乳头瘤病毒(HPV)持续感染可导致宫颈癌发生。科研人员将HPV外壳L1蛋白基因与在人体中不能复制但能有效表达外源基因的痘苗病毒重组，制备新型疫苗。

(1)用痘苗病毒感染鸡胚细胞，一段时间后洗去吸附的病毒，将鸡胚细胞转入液体培养基中培养，培养基中加入适量抗生素以避免________。在培养基中加入L1蛋白基因与质粒连接构建重组质粒，使L1蛋白基因与________在鸡胚细胞内发生DNA重组，得到重组病毒疫苗。依据L1蛋白基因序列设计引物扩增重组病毒DNA，以检测_______________________。

(2)为研究重组疫苗的保护作用，将生长发育状况一致的小鼠随机均分为三组，1组注射用PBS缓冲液配制的重组病毒疫苗100 μL,2组注射________作为对照，3组注射________作为空白对照。

(3)给上述三组小鼠皮下注射C3细胞(含有HPV基因的癌细胞)，观察、记录小鼠成瘤情况，结果如下。

据实验结果分析，尽管各组小鼠都可成瘤，但实验组小鼠__________________________，说明重组病毒疫苗具有一定的免疫保护作用。接种重组病毒疫苗的小鼠体内表达________作为抗原，刺激机体产生特异性免疫。皮下注射C3细胞时，HPV引起________细胞迅速增殖、分化，产生大量抗体，从而起到免疫保护作用。根据免疫学知识，注射疫苗后，只有诱发出机体的________免疫，才能有效清除癌细胞。

(4)若欲检验重组病毒疫苗是否有治疗作用，对小鼠进行的处理最恰当的是________(选填下列字母)。

A．先注射HPV病毒，一段时间后注射重组病毒疫苗

B．先注射重组病毒疫苗，一段时间后再注射HPV病毒

C．先注射C3细胞，一段时间后注射重组病毒疫苗

D．先注射重组病毒疫苗，一段时间后再注射C3细胞

下图表示科学家采用不同方法培育良种牛的过程, a~h为操作过程,请据图回答有关问题:

(1)“试管牛”技术的操作流程是 (填字母)。

(2)d操作的名称是________,受体子宫内胚胎发育的过程中,细胞不断分裂,其分裂方式为________ 。

(3)图中所示的过程中用到的激素是________,其目的是获得更多的卵母细胞,经受精后可得到早期胚胎;图中早期胚胎属于胚胎发育的________阶段,其中胚胎干细胞来源于________(填数字标号)。

(4)过程h常用的方法是________。

如图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：

（1）图中cDNA文库______基因组文库（填“大于”、“等于”或者“小于”）．

（2）（2）①过程提取的DNA需要__________的切割．

（3）（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用________扩增的方法，其原理是___________．

（4）（4）目的基因获取之后，需要进行_________，其组成，必须有_________、________、_______以及标记基因等．此步骤是基因工程的核心．

I.我国科研人员克隆了100多个重要基因，取得了抗虫棉、抗虫玉米、耐除草剂大豆等一批重大转基因成果。请回答下列问题：

（1）抗虫棉中转入的Bt毒蛋白基因是从苏云金(芽孢)杆菌中分离出来的，该基因编码的Bt蛋白对哺乳动物        （填“有”或“无”）毒害作用。

（2）每一种Bt毒蛋白的杀虫范围有限，对现有的毒蛋白进行       ，使其具有更广杀虫范围，属于           （生物工程）的范围。

（3）随着转基因成果的不断涌现，人们对转基因生物的安全性的关注与日俱增，在食物安全、生物安全和           三个方面发生了激烈争论。

II.关注生态工程的建设。

（1）与传统的工程相比,生态工程是一类少消耗、          、可持续的工程体系。

（2）“无废弃物农业”是我国古代传统农业的辉煌成就之一,也是生态工程最早和最生动的一种模式，该模式主要遵循生态工程的              原理。我国西北一些地区年降雨量少，适宜种植灌木和草，却被硬性规定种植属于乔木的杨树，致使许多地方的杨树长成半死不活状，结果防护林成了残败的“灰色长城”。其失败的原因主要是违背了       原理。

（3）甘肃陇南地区的“九子登科”模式是哪种生态工程建设的实例？（ ）

A.草原生态恢复工程              B.城市环境工程

C.小流域综合治理生态工程    D.湿地生态恢复工程

(1)下列有关现代生物技术的叙述正确的是__________。

   A．基因工程与蛋白质工程都能制造出新的蛋白质
    B．动物细胞培养时通常需要添加血清
    C．动物的早期胚胎发育依次经过受精卵、卵裂、桑椹胚、孵化、囊胚、原肠胚等阶段
    D．DNA连接酶和DNA聚合酶都能使核苷酸之间形成磷酸二酯键，属于同一种酶
(2)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是__________；
(3)植物组织培养的主要原理是植物细胞具有__________，具体过程是在__________和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过__________产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
(4)克隆动物实际上是用__________方法得到的动物，也就是将一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的__________细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，最终发育为动物个体。
(5)生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项）：________________________________________。