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            • 1. 在20世纪初,科学家用植物体细胞杂交的方法,将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合,成功地培育出了“番茄马铃薯”杂种植株.如下图,其中①--⑤表示过程,英文字母表示细胞、组织或植株.据图回答下列问题:

              (1)实现过程②的技术是______.与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为______.
              (2)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中,依据的原理是______,其中过程④相当于______过程,⑤涉及的分裂方式为______.
              (3)若番茄细胞内有m条染色体,马铃薯细胞含n条染色体,则“番茄-马铃薯”细胞内含______条染色体;若杂种细胞培育成为“番茄-马铃薯”植株为四倍体,则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于几倍体植株?______.
              (4)如果形成c细胞的a、b细胞都是番茄细胞,那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是______.
              (5)若a、b依次为小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,那么该方案的目的是______.
            • 2. 现代生物技术与技术应用
              已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原。 疫苗的生产和抗体的制备流程如图所示。 请回答下列问题

              (1)图中X的名称是______。
              (2)A基因重组载体( 重组质粒) 在受体细胞中表达出A蛋白,该过程除证明了质粒可以作为运载体外,还证明了______。
              A、质粒能自我复制      B.质粒有一个或多个酶切点
              C.质粒有标记基因       D.生物间共用相同遗传密码子
              (3)A基因在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。 为防止蛋白质被降解,在实验中对选用受体细胞大肠杆菌的要求是______( 填文字)。
              (4)在提取分离A蛋白生产过程中,要保持A蛋白的活性,需注意的事项有( 多选)______。
              A、适宜的温度         B.添加逆转录酶
              C.适宜的pH       D.添加蛋白酶抑制剂
              形成有效的重组质粒,选择适当的限制性内切酶很重要。 如图1示意大肠杆菌质粒的相关基因与限制酶切点;图2示意有关限制酶在DNA分子中的具体切点。

              (5)要成功转入目的基因且重组效率较高,选择限制酶的方案是______,其原因是______。
            • 3. 研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段。
              (1)H蛋白在成年个体的正常组织中表达量______(填“低”或“高”)。H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建______区基因,转入受体细胞表达并提纯。
              (2)为扩增出大量目的基因需用到PCR技术,常规PCR技术一般包括变性、退火、延伸等步骤。退火(55~60℃)时______碱基互补配对。设计引物是PCR技术的关键之一,某同学设计的两组引物如表所示,其中引物对______(填“A”或“B”)设计不合理。
              引物对A P1 GTCCGCTAGTGGCTGTG
              P2 AGCTGGCGTTTAGCCTCG
              引物对B S1 AAGCCGGGCGCGCCCGGAA
              S2 TTCGGCCCGCGTTATGCGCG
              (3)制备抗H蛋白单克隆抗体时,需将H蛋白注射到小鼠体内,这样做的目的是使小鼠体内产生______。
              (4)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可以将______结合制成“生物导弹”,杀死癌细胞。
            • 4. 近年来,我国死于狂犬病的人数有上升趋势.狂犬病病毒的核酸是RNA,机体感染病毒后产生的特异性IgG抗体,能清除狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据.我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果.请根据上述材料,回答下列问题:
              (1)巴斯德利用固定毒株制成减毒活疫苗,预防狂犬病.制成减毒活疫苗需要用______培养.
              (2)特异性抗体获取可用单克隆抗体制备.在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程技术是______.
              (3)下面是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:

              ①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是______细胞,该细胞能够产生______.从小鼠体内提取分离该细胞之前,给小鼠注射的特定的物质是______.
              ②图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的______、聚乙二醇或电激等诱导.
              ③特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体.与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有______等优点.
              (4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有______.
            • 5. 单纯疱疹病毒I型(HSV-I)可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-1的单克隆抗体可快速检测HSV-1。回答下列问题:
              (1)在该单克隆抗体的制备过程中,先给小鼠注射一种纯化的蛋白,一段时间后,若小鼠血清中抗_____的抗体检测呈阳性,说明小鼠体内产生了____________反应,再从小鼠的______中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的__________细胞融合,再经过筛选、检测,最终可获得所需的杂交瘤细胞。(2)在特定的选择性培养基进行筛选时,在该培养基上,__________________和________________都会死亡,只有融合的杂种细胞才能生长。该杂种细胞具有的特点是_______________________________。
              (3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV-I蛋白,其原因是该抗体具有__________和_________________ 等特性。
            • 6.

