编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成，编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成，如图1所示。

回答下列问题：

现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白，要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用，某同学做了如下实验：将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组，其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一组作为对照，培养并定期检测T淋巴细胞浓度，结果如图2。

①由图2可知，当细胞浓度达到a时，添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加，此时若要使T淋巴细胞继续增殖，可采用的方法是________________。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO₂浓度，CO₂的作用是________________。

②仅根据图1、图2可知：上述甲、乙、丙三种蛋白中，若缺少________________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。

日前，英国研究人员利用最新的3D打印技术，“打印”出了活体胚胎干细胞。实验证明，这些干细胞仍保持着人体胚胎干细胞的正常分化能力。科学家使用活体卵子及皮肤成纤维细胞，在实验室已成功克隆出了数个人体胚胎，进而可以开发出有研究价值的胚胎干细胞。请回答：

（1）自然状况下的胚胎干细胞是由哺乳动物的早期胚胎或_____中分离出来的一类细胞。

（2）上述过程中要应用到的动物细胞工程技术有________、_________。胚胎干细胞在功能上具有_________。

（3）将胚胎干细胞用于检测有毒物质是否引起了基因突变，在分子水平上需要采用

______________技术。

（4）若选用囊胚进行胚胎分割，要注意对其__________做到均等分割。

（5）胚胎移植是否成功，与供体和受体的生理状况有关。大量的研究已经证明，为胚胎在受体内存活提供可能的生理基础是_____________

药物A能促进干细胞增殖，且浓度越大促进作用越强。活细胞中的某种物质能将MTT还原成蓝紫色结晶并沉淀在细胞中，死细胞无此功能；可通过仪器检测到蓝紫色物质的光吸收值，活细胞数与光吸收值成正相关。请设计实验验证药物A的作用。

实验材料：小鼠胚胎干细胞悬液(含小鼠胚胎干细胞和全部营养物质)、质量浓度为3.0 mg/mL的药物A、适宜浓度的MTT溶液、生理盐水、培养瓶、试管、比色计、血细胞计数板、显微镜等。(要求与说明：不考虑MTT溶液对细胞生存的影响，通过仪器检测蓝紫色物质光吸收值的具体过程不作要求)

(1)实验思路：

①用生理盐水配制质量浓度为1.5 mg/mL药物A；

②取三组培养瓶，分别加入______________________________________________________；

③乙组：加入适量且等量的质量浓度为1.5 mg/mL药物A；丙组：加入____________；甲组：加入_______________，作为对照组。

④用移液管分别吸取适量且等量培养瓶中的液体置于试管中，分别加入______________________，再_________，并记录；

⑤置于相同且适宜的条件下培养一段时间；

⑥重复步骤③，对测得的数据进行统计分析。

(2)请以柱形图表示预期的实验结果。

(3)该实验的目的是______________________________________________________。 

科学家利用细胞融合技术研究细胞膜的结构特性，进行了下列实验。

（1）将鼠细胞和人细胞在_______培养箱中培养一段时间，用_______处理，获取实验用的单细胞悬液。

（2）将两种细胞在37℃下混合培养，在培养液中加入_____________诱导融合，形成融合细胞。

（3）细胞膜的主要成分是磷脂和蛋白质。将连接了荧光染料的抗体与融合细胞在一定条件下培养，抗体与融合细胞的膜蛋白（抗原)特异性结合，其目的是标记膜蛋白，以便于显微镜观察。用荧光显微镜观察融合细胞表面荧光的颜色和________，开始时，鼠的细胞为绿色，人的细胞为红色，两种颜色不混合；一段时间后，可观察到红绿荧光交替分布的“嵌合体”。统计_______________，结果如下图所示。

（4）科学家据此提出两种假说解释嵌合体的形成。

假说一:融合细胞合成了新的膜蛋白；

假说二:原有膜蛋白在细胞膜平面上运动。

①使用______________抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞，均对嵌合体形成没有显著影响，这个结果否定了假说一。

②在15℃、20℃和26℃的培养温度下重复上述实验，这些实验的结果为__________，为假说二提供了证据支持。

癌症是一种由于基因突变的细胞发生异常大量累积而形成的。癌症基因疗法几乎没有耐药性，因此即使患者在化疗和放疗过程免疫力低下的情况下，也同样可以接受基因治疗。研究人员设计了三种治疗方案：

(1)方案一：研究人员从病人体内提取“T细胞”，利用______________技术在体外完成基因的转移，然后将成功转移的细胞进行______________增加细胞的数量，最后将这些改变了的“T细胞”成功移植回到患者体内，这些改变了的“T细胞”识别攻击癌细胞。

(2)方案二：研究人员利用修饰的腺病毒5号作为______________，将Endostatin基因和Interferon基因等有治疗效果的基因导入癌细胞内。对腺病毒进行修饰的目的是使病毒______________，但能够复制增加相关基因的数量。

