控制哺乳动物的性别对于畜牧生产有着十分重要的意义。根据牛的X精子的DNA含量比Y精子的高出4%左右，利用这一差异人们可以借助特殊仪器分离精子，从而有效控制性别，再通过胚胎工程技术就可培育出所需性别的试管牛（如下图所示）。请根据以上信息回答下列问题：

（1）图中的过程①是指      ，要将分离得到的精子经过      处理，同时卵母细胞应培养至      　　　期，方可完成该过程。

（2）在①过程中首先发生      反应，精子穿越放射冠和透明带，透明带反应和      是防止多精入卵的两道屏障。

（3）在体外将受精卵培养至     期时可用于移植，培养过程中除需给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外，还需要提供CO₂气体以维持      。

（4）受体母畜对移入子宫的外来胚胎基本上不发生      反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。

科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图，请回答相关问题：

（1）过程①获得重组胚胎之前需要通过__________________技术获得重组细胞，接受细胞核的去核卵母细胞应该处于___________________时期。

（2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其_______________分离出ES细胞。步骤③中，需要构建含有干扰素基因的__________________。

（3）将基因导入ES细胞常用的方法是________________________。体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的_________________。

（4）为检测干扰素基因的表达情况，可采用__________________方法，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达。

科学家将人的生长激素基因与质粒重组后，导入牛的受精卵，并成功从牛奶中提取到了人生长激素，操作流程如下图所示，请据图回答。（已知限制酶I的识别序列和切点是－G↓GATCC－，限制酶II的识别序列和切点是－↓GATC－）。

       （1）获取目的基因的主要途径包括从已有物种细胞中提取和_____________。

       （2）据图分析，在构建重组质粒的过程中，目的基因用________________（填“限制酶I”或“限制酶Ⅱ”）进行了切割。

       （3）获能的精子和卵细胞相遇后首先发生____________反应，之后精子接触卵黄膜，并进一步与卵结合，在该过程中，_______________和____________________可以防止其它精子入卵。

       （4）图中“受体”是__________________________；“符合要求的个体”是指_____________________________。

       （5）将牛受精卵进行人工培养后，一般可选择__________________期的、发育良好的胚胎进行移植。

完成下列相关填空

（一）某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下图所示。

（1）土壤悬液先经80℃处理15分钟，其目的是筛选出             。

（2）在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液进行            ，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到单菌落，其周围出现透明水解圈，圈的直径大小与           强弱相关。

（3）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中         的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高                的利用率。

（4）利用物理或化学方法将植酸酶固定在          的介质上称为固定化酶。实验过程涉及两次蒸馏水洗涤反应柱的操作，其中第一次洗涤的目的是除去             。

（二）下图为绵羊多莉克隆过程，请回答有关问题。

（5）步骤1中若要获得较多数量的卵细胞，通常对母羊注射相关激素使其超数排卵。步骤2可通过降低           浓度，实现对乳腺细胞的营养限制性培养，可以得到大量的          期细胞，从而实现细胞分裂同步化。

（6）步骤3中科研人员采用         技术进行细胞融合，步骤4通过胚胎体外培养获得胚胎，待发育至              胚胎时进行移植，通常移植至代孕母羊的          部位。

（7）若要将目的基因导入乳腺细胞中，在扩增目的基因时，除利用PCR技术外，还可将目的基因所在的重组载体导入大肠杆菌中，利用大肠杆菌  ▲ 使其扩增。

（8）为获得大量的上述克隆羊，可用胚胎成纤维细胞进行体细胞克隆。因为胚胎成纤维细胞可进行           培养，理论上可获得无限只克隆羊。

试管婴儿之父——爱德华兹因体外受精技术获得2010年诺贝尔生理学或医学奖，该体外受精技术又称试管婴儿技术。则下列说法错误的是 ( )

科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS)，继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠。流程如下：

(1)从黑鼠体内获得体组织用_________处理后将细胞分散，对其进行的初次培养称为________，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为________。贴壁的细胞再次分瓶培养称为_________。

(2)图中2­细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为________；也可从灰鼠体内取出卵子，通过________后进行早期胚胎培养获得。

(3)图中重组囊胚通过________技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用________方法保存。

(4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的________分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向_____________后用于疾病的细胞治疗。

(1)图中对良种奶牛进行处理时用到的激素      ,①过程必须用到      酶,②过程使用的是             酶。④表示基因工程中         过程;若方法C是最常用的将目的基因导入动物细胞的方法,则方法C是           。 

(2)图中采用的生物工程技术A和B分别是指                 和        。 

(3)为实现人血清白蛋白基因在转基因牛E的乳腺细胞中表达，应让该血清白蛋白基因和 的启动子等调控组件结合在一起。如果转基因牛E的牛奶中含有               ,则说明人血清白蛋白基因在个体水平已表达成功。 

(1) 获取外源基因用到的工具酶是　　 ，为了提高实验成功率，通常利用            技术获得大量标记的外源基因。

(2) 外源基因能够整合到精子的           上是提高转化率的关键，因为受精时只有精子的            才能进入卵细胞中。

(3) 过程②采用的是             技术，该过程中应对已经导入外源基因的精子进行          处理。

(4) 过程③需要在            (至少写出两点) 等条件下进行培养。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的              。

(5) 为了获得更多的早期胚胎，常用                  激素对供体进行处理，使其                   ，从而获得更多的卵母细胞。