回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。

利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素，图甲中的三个DNA片段上以此表示出了EcoRI、BamH I和Sau3A I三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图乙为某种表达载体示意图（载体上的EcoRI、Sau3A I的切点是唯一的）。

（1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有                      。

（2）可以从下列哪些人体细胞中获取生产人胰岛素的目的基因________（多选题）。

A.消化道黏膜上皮细胞              B.胰岛A细胞

C.胰岛B细胞                      D.造血干细胞

（3）经BamH I酶切割得到的目的基因可以与图乙所示质粒被            酶切后的产物连接，理由是              。连接后的重组质粒    （能、不能、不一定）被BamH I切割。

（4）将重组质粒导入到大肠杆菌受体细胞，可用含有          的培养基进行初步筛选。目的基因成功表达的标志是               。

（5）已知图乙所示质粒经EcoRI和Sau3AI联合酶切后形成2.0 kb和4.2 kb（1 kb = 1000对碱基）两种DNA片段，若将0.8 kb的单个基因插在质粒的Sau3AI位点处，所形成的重组质粒用EcoRI和Sau3AI联合酶切后，能形成的DNA片段分别为________。

A. 2.8  2.0  2.2               B. 1.8  2.0  2.2 

C. 4.0 1.8  1.0                D. 2.0  0.8  4.2

如图是从酵母菌细胞内获取某植物需要的某种酶基因的流程，请回答下列问题：

​

(1)图中cDNA文库含有酵母菌的________基因，与基因组文库中的基因相比无________、_________。

(2)①过程提取的DNA需要用限制酶，该酶能够识别_____________________，并且使_____________________断开。

(3)为在短时间内大量获得目的基因，可用PCR方法扩增，该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含 )、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA、________和________。

(4)蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从________出发，通过设计蛋白质结构和推测相应的氨基酸序列，进而确定相对应的________，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质。

生物技术已经渗入到了我们生活的方方面面，比如：

（1）目前临床用的胰岛素生效较慢，科学家将胰岛素B链的第28和29个氨基酸调换顺序，成功获得了速效胰岛素。生产速效胰岛素，需要对______________（胰岛素/胰岛素mRNA/胰岛素基因）进行定向改造。将改造后的分子导入受体大肠杆菌，一般需要用________处理大肠杆菌细胞，使之成为____________细胞。

（2）科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体，制作出了早早孕试纸。要获得人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体，需要先将____________________注射到小鼠体内，培养一段时间之后，将从小鼠的脾脏中提取出的____________和小鼠的骨髓瘤细胞融合，获得杂交细胞。

（3）许多不孕不育的夫妇受益于试管婴儿技术，在体外受精前，要对采集到的精子进行____________处理，才能与卵子受精。受精后形成的受精卵要移入_____________中继续培养一段时间再移植到母亲体内，早期胚胎发育到___________阶段的某一时刻，会冲破透明带，称为“孵化”。

（4）在进行林业工程建设时，一方面要号召农民种树，保护环境。另一方面要考虑贫困地区农民的生活问题，如粮食、烧柴以及收入等问题，其主要体现了生态工程的基本原理是__________________（填一个即可）。