如图是植物组织培养的简略表示．据此回答：

下图表示培育小麦的几种育种方式，纯种高秆抗锈病植株基因型为DDRR，纯种矮秆不抗锈病植株基因型为ddrr，两对基因分别位于两对同源染色体上。据图回答下列问题：

（1）图中植株A培育过程中，将亲本杂交的目的是___________。

（2）植株B的培育运用的原理是__________。

（3）植株C需要染色体加倍的原因是____________。

（4）由融合细胞通过组织培养得到植株E的原理是___________。

（5）在图中的育种过程中，小麦的基因频率发生变化的是______________。

[选修3——现代生物科技专题]

科学家从某细菌中提取抗冻基因，转入番茄并培育出抗冻番茄。下图是转抗冻基因番茄的培育过程，含抗冻基因的DNA片段和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。分析回答问题：

（1）若要获得抗冻基因，可以从细菌中提取，也可以通过分析抗冻蛋白________的序列推测基因的结构，进而人工合成抗冻基因。对获得的抗冻基因可用________技术进行扩增。

（2）上述两种途径获得的抗冻基因________（填“一定”或“不一定”）相同，原因是________。

（3）用图中的质粒和抗冻基因构建重组质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是________。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用________酶对外源DNA、质粒进行切割。

（4）图中过程⑤表示________。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

   白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。“白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜—甘蓝”的杂交过程示意图，回答以下问题：

（1）为了得到原生质体需先用________和________来处理白菜细胞和甘蓝细胞；

（2）诱导原生质体融合的方法有多种，常用的物理方法是________，融合完成的标志是________。由杂种细胞得到白菜—甘蓝还需要经过组织培养技术，其中需要避光培养的步骤是________。

（3）上图通过植物体细胞杂交技术获得的“白菜—甘蓝”体细胞染色体数为_____；通常情况下，白菜和甘蓝有性杂交是不能成功的，原因是________，若对白菜和甘蓝采用杂交育种方法能成功的话，得到的后代应含________条染色体。

（4）植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比的优点是________。

1．下图为果酒和果醋的制作流程，回答问题：

（1）从自然菌样中分离较理想的醋酸杆菌进行纯化培养，通常采用 　   方法分离，接种之前要对接种工具进行     ，避免接种工具上可能存在的微生物污染培养基。

（2）果酒的制作离不开酵母菌，在酵母菌的酒精发酵过程中，通常将温度控制在      。由果酒转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是  ▲    和温度控制住30～35℃。

（3）若在果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌    (填“能”或“不能”)将果汁中的糖发酵为醋酸。

(4)在用果汁制果酒的过程中，发酵瓶溶液中pH的变化是          。

A．增大   B．不变    C．减小    D．先碱小后增大

2、下图为科学家利用转基因技术培育抗病番茄植株过程的示意图，请回答以下问题

（5）图中所选的Ti质粒中往往需含有      （A.抗虫  B.胰岛素  C.抗生素抗性  D.抗冻）基因，有利于重组质粒的筛选。A过程中常用的酶有                  。  

（6）E过程需要借助              技术，在含有营养物质、         等成分的培养基中，番茄细胞经过脱分化形成             ，该类单细胞具有细胞质丰富、        （A.液泡大、细胞核大    B.液泡小、细胞核大   C.液泡小、细胞核大   D.液泡小、细胞核小）等特征。

Ⅰ.苯胺是一种致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，下表是筛选分解苯胺的异养型细菌的培养基配方。

(1)此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供        和　　   　，该培养基从功能看属于　　　　　              。

(2)下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图A效果的接种方法是_____________________，图B效果的接种方法是____________________。

​

Ⅱ.根据植物组织培养和生物有效成分 的提取的知识回答下列问题：

(1)菊花的组织培养常用的培养基是　　　           ，原理是　　　　　       　。

(2)从油菜籽中提取菜籽油最好采用　　　　 　法，工业上提取胡萝卜素一般采用萃取法，鉴定该色素的方法是　　　　   　法。

（1）植物组织培养时，常用的一种培养基是MS培养基，其主要成分包括大量元素、微量元素和____________，在配制好的培养基中，常常需要添加________________。

