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            • 1.

              请回答下列有关细胞工程和胚胎工程两方面的问题:


              (1)植物体细胞杂交过程中,原生质体经诱导融合成功的标志是_______________。为了防止杂种细胞培养过程中细菌的污染,可向培养基中加入适量的_____________。为了诱导杂种植株生根,须设置培养基中生长素与细胞分裂素的比例_______ 1(填“大于”“等于”或“小于”)。

              (2)图中为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养)。

              Ⅰ.AB段可能发生了____________现象。动物细胞培养和植物组织培养过程中,就细胞增殖、分化来说,二者除了都需要增殖外,植物细胞不同于动物细胞的是还要进行_________。

              Ⅱ.为制备单克隆抗体,需将特定抗原注射到小鼠体内,以此获取B细胞,同时可选取图中_____点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞。单克隆抗体制备过程中,经过融合和初步筛选后得到的杂交细胞还需要再经过_____和_____才能得到符合要求的杂交瘤细胞。单克隆抗体的应用主要有两个方面,一个是作为_______试剂,能准确地识别各种抗原物质的细微差别,并跟一定抗原发生特异性反应。另一方面可以用于治疗疾病和______________。

              (3)雌性动物卵泡的形成是在______时期完成的,这是精子和卵子在发生上的重要区别。体内受精过程中,防止多精入卵的第一道屏障是___________。早期胚胎发育中初次发生分化的时期,在胚胎的一端有一团细胞,称___________________,将发育为胎儿的各个组织。此时,胚胎中央的腔体称为___________________。胚胎从透明带中伸展出来的过程叫做___________________,此后,胚胎进一步发育为___________________。

            • 2. 下图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答:

              (1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至_________期的内细胞团或胎儿的_____中分离得到的一类细胞。

              (2)图中分化程度最低的干细胞是______。在体外培养条件下,培养液中加入_________因子,可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。

              (3) 在机体内,皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因________的结果。

              (4)某患者不能产生正常的白细胞,通过骨髓移植可以达到治疗的目的,骨髓的治疗的实质是将上图的______________细胞移植到患者体内。

              (5)若要克隆某种哺乳动物,从理论上分析,上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的___________,其原因是___________。

              (6)若某药物可抑制肝肿瘤细胞DNA的复制,使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的______________期。

              (7)在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段,用__________细胞与骨髓细胞融合,经多次筛选最终得到能分泌__________________的杂交瘤细胞。

                 

            • 3.

              单纯疱疹病毒I型(HSV-I)可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-I的单克隆抗体可快速检测HSV-I。回答下列问题。

                  若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题。

              (1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过______次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是_________小鼠,理由是__________________。

              (2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有_____,体系中出现多种类型细胞的原因是_______________。

              (3)杂交瘤细胞中有_______个细胞核,染色体数目最多是_______条。

              (4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是__________________。

            • 4.

              现有两种不同属的农作物,甲植物高产不耐盐,乙植物低产但耐盐;欲培育出既高产又耐盐的植株,以适应盐碱地栽培。请回答:

              (1)采用________(杂交,嫁接,转基因)方法可以达到上述目的,这种育种方法的优点是__________________。

              (2)如采用细胞工程育种,做法如下:

              B—→愈伤组织胚状体目的植株


              ①甲、乙原生质体经诱导融合完成的标志是________。以胚状体为材料经过人工薄膜包装得到的人工种子,在适宜条件下,同样得到萌发幼苗,与天然种子相比,人工种子具有哪些显著的优点?(列举2条)________________________________________。

              ②动物细胞工程应用较广泛的是单克隆抗体的制备,单克隆抗体最主要的优点是具有特异性强、灵敏度高的特点,原因是__________________________________。

            • 5.