              下列是利用生物技术制备抗体的两个途径模式简图。请据图回答下列问题:

              (1)过程①至②所获取的抗体1称为____________,其中过程①是指细胞工程中的____________技术。

              (2)④过程需要____________酶,⑤过程需要的工具酶为________________________________。

              (3)②处需要筛选,其培养基称为____________(填“选择培养基”或“鉴别培养基”)。结构甲的组成必须包括启动子________________________________及目的基因等(写两项)。

              (4)如果想用棉花产生该种抗体,则⑥过程的受体细胞通常选用____________菌,经过筛选后再侵染棉花体细胞,转化成功后通过____________技术获得能产抗体的转基因棉花植株。

            • 7. 单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备,已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示:

              (1)过程③常用的方法是________________。

              (2)向小鼠体内注射抗原蛋白,使小鼠产生________免疫。从小鼠体内分离的细胞Ⅰ是________________,细胞Ⅱ应具有的特点是________________________。

              (3)体外培养细胞Ⅱ,首先应保证其处于________________的环境中,其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用________________________。

              (4)对于转基因成功的细胞Ⅱ还要进行克隆化培养和________检测。

              (5)若要预防H7N9禽流感,可用图中的________________作为疫苗。

            • 8.

              抗体的结构如右图所示,它有两条H链和两条L链。同一物种C区氨基酸序列恒定,不同抗体的结合抗原的V区氨基酸序列有差异。

              (1)抗体是由___________细胞合成并分泌的。若抗体结构中的肽键数目为p,氨基酸数目为a,则二者的关系式为_____________。

              (2)取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选得到杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和_____________检测以获得具有______________________特点的杂交瘤细胞。为获得大量的单克隆抗体,将得到的杂交瘤细胞置于含5%CO2的培养箱中培养,其中CO2的主要作用是____________________________。

              (3)由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应,导致该抗体失效,科学家制备了嵌合性单克隆抗体,初步解决了这一问题。推测嵌合性抗体应由___________(填“鼠源性抗体” 或“人抗体)”的C区和___________(填“鼠源性抗体” 或“人抗体)的V区组合而成。

              (4)为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体,科研人员对抗体结构进行精细研究,找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的__________序列,通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造。这种人源单克隆抗体属于____________工程的产物。

            • 9.

              下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图,请据图回答下列问题:


              (1)图甲和图乙所示的过程中,培养动物细胞的培养液中为了保证无菌环境,通常还要添加一定量的______________________。

              (2)图甲中②过程常在_____________(化学试剂)诱导下完成,与诱导植物原生质体融合不同的是,②过程也可用_____________诱导融合。杂交瘤细胞的特点是_________________________ ;

              (3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞,其优点是________________________________。

              (4)若不考虑环境因素影响,克隆羊的性状全部像白面绵羊吗?_____________。原因是____________________________________。

              (5)图乙过程的技术具有多种用途,但是不能    (    )

              A.有选择地繁殖某一性别的家畜    B.繁殖家畜中的优良个体

              C.用于保存物种                  D.改变动物的核基因

            • 10. 如图为单克隆抗体制备流程示意图.

              (1)单克隆抗体制备技术的基础是______.
              (2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基中培养,目的是______.在细胞培养过程中,培养液中需要添加无机盐,但要注意无机盐的______,以保证生命活动的正常进行.
              (3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/ml,每孔滴入0.1ml细胞稀释液,其目的是______.
              (4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞,放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是______.
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