人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:

(1)htPA基因与载体用 切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用      技术。 

(2)为获取更多的卵(母)细胞，要对供体母羊注射 ，使其     。采集的精子需要经过 才具备受精能力。 

(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是     。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行 。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎，这体现了早期胚胎细胞的 。 

(4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到 ，说明目的基因成功表达。 

[生物——选修3：现代生物科技专题]

   据报道，尽管存在巨大争议，世界上首例“三亲婴儿”仍然于2016年4月在墨西哥诞生。三亲婴儿的培育技术路线如下。

回答下列问题：

（1）三亲婴儿培育技术中，过程A使用的技术是________；在体外受精前需对精子进行________处理；由“受精卵→三亲婴儿”过程中，需用到的胚胎工程技术有早期胚胎培养和________。

（2）利用三亲婴儿培育技术可以避免三亲中________（填“捐献者”、“母亲”或“父亲”）中的________（填“常染色体上”、“性染色体上”或“线粒体中”）的基因缺陷传给孩子。

（3）三亲婴儿与体细胞克隆动物多利羊在遗传物质来源上的主要区别是________。

下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答:

(1)获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和                        。

(2)获取目的基因还可以使RNA 形成cDNA。获得目的基因可以通过            技术大量扩增。图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时切割载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含                         的培养基上进行。 

(3)图中质粒除了所示结构以外，还必须含有 才能构成一个完整的基因表达载体。能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是图中的         。 

(4)过程①可采用的操作方法是 。 ②过程表示        。 

(5)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用               技术。 

［生物——选修3：现代生物科技专题］

据报道，尽管存在巨大争议，世界上首例“三亲婴儿”仍然于2016年4月在墨西哥诞生。三亲婴儿的培育技术路线如下。

 回答下列问题：

（1）三亲婴儿培育技术中，过程A使用的技术是                            ；在体外受精前需对精子进行                处理；由“受精卵…→三亲婴儿”过程中，需用到的胚胎工程技术有早期胚胎培养和                           。

（2）利用三亲婴儿培育技术可以避免三亲中          （填“捐献者”“母亲”或“父亲”）中的                 （填“常染色体上”、“性染色体上”或“线粒体中”）的基因缺陷传给孩子。

（3）三亲婴儿与体细胞克隆动物多利羊在遗传物质来源上的主要区别是                                                    。

玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

                                               
（1）玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供_____   _ 。发酵过程中检测酵母菌数量可采用             法或稀释涂布平板法计数。

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用__   _____法或____法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的__      _____催化。PCR技术一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______ 和 _______ 三步。

36【生物---选修3：生物科学技术】（15分）

应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白，既提高了产量，又有了安全保障。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：

（1）上述过程涉及到的生物技术有                                   （至少答3个）。

（2）一般情况下，良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足，请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法：  　　　　　　                     。

（3）图中①一般经                （酶）处理可以得到③，在①→③的培养过程中，需向培养液中通入一定量的CO₂，其目的是                        　。

（4）在胚胎发育过程中，囊胚时期的　　          　　　细胞将发育成幼体的各种组织。

（5）③到⑥体现了                      。要实现⑥批量生产血清白蛋白，则要求①的性别是              。

附1：命题双向细目表

(1)过程②常用的发酵菌是________，在苹果酒的基础上制作苹果醋时，需要________(填“升高”、“降低”)温度，同时还需要适当________．

(2)该发酵菌种可以从食醋中分离获得．若用平板划线法分离该发酵菌，接种结束后，对接种环还要进行一次________灭菌，是为了________．

(3)对该发酵菌进行扩大培养时，将其接种到液体培养基中并混匀，然后分为甲乙两组．甲组进行静置培养，乙组进行振荡培养，结果发现________组培养的发酵菌生长速度快，原因是________、________．

