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            • 1. 葡萄酒酵母(C1)具有良好的发酵性能,但分解苹果酸能力差,过多的苹果酸会使葡萄酒有酸涩感,解苹果酸裂殖酵母(M1)具有极强的降解苹果酸能力,但发酵性能极差。为了培育新型酵母菌菌种,科研人员采用了以下步骤进行育种。请分析回答:

              图1 酶浓度对C1原生质体形成与再生的影响

                 表 亲本及融合子细胞体积和DNA含量的比较


              菌株

              细胞体积

              /μm-3

              DNA含量/

              (×2×10-3 μg·cell-1)

              M1

              31.77

              2.68

              C1

              22.03

              1.55

              Z2

              45.23

              3.21

              Z5

              43.23

              3.42

              Z13

              46.21

              4.01

              Z15

              38.14

              3.87

              Z19

              49.14

              4.11

              Z21

              34.45

              2.82

              Z29

              47.54

              3.68


              (1) 步骤一:制备原生质体。培养C1、M1单倍体亲株,加入一定量的0.5%的蜗牛酶液,保温处理一段时间,在一定浓度的高渗缓冲液洗涤,以确保获得更多的原生质体。

              ①本实验中,蜗牛酶液的作用是_。 

              ②在无菌条件下,用____(A:高渗缓冲液、B:低渗缓冲液、C:生理盐水)洗涤,以确保获得更多的原生质体。 

              ③改变蜗牛酶液浓度进行多组实验,结果见图1,分别计算酶浓度为1和1.5时的形成率与再生率,相比较酶浓度为____时更适宜。 

              (2) 步骤二:诱导原生质体融合。取C1、M1原生质体悬浮液等量混合,离心去除上清液,加入一定量40%的____溶液,30 ℃保温20 min,镜检并观察融合情况。 

              (3) 步骤三:融合子的鉴定。测定细胞体积及DNA含量,结果见表1,从中挑选出融合子Z13、Z15、Z19、Z29,理由是__________________。 

              (4) 步骤四:融合子发酵性能的测定。测定融合子与亲株的降糖能力和降酸能力,图2和图3是对Z29和亲株的测定结果,据图分析可以得出的结论是________的降糖能力和降酸能力均较好,表明________________。 

              图2 融合子Z29与亲株发酵降糖能力的比较

              图3 融合子Z29与亲株总酸降解能力的比较

            • 2.

              如图为细胞融合过程示意图,请据图回答下列问题:


              (1)若A、B是植物细胞,则其融合形成的D细胞培养成植株,还要应用___________________技术。

              (2)若A、B是动物细胞,则一般取自________、幼龄动物的器官或组织。A、B到C的过程中,常用的不同于植物细胞工程的方法是用___________诱导细胞融合。

              (3)若该过程用于制备单克隆抗体,A是已免疫的B淋巴细胞,则B为_______细胞。为筛选出符合要求的D细胞,方法是用特定的____________________培养基培养,筛选出的D细胞称为_____________________。单克隆抗体的优点是____________________,并可大量制备。

            • 3.

              植物组织培养技术被广泛应用于培育无病毒植株、育种及获得植物次生代谢产物等生产生活实际。如图为番茄植株的培育过程。分析回答下列问题:

              (1)①过程中使用了____________酶,获得植物细胞原生质体,此处使用的溶液浓度不宜过小,以防止细胞原生质体________。

              (2)铺平板类似于微生物接种,该过程必须在________旁进行操作。平板中添加蔗糖的目的除了提供营养外,还有________的作用。

              (3)同一番茄植株不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因________(填"相同""不相同"或"不一定相同");图中属于再分化的过程是________(填序号)。

              (4)多倍体番茄植株所结果实中维生素含量更高,若想培育多倍体番茄,可选择在图中的过程③中添加____________进行处理,也可以选择在过程⑥中添加__________进行处理。

            • 4. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。相关叙述正确的是

              A.利用野生黑芥培育抗黑腐病花椰菜是运用基因工程技术

              B.初步筛选杂种细胞可在过程②后,以融合的活细胞中有叶绿体为标志

              C.制备原生质体时应将材料置于加有纤维素酶和果胶酶的清水中

              D.再生植株是否含有抗性基因可以运用DNA分子杂交技术进行鉴定
            • 5.

              甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有效成分A和B的新型药用植物。请回答下列问题:

              (1)为了培育出该新型药用植物,可取甲和乙的叶片,先用相关的酶去除细胞壁,获得具有活力的________,再用化学诱导剂诱导二者融合,将融合的细胞进一步培养形成________组织,经过________形成完整的杂种植株。这种培育技术称为________。

              (2)上述杂种植株属于多倍体,多倍体是指________。假设甲与乙有性杂交的后代是不可育的,而上述杂种植株是可育的,造成这种差异的原因是________

              (3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。

            • 6.

              下列四个选项中,没有应用植物组织培养技术的是

              A.花药离体培养获得单倍体植株
              B.秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株
              C.基因工程培育出抗棉铃虫的棉花植株
              D.细胞工程培育出“番茄-马铃薯”杂种植株
            • 7.

              细胞融合技术有着广泛应用。下图为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题


              (1)若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr两个玉米品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。科学家分别将它们的花粉除去细胞壁,然后诱导其融合,再把这些融合细胞进行培养,培育出了玉米新品种。

               ①这两个品种的花粉可用化学诱导剂诱导融合,共可产生___________种基因型的融合细胞(仅考虑两两融合),这些融合细胞经过____________技术可以得到玉米新品种。

               ②若想培育出基因型为yyRR的玉米植株,也可直接用yyRr植株的花粉培养得到__________幼苗,再经过__________处理并筛选获得,这种方法叫做________。

              (2)若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞,a、b细胞融合之前,要纤维素酶和果胶酶酶处理后得到_________________;诱导植物细胞融合的化学方法是_________________。

              (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞,请据图回答:

                ①为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点,经特殊处理,在促细胞融合因子的作用下,使两种细胞发生融合,形成图中的d细胞,其特点是_________。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有_______________________等特点。

                 ②下列各图表示单隆抗体制备过程的各阶段图解,请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来_______________。

            • 8. 如图示“番茄一马铃薯”杂种植株的培育过程,其中①~⑤表示过程,字母表示细胞、组织或植株.下列说法正确的是(  )
              A.①表示低渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体
              B.e是一团有特定结构和功能的薄壁细胞
              C.可根据质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生
              D.植物有性杂交和体细胞杂交都能克服远缘杂交不亲和的障碍
            • 9.

              细胞工程是一门新兴的生物工程技术。在动、植物的育种;药物提取;药物生产等领域的应用十分广泛。请利用所学知识回答下列关于细胞工程的相关问题:

              (1)采用植物细胞工程育种的方法如图:

              ①以胚状体为材料,经过人工薄膜包装得到的人工种子,在适宜条件下同样能够萌发成幼苗,与天然种子培育相比,人工种子的培育的显著优点有___________________________________________________________(答出两点)。

              ②甲、乙原生质体经诱导融合完成的标志是____________。利用杂种细胞采用植物组织培养技术可以培育成杂种植株,该技术的核心步骤是______________________和________________________________。

              (2)已知西湖龙井含有的茶碱是植物细胞的代谢产物,具有提神、抗衰老功效。可用植物组织培养来实现茶碱的工业化生产。

              ①若利用植物组织培养技术,可将龙井茶叶细胞培养到____________阶段,然后从____________(填细胞器)中提取茶碱。

              ②如果想获得脱毒的龙井茶苗,可以切取一定大小的___________________________等进行组织培养。

            • 10.

              下列关于“筛选”的叙述中,不正确的是( )

              A.在诱变育种、杂交育种、单倍体育种过程中都要进行筛选
              B.在制备单克隆抗体时需要进行筛选
              C.在小白鼠胚胎细胞培养过程中,通过筛选可以获得具有无限分裂能力的细胞系
              D.通过植物体细胞杂交的方法获得杂种植株的过程中需要进行筛选
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