Ⅰ．线粒体神经胃肠脑肌病由线粒体DNA（mtDNA）上的相关基因M控制。以下是采用“一父两母”技术以避免生出患病孩子的流程图。

请回答：

（1）过程①采用的技术是________，图中的X表示________期的卵母细胞。

（2）过程③需提取早期胚胎细胞中的________，通过PCR技术进行扩增，并以标记的________基因作为探针进行检测，筛选出合格的胚胎。

Ⅱ．下图表示“粮桑渔畜”农业生态系统的基本模式。据图回答下列问题：

（1）在这一案例中，主要运用哪些生态工程的基本原理？________（至少答出三项）。

（2）从生态系统功能角度分析，该生态农业较好的实现了________

（3）饲养家禽可以适当延长光照时间来提高产蛋率，这是利用了________（信息类型）的作用。

（4）与传统农业相比，该生态工程是一类________的工程体系。

[选修3——现代生物科技专题]

科学家从某细菌中提取抗冻基因，转入番茄并培育出抗冻番茄。下图是转抗冻基因番茄的培育过程，含抗冻基因的DNA片段和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。分析回答问题：

（1）若要获得抗冻基因，可以从细菌中提取，也可以通过分析抗冻蛋白________的序列推测基因的结构，进而人工合成抗冻基因。对获得的抗冻基因可用________技术进行扩增。

（2）上述两种途径获得的抗冻基因________（填“一定”或“不一定”）相同，原因是________。

（3）用图中的质粒和抗冻基因构建重组质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是________。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用________酶对外源DNA、质粒进行切割。

（4）图中过程⑤表示________。

［生物——选修3：现代生物科技专题］

   下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。请据图回答下列问题：

  (1)过程①至②所获取的抗体1称为_______________，其中过程①是指细胞工程中的_____________技术。

  (2) ④过程需要__________酶，⑤过程则需要的工具酶为__________________________。

  (3) ②处需要筛选，其培养基称为_______________ (液体培养基/选择培养基/鉴别培养基)。结构甲的组成必须包括启动子_______________________及目的基因等(写两项)。

  (4)如果想用棉花产生该种抗体，则⑥过程的受体细胞通常选用__________菌，经过筛选后再侵染棉花体细胞，转化成功后通过_______________技术获得能产抗体的转基因棉花植株。

人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。口服α-干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：

（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是            。科研人员还在两种引物的一端分别加上了              和             序列，以便于后续的剪切和连接。

（2）过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有             ，过程③中需先               处理根瘤农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

（3）过程④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过              过程获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是                   。

（4）科研人员认为，将转干扰素基因的人参愈伤组织加工成的药物比单纯干扰素的疗效要好，其依据是                 。

玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

                                               
（1）玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供_____   _ 。发酵过程中检测酵母菌数量可采用             法或稀释涂布平板法计数。

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用__   _____法或____法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的__      _____催化。PCR技术一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______ 和 _______ 三步。

36【生物---选修3：生物科学技术】（15分）

应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白，既提高了产量，又有了安全保障。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：

（1）上述过程涉及到的生物技术有                                   （至少答3个）。

（2）一般情况下，良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足，请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法：  　　　　　　                     。

（3）图中①一般经                （酶）处理可以得到③，在①→③的培养过程中，需向培养液中通入一定量的CO₂，其目的是                        　。

（4）在胚胎发育过程中，囊胚时期的　　          　　　细胞将发育成幼体的各种组织。

（5）③到⑥体现了                      。要实现⑥批量生产血清白蛋白，则要求①的性别是              。

附1：命题双向细目表

1．下图为果酒和果醋的制作流程，回答问题：

（1）从自然菌样中分离较理想的醋酸杆菌进行纯化培养，通常采用 　   方法分离，接种之前要对接种工具进行     ，避免接种工具上可能存在的微生物污染培养基。

（2）果酒的制作离不开酵母菌，在酵母菌的酒精发酵过程中，通常将温度控制在      。由果酒转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是  ▲    和温度控制住30～35℃。

