科学家利用PCR技术分别从抗根结线虫的番茄和辣椒中克隆抗性基因SIMi及CaMi，并利用遗传转化方法将它们转入对根结线虫敏感的番茄中，获得抗根结线虫的番茄转基因株系应用于植物抗根结线虫育种。请回答相关问题：

(1)PCR技术是扩增目的基因的常用手段。扩增过程中，目的基因DNA________后解旋为单链，__________与单链相应互补序列结合，在酶的作用下进行延伸。

(2)________________是实施基因工程的核心。

(3)将目的基因转入对根结线虫敏感的番茄中，最常用的方法是____________。通过转化，目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内_____________________。

(4)为了检测对根结线虫敏感的番茄中是否插入目的基因，可采用______________技术。检测目的基因在分子层面是否表达则可以用___________________的方法。

(5)为了比较两种抗性基因(SIMi和CaMi)在转基因后的抗根结线虫的效果，可分别取等量的两种成功表达的转基因番茄植株____________，比较其抗虫效果。

下图1为某种常用质粒的序列图，Lac Z基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色，Amp为氨苄青霉素，抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题：

（1）若要筛选成功导入目的基因的重组质粒，培养基中应加入的物质有_________________和_________________，构建重组质粒时需要的工具酶有___________________________，对获取的目的基因可用_________________技术对其扩增。

（2）实验小组用BamH I和Blg II两种限制酶切割目的基因和质粒，构建重组质粒后导入大肠杆菌中，在筛选重组质粒的培养基上，若大肠杆菌菌落显蓝色，说明导入了______________________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌______________（填“能”或“不能”）在该培养基上生存。

（3）将若干个质粒和目的基因用BamH I和Blg II两种限制酶切割后，用DNA连接酶相连，然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的产物，获得了长度为0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四种长度的DNA片段，则目的基因的长度为____________kb（已知目的基因的长度大于1kb，1kb=1000个碱基对）。

干旱会影响农作物产量，科学家们对此进行了研究。如图为用探针检验某一抗旱植物基因型的原理，相关基因用R和r表示。据图回答下列问题：

(1)在利用PCR技术扩增R或r基因的过程中，利用________可寻找抗旱基因的位置并进行扩增。

(2)若被检植株发生A现象，不发生B、C现象，则被检植物的基因型为________。

(3)用从基因文库中获取目的基因的方法获取抗旱基因时需要用到限制酶，限制酶能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的____________断开。

(4)经检测，抗旱基因已经导入到烟草细胞，但未检测出抗旱基因转录出的mRNA，从构建基因表达载体的角度推测，最可能的原因是__________________

(5)要快速繁殖转基因抗旱烟草植株，目前常用的技术是____________，该技术的基本过程是：将离体的烟草细胞诱导脱分化形成____________，然后再分化出根和芽并发育成小植株。该技术在作物新品种的培育方面两个最主要的应用是：突变体的利用和____________。

编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成，编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成，如图1所示。

回答下列问题：

(1)现要通过基因工程的方法获得蛋白乙，若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTC—T……CAGGAAGGA)，则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋向乙，原因是____________________________________________________。

(2)某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中，在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等，还加入了序列甲作为__________，加入了________作为合成DNA的原料。

(3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白，要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用，某同学做了如下实验：将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组，其中三组分别加人等量的蛋白甲、乙、丙，另一组作为对照，培养并定期检测T淋巴细胞浓度，结果如图2。

①如图2可知：当细胞浓度达到a时，添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加，此时若要使T淋巴细胞继续增殖，可采用的方法是______。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO₂浓度，CO₂的作用是______。

②仅根据图1、图2可知，上述甲、乙、丙三种蛋白中，若缺少________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。

某实验室做了下图所示的实验研究,请据图回答:

(1)与纤维母细胞相比,过程①形成的诱导干细胞的全能性较_____________。 

(2)过程②是诱导干细胞中基因_____________的结果。 

(3)过程③需要用_____________进行筛选,得到的Z细胞还需进行_____________培养和_____________,经多次筛选,就可以得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 

(4)科学家找到一种“无限增殖调控基因”能激发细胞不断分裂,通过基因工程技术将该基因导入待定的_____________细胞(填细胞名称),来制备单克隆抗体,基因导入并成功表达后,该细胞将具有__________________________的特点,在上述操作中用到了PCR扩增仪,其作用是_____________。 

科学家通过利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，提高了光合作用过程中Rubi-sco酶对CO₂的亲和力，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：

(1)PCR过程所依据的原理是____________，利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_________；扩增过程需要加入__________________________酶。

(2)启动子是一段有特殊结构的DNA片段，其作用是______________________________。PCR定点突变技术属于__________的范畴。

(3)可利用定点突变的DNA构建基因表达载体。常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的______________技术，才能最终获得转基因植物，该技术利用的原理是________________。

(1)该工程中不适宜用来切割质粒的限制酶是_________，原因是____________________________________。

(2)血清白蛋白基因可以从利用反转录法构建的______                     ___文库中获取。利用PCR技术扩增血清白蛋白基因时，设计引物序列的主要依据是________________________________，还需要在引物的一端加上__________________序列，以便于后续的剪切和连接。

(3)将目的基因和质粒进行连接后，需先用_________处理农杆菌以便将目的基因导入马铃薯细胞，筛选含有目的基因的细胞需在培养基中添加_________。

(4)从含有血清白蛋白基因的马铃薯细胞中提取血清白蛋白，需通过脱分化培养到愈伤组织，培养过程中需在培养基中添加的植物激素是_____________。

人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛，以便通过乳腺生物反应器生产HSA，其主要技术流程如下图所示。回答下列问题：

(1)如上图所示，将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中，该技术称为_______________技术；供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是____________________________________________________。

(2)胚胎移植时，为使代孕母牛能处于适合的生理状态，需要用激素对其进行_______处理。

(3)SRY～PCR法性别鉴定的基本程序是：提取牛胎儿成纤维细胞的DNA，经PCR反应体系扩增SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段，然后对扩增产物进行检测。

①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外，还应含有______________；其中，dNTP的作用是___________________，引物应选用下图中的_________(填图中标号)。

②若扩增产物含大量SRY基因片段，则该种牛胎儿成纤维细胞________(选填“能”或“不能”)用作技术流程中转化过程的受体细胞。

(4)从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是_______________。

(1)①代表的是_________过程。为获得A基因表达载体，需用_________酶对A基因和载体进行切割。将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是______________。

(2)利用PCR技术扩增A基因时，设计引物序列的主要依据是_______________________，加入引物的作用是___________________________________________。

(3)与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制_________等条件。

(4)过程⑦采用的技术是________，获得的X叫细胞。