Rag₂基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag₂基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：

(1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的________。

(2)步骤②中，重组胚胎培养到________期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。

(3)步骤③中，需要构建含有Rag₂基因的表达载体。可以根据Rag₂基因的_______设计引物，利用PCR技术扩增Rag₂基因片段。用Hind Ⅲ和Pst Ⅰ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag₂基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有___________酶的酶切位点。

(4)为检测Rag₂基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的________，用抗Rag₂蛋白的抗体进行杂交实验。

科学家将人的生长激素基因与质粒重组后，导入牛的受精卵，并成功从牛奶中提取到了人生长激素，操作流程如下图所示，请据图回答。（已知限制酶I的识别序列和切点是－G↓GATCC－，限制酶II的识别序列和切点是－↓GATC－）。

       （1）获取目的基因的主要途径包括从已有物种细胞中提取和_____________。

       （2）据图分析，在构建重组质粒的过程中，目的基因用________________（填“限制酶I”或“限制酶Ⅱ”）进行了切割。

       （3）获能的精子和卵细胞相遇后首先发生____________反应，之后精子接触卵黄膜，并进一步与卵结合，在该过程中，_______________和____________________可以防止其它精子入卵。

       （4）图中“受体”是__________________________；“符合要求的个体”是指_____________________________。

       （5）将牛受精卵进行人工培养后，一般可选择__________________期的、发育良好的胚胎进行移植。

在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。

请据图回答：

（1）A过程需要的酶有___________________________。

（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是① _______________，

②_______________________。

（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入___________。

（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________________作为探针。

 （5）离体的棉花叶片组织经过C-D过程成功的培育出了转基因抗虫植株，此过程涉及的细胞工程技术是______________，该技术的原理是_______________。

 （6）科学家将植物细胞培养到____________，包上人工种皮，就制成了神奇的人工种子。

科学家通过基因工程方法，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内，并成功实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株一抗虫棉。其过程大致如图所示：

（1）Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为＿＿＿；将目的基因导人受体细胞的方法有很多种，该题中涉及的是＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达，关键是是否使＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿上，这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（3）“转基因抗虫棉” Bt毒蛋白基因表达过程可表示为＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（4）若要把Bt毒蛋白基因导入到大肠杆菌中，要先用＿＿＿＿处理细胞，使细胞处于＿＿＿＿＿＿（状态），然后将重组表达载体DNA溶于缓冲液中，在一定温度下与细胞混合。

科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功的实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株──抗虫棉。其过程大致如下图所示：

(1)基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心是_______________。

(2)获取Bt毒蛋白基因的方法一般有__________________等。

(3)Ti质粒是___________中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的___________特点。Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内维持稳定并成功实现表达的过程，在基因工程中称为______。

(4)将目的基因导入受体细胞的方法很多，在本题中用到的方法是_________。

(5)一个基因表达载体的组成必须有__________________等。

(6)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是__________。这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是______________。如果从个体水平如何检测？________________。

下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解。请据图回答：

（1）细胞②是囊胚的_________________中分离得到的，在功能上具有_________________，对该细胞进行定向诱导分化，通常需要加入_________________，例如牛磺酸等。

（2）步骤④常用的方法是_________________，这一步骤的操作对象如果是植物细胞，我国科学家独创的一种方法是_________________。

（3）上述治疗方法在基因工程的水平上可以称为_________________。

(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中过程①表示________________。

(2)过程③构建重组Ti质粒时，必须使用____________和________________两种工具酶。

(4)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外，还必须添加________________________，以保证受体细胞能培养成再生植株。

图中④是基因工程中的______细胞。

人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：

（1）过程①需要的酶是________________________。

（2）过程③采用的实验技术是________________，获得的X有________种情况。

（3）经过③④获得抗A蛋白的单克隆抗体过程中，至少要有________次筛选，筛选目的分别是________________________________________________________________________；________________________________________________________。

（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的________所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，用图中的________进行检测。