              “生物导弹”是免疫导向药物的形象称呼,由单克隆抗体与药物配合而成。单克隆抗体能自动导向,在生物体内与特定目标细胞或组织结合,并由其携带的药物产生治疗作用。单克隆抗体的制备过程如下图所示,分析回答下列问题:

               

              (1)制备特异性的单克隆抗体,首先要对小鼠注射特定_______________。

              (2)从单克隆抗体制备过程可以看出,它运用了________________________ (至少两种)等细胞工程技术。

              (3)若只考虑细胞的两两融合,理论上融合的细胞有______种类型,符合要求的细胞乙名称为__________,其特点是___________。

              (4)体外培养乙细胞时培养基中通常需要加入____________等天然成分,还需气体环境,其中CO2的作用是__________________________________。

              (5)特异性抗体也可以通过常规方法来制备:向动物反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物的血清中分离所需抗体。与这种常规方法相比,单克隆抗体具有__________________________________________等优点。

            • 6.

              人心肌细胞中的肌钙蛋白由三个结构不同的亚基组成,即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和 肌钙蛋白C(cTnC),其中肌钙蛋白I(cTnI)在血液中含量上升是心肌损伤的特异指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体,科研人员完成了以下过程。

              (1)过程①的目的是___________,制备抗cTnI单克隆抗体的过程中用到的技术有___________(至少答出两条)。

              (2)细胞培养中,为防止有害代谢物的积累,可采用_________________的方法。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠一次,共注射三次,其目的是_________________,最后一次免疫后第3天,取脾脏内部分组织并用_______________处理分散成单个细胞,再制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合,常用的诱导因素是__________。

              (3)甲、乙、丙中,只含杂交瘤细胞的是____________,②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,之后稀释、培养、再检测,并多次重复上述操作,其目的是筛选获得___________________的杂交瘤细胞。

              (4)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法,具体原理如下图:

              据图分析,固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合,这是由于不同抗体与同一抗原表面的_________结合。该检测方法中,酶标抗体的作用是__________________,可通过测定产物量来判断待测抗原量。

            • 7.

              有性生殖的生物产生后代需进行受精作用,植物体细胞杂交要进行原生质体的融合,单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合,可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题:


              (1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用,在光照强度大于800lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞,较为简便的筛选方法是                        
              (2)若a、b表示两种植物体细胞,则由d细胞形成杂种植株的原理是                     ,这种育种方法的优点是                                  

              (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和效应B淋巴细胞,则d细胞本领是                   。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有              的特点.生产上一般不能通过直接培养效应B细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是                                         

              (4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解,请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。顺序是                   

            • 8.

              下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。请据图回答下列问题:


              (1)过程①至②获取的抗体优点是                                            。

              (2)②处需要筛选,其目的是_________________________________________________。

              (3)结构甲的组成必须包括_______________________________________、复制原点和目的基因。

              (4)如果想用棉花产生该种抗体,则⑥过程的受体细胞通常选用                

            • 9.

              如图可表示细胞融合技术的一些过程,请据图回答:


              (1)若A、B到C的过程是体外受精过程,则精子必须先进行 ______  处理,常采用的方法是 ______和 ______.若此过程是体内受精过程,则胚胎发育到              阶段可进行冲卵.
              (2)若A、B细胞为植物细胞,降解脱掉细胞壁的酶可能是          酶和          酶。
              (3)若该过程是制备单克隆抗体的过程,在A、B到C的过程中,A细胞为骨髓瘤细胞,B细胞为能产生抗体的B淋巴细胞,那么D细胞称为 ______ _细胞,这种细胞的特点是              .从融合细胞中选择出它的方法是在特定的 ______培养基中培养。
            • 10. 下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程,请回答下列问题:

              (1)质粒DNA分子上有一个或多个限制酶切割位点,目的是________。过程①将处理过的质粒和含VP40基因的DNA片段拼接成重组质粒是靠________来完成的。

              (2)过程②中首先需要用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于感受态,VP40基因进入大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为________。

              (3)过程③产生的VP40蛋白对于小鼠来说相当于________,一段时间后,若小鼠血清中抗________的抗体检测呈阳性,说明小鼠体内产生了________反应,再从小鼠的________中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经过程④得到的杂交瘤细胞的特点是________________________________。

              (4)用此抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合,制成________,抗击埃博拉病毒。

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