（3）若在果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌    (填“能”或“不能”)将果汁中的糖发酵为醋酸。

(4)在用果汁制果酒的过程中，发酵瓶溶液中pH的变化是          。

A．增大   B．不变    C．减小    D．先碱小后增大

2、下图为科学家利用转基因技术培育抗病番茄植株过程的示意图，请回答以下问题

（5）图中所选的Ti质粒中往往需含有      （A.抗虫  B.胰岛素  C.抗生素抗性  D.抗冻）基因，有利于重组质粒的筛选。A过程中常用的酶有                  。  

（6）E过程需要借助              技术，在含有营养物质、         等成分的培养基中，番茄细胞经过脱分化形成             ，该类单细胞具有细胞质丰富、        （A.液泡大、细胞核大    B.液泡小、细胞核大   C.液泡小、细胞核大   D.液泡小、细胞核小）等特征。

 (1) 请写出两项图中涉及到的现代生物技术：____________________。

   (2) 研究人员根据已知的_________，采用化学合成方法获得了胰岛素基因。

   (3)图中由A培育至具有凤梨风味的绿草莓幼苗的过程，体现植物细胞的               。

   (4) 转基因技术和细胞工程在动植物中都有广泛应用，但是，胚胎工程只是指对动物的____________所进行的多种显微操作和处理技术。

   (5) 不断恶化的生态环境，正在对人类的生存和发展构成严重的威胁。因此，通过生态工程可对遭到破坏的生态环境进行        。生态工程建设的目的是遵循自然界       的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止____________，达到生态效益与经济效益的同步发展。生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出两项它遵循的基本原理：_____________________________________。        

  2．某家族有种单基因遗传病，其遗传系谱图如下。请分析回答有关问题：

  （6）为研究其发病机理，通常采用       技术获得大量致病基因，该技术成功的关键是要有                 酶。

   （7）为诊断2号个体是否携带致病基因，通常采用的分子生物学检测方法是          。

   （8）该病会导致病人免疫能力下降，被病毒感染后的治疗需要大量的抗体。一般可通过动物细胞工程技术制备单克隆抗体：先获得既能迅速大量繁殖又能产生专一抗体的        ，然后将其注射到小鼠腹腔内增殖或在体外利用       (技术)进行大规模培养。临床使用的小鼠免疫后制备的鼠源性单克隆抗体最主要的优点在于          ，但存在一些弊端，其中之一是会引起人体抗鼠源抗体反应，这时的鼠源性单克隆抗体在免疫学上被称为        。5号个体在连续隔周注射某种鼠源性单克隆抗体治疗一种病毒感染性疾病，开始病毒量明显减少，一段时间后，这种病毒量又开始上升，排除病毒变异的因素，上升原因还可能是人体产生了              ，使鼠源抗体不能发挥抗病毒的作用。

   （9）如果要体外培养个体8的胚胎干细胞且维持不分化的状态，应该在         细胞上或在添加           的培养液中培养。

（1）实现②过程的常用方法是_________________。

（2）获得黑白花奶牛成纤维细胞后，利用______________技术扩增细胞，培养液中除了提供必要的营养物质之外，还需要添加_____________等天然成分。

（3）获得重组细胞④时，以去核卵细胞为受体细胞的原因是______________________。

（4）将早期胚胎移入代孕母牛体内之前，需要对代孕母牛进行_______处理，目的是______________________。

（5）要通过⑤过程获得较多的遗传同质早期胚胎，应采用______________技术，操作时应选择发育至__________期的胚胎，并将内细胞团___________。“织女”牛⑦进入泌乳期后，可以通过分泌乳汁来生产人类所需的赖氨酸，因而称为________________。

（1）PCR扩增人血清白蛋白基因使用的酶是         。要使人血清白蛋白基因在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，应将其与          基因的启动子等调控组件重组。

（2）过程 ② 包括             技术和胚胎移植技术；可用           技术获得多只与该转基因奶牛遗传物质相同的牛犊。

（3）若要检测牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用                  技术。