2 近年来，有科学家把来自于动物体的精子注入到去掉DNA的卵细胞中，获得重组细胞，进一步培育出“孤雄单倍体胚胎”．

(1)该过程用到的技术手段主要有________、________．

(2)将重组细胞培育为胚胎的过程中，除必要的营养条件、适宜的pH和温度外，还需保证其处在________的环境下，同时提供一定量的O₂和CO₂，其中CO₂的主要作用是________．

(3)科学家发现成活的“孤雄单倍体胚胎”细胞中含有的性染色体均为X染色体，分析可能的原因是________．拿出任何一个“孤雄单倍体胚胎”细胞，都可当作精子使用，使卵细胞受精，并生下正常小鼠，可能的原因是________．

(4)有人认为这种“人造精子”的基因可以被加工，比如敲除或增加某个基因，这使得科学家能方便地制造出实验所需要的小鼠模型，该过程用到的工具酶主要有________、________．

I．下图是某工厂设计的桑果加工工艺流程，请回答

（1）为提高出汁率，过程b可使用果胶酶和          酶水解果胶；采用          技术则可以提高酶的利用率；过程c通常接种的菌种是            。

（2）果醋的制作需要醋化醋杆菌，将醋化醋杆菌的培养物加在酒水混合物中混匀，倒入发酵瓶前需调pH至             

  A．6.0    B.7.0    C.8.0    D.9.0

（3）桑果酒和桑果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，下列相关措施正确的是              

A．桑果汁要装满发酵瓶，造成无氧环境，有利于酒精发酵


B．桑果醋发酵过程中，需要用脱脂棉来过滤空气

C．桑果酒发酵过程中，每隔一段时间打开瓶盖一次，放出CO₂

D．桑果醋发酵过程中，要适时充气来调节发酵瓶中的pH

II．现代生物技术在农业生产、优良动物繁育、疾病诊治等方面展现出诱人的前景。请根据以下材料回答相关问题。

 材料一：经过一个世纪的发展，植物克隆技术解决了人类生存的关键问题（如粮食问题、花卉苗木生产等），为人类创造了巨大的财富。


（4）用植物花药进行离体培养时，要经过         、        过程才能培养成单倍体幼苗，在此过程需要适当配比的           进行诱导。

 材料二：中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入兔子的去核卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫繁殖研究再次走在世界前列。


（5）克隆大熊猫过程中使用的生物技术手段有          和           。

 （6）如果多个供体细胞来自同一只大熊猫，培育的这些大熊猫在性状上也不完全相同，分析其原因，下列错误的是            

 A．性状变异可由环境条件引起

 B．基因可能会发生突变


 C．受体细胞的细胞质基因不同

 D．细胞核基因发生了重组

（1） 由过程①获得的A为____________；过程①中需用到的酶有____________；过程①中，PCR扩增人凝血因子IX基因前需根据已知的一小段核苷酸序列合成出________。

（2） 利用A中的_________基因特性来筛选鉴定出含有人凝血因子IX基因的成纤维细胞。

（3） 进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生______________，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。

（1）基因工程中，A→B利用____________技术，依据的原理是__________，其中①为__________过程。

（2）B→C为转基因绵羊的培育过程，其中③用到的生物技术主要有动物早期胚胎培养和____________。

（3）B→D为抗虫棉的培育过程，其中④过程常用的方法是____________，要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体生物学水平上的鉴定过程：_____________________。

​

(1)蜘蛛丝基因能在山羊体内成功表达的原因是________，常用山羊胚胎干细胞作为受体细胞的原因是________。

(2)为提高胚胎的利用率，可对囊胚进行________获得二分胚；同时，可以通过取样________(“滋养层”、“内细胞团”)细胞进行DNA分析，用于选择雌性胚胎。将囊胚移人代孕山羊体内属于

________技术．此技术对代孕受体的要求是________。

(3)可将蜘蛛丝基因导入受精卵，使蜘蛛丝基因整合到山羊DNA中．为得到较多的受精卵，需用________处理供体雌羊。为鉴定蜘蛛丝基因是否成功表达，常用________技术进行检测。