,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还有3个分别是    
              (5)PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法.若要检测一个人是否感染了艾滋病毒,你认为可用PCR技术扩增他血液中的    
              A.白细胞DNA    B.病毒的蛋白质    C.血浆中的抗体    D.病毒的核酸.
            • 7. 下列关于对微生物筛选的叙述中不正确的是
              A.用含酚红的培养基筛选出能分解尿素的菌株
              B.用不含碳源的培养基筛选出自养微生物
              C.利用高温培养条件筛选耐热的 Taq细菌
              D.用高浓度NaCl的培养基筛选耐盐突变菌株
            • 8. [生物—选修3:现代生物科技专题]

              如图是从酵母菌细胞内获取某植物需要的某种酶基因的流程,请回答下列问题:

              (1)图中cDNA文库含有酵母菌的________基因,与基因组文库中的基因相比无________、_________。

              (2)①过程提取的DNA需要用限制酶,该酶能够识别_____________________,并且使_____________________断开。

              (3)为在短时间内大量获得目的基因,可用PCR方法扩增,该反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含 )、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA、________和________。

              (4)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从________出发,通过设计蛋白质结构和推测相应的氨基酸序列,进而确定相对应的________,据此获得基因,再经表达、纯化获得蛋白质。

            • 9.
              根据某基因上游和下游的碱基序列,设计合成了用于该基因PCR的两段引物(单链DNA).引物与该基因变性DNA(单链DNA)结合为双链DNA的过程称为复性.如图是两引物的Tm(引物熔解温度,即50%的引物与其互补序列形成双链DNA分子时的温度)测定结果,以下分析错误的是(  )
              A.两引物分别与DNA的两条互补单链结合,是子链延伸的起点
              B.PCR过程中,复性温度应高于引物的Tm值以提高PCR效率
              C.若两引物的脱氧核苷酸数相同,推测引物2的(G+C)含量较高
              D.适当减少引物2的脱氧核苷酸数,可使其Tm值接近引物1
            • 10.

              糖原贮积病是由于遗传性糖代谢障碍,致使糖原在组织内过多沉积而引起的疾病,临床表现为低血糖等症状。下图1为人体糖代谢的部分途径。请分析回答︰


              (1)据图1可知,抑制葡萄糖激酶不仅制约糖原的合成,还会制约体内细胞的________呼吸,使产能减少;细胞呼吸的启动需要________供能。

              (2)Ⅰ型糖原贮积病是6—磷酸葡萄糖酶基因(E)突变所致。血糖浓度低时,正常人体分泌________(激素)增加,使血糖浓度恢复到正常水平;给I型糖原贮积病患者注射该激素________(能,不能)使血糖浓度恢复到正常水平。

              (3)Ⅰ型糖原贮积病是一种常染色体隐性遗传病,图2为某家族此病遗传情况家系图,在正常人中,杂合子概率为1/150。若Ⅱ—3与表现型正常的男性结婚后生育一个孩子,则患病概率约为________。

              (4)某新型糖原贮积病是由磷酸酶基因(D)突变引起。经过家系调查绘出的家系遗传图与图2一致。研究者合成了两种探针,能分别与正常基因和突变基因相应的DNA序列互补。此探针在一定的杂交和洗脱条件下,只要有一个碱基不匹配,就不能形成稳定的杂交链而被洗脱。利用探针对该新型糖原贮积病家系进行检测,过程和结果如下图所示。


              ①体外扩增DNA时,解链的方法是________。

              ②结合图2和图3分析︰该新型糖原贮积病的遗传方式为X染色体隐性遗传病,做出此判断依据的是该家系中________个体DNA杂交检测的结果,其中Ⅰ—1个体的基因型是________。

              ③假如Ⅲ—1和男性患者结婚,生育的孩子患新型糖原贮积病的概率是________。

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