（2）月季的花药培养，选择初花期             的花蕾，灭菌后的花蕾，要在_______条件下除去萼片和花瓣，在剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则易从受伤部位产生     ，同时还要彻底去除花丝，否则不利于               的形成，培养过程中，染色体组的数目常发生变化，因此还要对植株作进一步的_____________。

（3）从分化、脱分化和再分化的结果看，它们的实质都是________________    ______。

（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶___________，对含病毒基因的DNA和质粒，进行切割。A中能使抗病毒基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是___________，其中培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有___________，作为标记基因。

（2） 目的基因能在香蕉细胞中稳定遗传的关键是___________；香蕉组织块经过①②获得转基因抗病植株，其依据的原理是___________。

（3） 香蕉具有不耐储存的特点，科学家把控制香蕉成熟的基因导入香蕉，获得转基因延熟香蕉，储存时间可以延长两周。在延熟过程中，R蛋白起着很关键的作用。如果用蛋白质工程来生产R蛋白，应从预期的蛋白质的功能出发来设计___________，再推测应有的氨基酸序列。

（4）科学家把得到的抗病香蕉和耐储存的香蕉做成了人工种子，人工种子就是以植物组织培养得到的___________等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

（1）淋 巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，说明细胞膜具有               ，此过程常用          作为诱导剂，该细胞的特点是既能在体外培养条件下              ，又能产生              。

（2）杂交瘤细胞增殖进行的是                 分裂，其遗传性状              （填“改变”或“保持不变”）。

（3）杂交瘤细胞的体外培养液与植物组织培养的培养基相比需加入          。

（4）在单克隆抗体制备过程中，还应用了细胞工程中的            和            两大技术。

Ⅱ、红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如下图

​

（1）图中①所指的是              技术。

（2）图中 ② 所指的物质是               ， ③ 所指的物质是                    。

（3）检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞，可由注射           免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。

 (1) 请写出两项图中涉及到的现代生物技术：____________________。

   (2) 研究人员根据已知的_________，采用化学合成方法获得了胰岛素基因。

   (3)图中由A培育至具有凤梨风味的绿草莓幼苗的过程，体现植物细胞的               。

   (4) 转基因技术和细胞工程在动植物中都有广泛应用，但是，胚胎工程只是指对动物的____________所进行的多种显微操作和处理技术。

   (5) 不断恶化的生态环境，正在对人类的生存和发展构成严重的威胁。因此，通过生态工程可对遭到破坏的生态环境进行        。生态工程建设的目的是遵循自然界       的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止____________，达到生态效益与经济效益的同步发展。生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出两项它遵循的基本原理：_____________________________________。        

  2．某家族有种单基因遗传病，其遗传系谱图如下。请分析回答有关问题：

  （6）为研究其发病机理，通常采用       技术获得大量致病基因，该技术成功的关键是要有                 酶。

   （7）为诊断2号个体是否携带致病基因，通常采用的分子生物学检测方法是          。

   （8）该病会导致病人免疫能力下降，被病毒感染后的治疗需要大量的抗体。一般可通过动物细胞工程技术制备单克隆抗体：先获得既能迅速大量繁殖又能产生专一抗体的        ，然后将其注射到小鼠腹腔内增殖或在体外利用       (技术)进行大规模培养。临床使用的小鼠免疫后制备的鼠源性单克隆抗体最主要的优点在于          ，但存在一些弊端，其中之一是会引起人体抗鼠源抗体反应，这时的鼠源性单克隆抗体在免疫学上被称为        。5号个体在连续隔周注射某种鼠源性单克隆抗体治疗一种病毒感染性疾病，开始病毒量明显减少，一段时间后，这种病毒量又开始上升，排除病毒变异的因素，上升原因还可能是人体产生了              ，使鼠源抗体不能发挥抗病毒的作用。

   （9）如果要体外培养个体8的胚胎干细胞且维持不分化的状态，应该在         细胞上或在添加           的培养液中培养。