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            • 1.

              人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:


              (1)htPA基因与载体用 切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用      技术。 

              (2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射 ,使其     。采集的精子需要经过 才具备受精能力。 

              (3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是     。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行 。在胚胎移植前,通过 技术可获得较多胚胎,这体现了早期胚胎细胞的 。 

              (4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到 ,说明目的基因成功表达。 

            • 2. 毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关.获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图.

              (1)过程①中最常用的运载工具是 ______ ,所需要的酶是限制酶和 ______
              (2)在过程②中,用 ______ 处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞.在培养过程中,将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中,CO2的作用是 ______
              (3)在过成③中,用 ______ 处理以获取更多的卵(母)细胞.成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行 ______ 处理.
              (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 ______ .在胚胎移植前,通过 ______ 技术可获得较多胚胎.
            • 3. 人的血清白蛋白(HSA)有许多作用,如对血液中的免疫球蛋白(抗体)有保护和稳定的作用.如果免疫球蛋白缺少了这种保护,免疫力就会变得不稳定,容易引起各种疾病,所以在临床上需求量很大.白蛋白通常从人血中提取,产量受到限制.如果应用基因工程、克隆等技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能.如图是利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的图解,请根据图解回答下列问题:
              (1)图中①一般经 ______ 处理可以得到③.将②导入③最为有效的方法是 ______
              导入前,需要将②与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,这一步骤是基因工程的核心,称为 ______
              (2)通过核移植技术能够得到胚胎④,精、卵在体外受精时也能得到早期胚胎.在体外受精过程中防止多精入卵的生理反应主要包括 ______ 反应和 ______ 作用.
              (3)若需要迅速得到大量转基因奶牛,可采用下列处理方法:将早期胚胎④处理后形成若干个胚胎⑤,此种方法称 ______ .进行上述操作时,应选择发育至 ______ 或囊胚阶段的胚胎进行操作,对后者操作时必须注意将 ______
            • 4. 其生长速度快、肉质好等优点被称为“钻石级”肉用绵羊.科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下:分别从优质雌、雄杜泊羊体内获取精子和卵细胞体外受精早期胚胎培养胚胎分割胚胎移植多头杜泊羊.下列相关叙述不正确的是(    )
              A.从卵巢中采集的卵母细胞一般需培养至减数第二次分裂中期才可进行体外受精
              B.为了保证胚胎移植成功,需要对代孕母绵羊进行同期发情处理
              C.为避免代孕绵羊对植入胚胎产生排斥反应,应注射免疫抑制剂
              D.为了进一步扩大繁殖规模,可通过胚胎分割技术获得同卵双胎
            • 5. 随着生物科学技术的发展,动物、植物乃至人类自身的生殖方式变得越来越多样化.既解决了一些社会的需求,也带来了一些社会的忧虑.请根据下列各种情况,回答有关问题:
              (1)试管婴儿技术:解决了部分夫妻不育的难题或生育健康后代的要求.这种技术和母亲正常怀孕生产过程的相同之处是都是以 为发育起点,不同之处在于试管婴儿是在体外进行受精后,在试管中进行胚胎培养;最后选取健康的胚胎进行 ,保证生出健康的孩子.
              (2)胚胎分割技术:可解决良种动物快速大量繁殖的问题;对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意  , 否则将影响分割后的胚胎的恢复和进一步发育,如需做性别鉴定,还需从 细胞取样做DNA分析.
              (3)植物体细胞杂交技术:可以用来培育一些种间亲缘关系较近的杂交种,如白菜﹣甘蓝,实质上是利用了 两大关键技术来实现.
              (4)利用基因工程培育转基因植物:如将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞中,可培育转基因高赖氨酸玉米.选用的表达载体可以是农杆菌的Ti质粒,是因为该质粒的T﹣DNA能 ;除农杆菌转化法外,还有基因枪法、 法等.
            • 6. 下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述,正确的是(    )
              A.卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加
              B.胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割
              C.胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点
              D.胚胎干细胞是一类未分化细胞,可从早期胚胎中分离获取
            • 7. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础,如图所示,abc表示现代工程技术,①②③分别表示其结果,下列说法正确的是(    )
              A.若a是体细胞核移植技术,则①反映了动物体细胞也具有全能性
              B.若c是胚胎分割技术,则③中个体的基因型和表现型一定相同
              C.若b是体外受精技术,则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能
              D.①②③中作为受体的动物品种是珍惜的或存量少的雌性动物
            • 8. 克隆羊、试管婴儿和胚胎分割获得的良种牛三者均属于生物工程技术的杰出成果,下列叙述正确的是(    )
              A.都属于无性生殖,能保持母本性状
              B.三者都用到胚胎移植技术
              C.都充分体现了体细胞的全能性
              D.都不会发生基因重组
            • 9. (14分)

              Ⅰ.转基因克隆猪已在我国培育成功。研究组首先从猪胚胎皮肤细胞中分离出纤维细胞,进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞,经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆,再将重组胚胎移入代孕母猪子宫内,最终获得转基因克隆猪。请回答:

              (1) 在对猪纤维细胞进行培养时,需要在细胞培养液中添加一定量的           ,以防止培养过程的污染。此外,应定期更换培养液,防止              对细胞自身造成危害。

              (2) 筛选转基因细胞时,需要用到基因表达载体中的               

              (3) 在进行体细胞克隆前,先要从屠宰场收集猪卵巢,采集             ,并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞核注入           中,再经过一系列过程获得含有目的基因的重组胚胎。

              (4) 为了提高重组胚胎的利用率,可对处于           阶段的胚胎进行均等分割,再将重组胚胎移入代孕母猪子宫中继续发育成转基因克隆猪。一般地,代孕母猪需要用激素处理,促使其           以利于受孕。

              Ⅱ.土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验,请回答:

              (1) 分离培养细菌时必须进行无菌操作,包括培养基和各种器皿都必须是无菌的,常用的灭菌方法有              (至少答2种)。

              (2) 可用                法分离纯化得到能降解尿素的菌种。在接种活菌的过程中,要在          旁进行操作,接种后的培养皿            于37℃的            中培养。

              (3) 用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,若培养基中存在分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素被分解产生的            使PH升高,使酚红指示剂产生颜色变化,从而证明这一菌株以尿素为氮源。变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力                

            • 10. 你听说过蜘蛛山羊吗?蜘蛛山羊奇特之处在于,它的体内含有蜘蛛的基因。这样,雌性山羊所产的羊奶中也就含有一种独特的蛛丝蛋白。利用这种蛛丝蛋白所制造的蛛丝纤维据说比凯夫拉尔纤维更耐用,比尼龙更具伸缩性,比钢丝强度更强。

              (1)蜘蛛丝基因能在山羊体内成功表达的原因是________,常用山羊胚胎干细胞作为受体细胞的原因是________。

              (2)为提高胚胎的利用率,可对囊胚进行________获得二分胚;同时,可以通过取样________(“滋养层”、“内细胞团”)细胞进行DNA分析,用于选择雌性胚胎。将囊胚移人代孕山羊体内属于

              ________技术.此技术对代孕受体的要求是________。

              (3)可将蜘蛛丝基因导入受精卵,使蜘蛛丝基因整合到山羊DNA中.为得到较多的受精卵,需用________处理供体雌羊。为鉴定蜘蛛丝基因是否成功表达,常用________技术进行检测。

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