(3)方案三：新型基因疗法JG-1是结合CDC6shRNA活性基因和癌抑制基因pl6这两种基因的强有力的疗法。“CDC6shRNA活性基因”的使用原理着眼于癌细胞具有______________的特性，它能消灭在癌细胞里存在的一种被称为CDC6的DNA的复制因子。然后通过pl6来修复抑癌基因Rb路径上的起效机制，并促使癌细胞在刚开始增殖阶段即停止增殖。

(4)对癌细胞进行体外培养时，可以形成____________________层细胞，这是由于癌细胞的细胞膜表面的糖蛋白减少的原因，使癌细胞培养时不具有原代培养的____________和______________的特点。

在畜牧生产中，人们利用克隆技术和试管动物技术促进优良畜群繁育并取得了显著成绩，请回答以下问题：

（1）克隆高产奶牛：从供体高产奶牛体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为________；用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是________；将供体细胞注入体外培养到________期的去核卵母细胞内，通过电刺激使两细胞融合，构建垂直胚胎，之后将胚胎移入代孕母牛体内，从而获得与________（填“供体奶牛”或“受体奶牛”）遗传物质基本相同的犊牛。

（2）试管牛的培育：将体外培养成熟的卵母细胞与经__________处理的精子在体外受精后，应将受精卵移入________中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力；通常将胚胎培养至_________期，取________细胞做DNA分析和性别鉴定，并将胚胎移入同种的、生理状态相同的的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体。

（1）过程③常用的方法是________________。

（2）向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生________免疫。从小鼠体内分离的细胞Ⅰ是________________，细胞Ⅱ应具有的特点是________________________。

（3）体外培养细胞Ⅱ，首先应保证其处于________________的环境中，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用________________________。

（4）对于转基因成功的细胞Ⅱ还要进行克隆化培养和________检测。

（5）若要预防H7N9禽流感，可用图中的________________作为疫苗。

抗体的结构如右图所示，它有两条H链和两条L链。同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体的结合抗原的V区氨基酸序列有差异。

（1）抗体是由___________细胞合成并分泌的。若抗体结构中的肽键数目为p，氨基酸数目为a，则二者的关系式为_____________。

（2）取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和_____________检测以获得具有______________________特点的杂交瘤细胞。为获得大量的单克隆抗体，将得到的杂交瘤细胞置于含5%CO₂的培养箱中培养，其中CO₂的主要作用是____________________________。

（3）由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应，导致该抗体失效，科学家制备了嵌合性单克隆抗体，初步解决了这一问题。推测嵌合性抗体应由___________(填“鼠源性抗体” 或“人抗体)”的C区和___________(填“鼠源性抗体” 或“人抗体)的V区组合而成。

（4）为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体，科研人员对抗体结构进行精细研究，找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的__________序列，通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造。这种人源单克隆抗体属于____________工程的产物。

下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

(1)图甲和图乙所示的过程中，培养动物细胞的培养液中为了保证无菌环境，通常还要添加一定量的______________________。

(2)图甲中②过程常在_____________（化学试剂）诱导下完成，与诱导植物原生质体融合不同的是，②过程也可用_____________诱导融合。杂交瘤细胞的特点是_________________________ ；

(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，其优点是________________________________。

(4)若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗?_____________。原因是____________________________________。

(5)图乙过程的技术具有多种用途，但是不能    (    )

A．有选择地繁殖某一性别的家畜    B．繁殖家畜中的优良个体

C．用于保存物种                  D．改变动物的核基因

细胞自噬是指细胞通过降解自身结构或物质使细胞存活的自我保护机制。细胞面临代谢压力时，细胞可降解自身大分子或细胞器为生存提供能量。下图1、图2为细胞自噬的信号调控过程，AKT和mTor是抑制细胞凋亡和自噬的两种关键蛋白激酶。

⑴据图1所示，营养物质充足时，胰岛素与受体结合，激活____________来抑制凋亡，激活的该酶一方面可促进葡萄糖进入细胞，另一方面可以促进葡萄糖分解为____________进入线粒体产生大量ATP。在ATP充足时激活的mTor抑制自噬的发生。

⑵据图2所示，当环境中营养物质或胰岛素缺乏时，mTor失活，酵母细胞通过启动_________过程为细胞提供ATP；如果上述过程无法满足代谢需要，酵母细胞则启动_________程序。

⑶为探究自噬作用对细胞周期的影响，研究者对人宫颈癌HeLa细胞饥饿处理（不提供外源营养）诱发自噬，检测处理前后各时期细胞占总数的百分比如下表（G₀是暂不增殖细胞）。

①下列不是饥饿处理组所需的细胞培养条件是_________。

A．适宜渗透压        B．溶解氧           C．适宜温度            D．血清

②据表分析，自噬发生后HeLa细胞增殖速_____（加快/不变/减缓），判断的依据_________________。