1．
Rag
2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag
2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
（1）①中在核移植前通常使用______ 去除卵母细胞的细胞核。
（2）步骤中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其______分离出ES细胞。在培养液中添加______，如牛黄酸等化学物质时，就可诱导ES细胞向不同组织分化。
（3）步骤③中，需要构建含有Rag
2因的表达载体。可以根据Rag
2基因的______设计引物，利用______ 技术扩增Rag
2基因片段。该基因表达载体的组成，还必须有______、______以及标记基因等。
（4）为检测Rag
2基因的表达情况，除分子检测外，有时还管要进行______水平的坚定。