4.
基因工程中,需要使用限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。回答下列问题:
![](https://www.ebk.net.cn/tikuimages/7/2018/600/shoutiniao48/1b7b18f0bdb9424c30b42e49575b6135.png)
(1)上述质粒用限制酶________切割,目的基因用限制酶__________切割。
(2)将切下的目的基因片段插入质粒的切口处,还要加入适量的__________________。
(3)用做载体的质粒上至少要有一个标记基因,理由是______________,来自不同生物的质粒和目的基因可以拼接的结构基础是_________________。
(4)在基因工程的操作过程中,核心是________________________,用细菌作为受体细胞进行转化时,常用________处理,使其处于________以利于吸收外部DNA分子。
(5)利用PCR技术可获取目的基因,据图回答下列问题:
![](https://www.ebk.net.cn/tikuimages/7/2018/600/shoutiniao53/6a19cdf3d239b8438c1b0f850323488e.png)
①PCR技术的原理是___________,利用PCR技术获取目的基因的前提是____________________。
②由图中信息分析可知,催化C过程的酶是__________,它与正常细胞里的酶的区别是________。