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            • 1. 毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关.获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图.

              (1)过程①中最常用的运载工具是 ______ ,所需要的酶是限制酶和 ______
              (2)在过程②中,用 ______ 处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞.在培养过程中,将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中,CO2的作用是 ______
              (3)在过成③中,用 ______ 处理以获取更多的卵(母)细胞.成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行 ______ 处理.
              (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 ______ .在胚胎移植前,通过 ______ 技术可获得较多胚胎.
            • 2. 人的血清白蛋白(HSA)有许多作用,如对血液中的免疫球蛋白(抗体)有保护和稳定的作用.如果免疫球蛋白缺少了这种保护,免疫力就会变得不稳定,容易引起各种疾病,所以在临床上需求量很大.白蛋白通常从人血中提取,产量受到限制.如果应用基因工程、克隆等技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能.如图是利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的图解,请根据图解回答下列问题:
              (1)图中①一般经 ______ 处理可以得到③.将②导入③最为有效的方法是 ______
              导入前,需要将②与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,这一步骤是基因工程的核心,称为 ______
              (2)通过核移植技术能够得到胚胎④,精、卵在体外受精时也能得到早期胚胎.在体外受精过程中防止多精入卵的生理反应主要包括 ______ 反应和 ______ 作用.
              (3)若需要迅速得到大量转基因奶牛,可采用下列处理方法:将早期胚胎④处理后形成若干个胚胎⑤,此种方法称 ______ .进行上述操作时,应选择发育至 ______ 或囊胚阶段的胚胎进行操作,对后者操作时必须注意将 ______
            • 3. 如图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图同答:

              (1)分析可知,科学家获取绿色荧光蛋白基因所运用的限制酶是图中所示的 ______ ,最终获得的绿色荧光蛋白基因的末端类型属于 ______
              (2)图示工程中,将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程③称为 ______ ,常用的方法是 ______
              (3)图示中,作为受体细胞的去核卵母细胞一般处在 ______ 期,常通过 ______ (物理方法)进行激活,使其完成减数分裂和发育进程.
              (4)培养图示重组细胞时,将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为 ______ 培养基.通常在培养基中还需要加入适量的 ______ 等天然成分.
              (5)图示重组细胞培养至一定阶段可通过 ______ 方法,从而一次获得多个转基因猪.过程⑧的实质是 ______
            • 4. 随着我国奶牛养殖业的蓬勃发展,胚胎工程的应用日益广泛.胚胎工程的许多技术,实际是在体外条件下,对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作.回答下列相关问题:
              (1)在胚胎移植的基本程序中,首先要对供、受体母牛进行选择,供体牛要选择 ______ 性能和 ______ 性能优秀的个体,受体牛要选择有健康的体质和正常 ______ 能力的个体.
              (2)对供、受体母牛用激素进行 ______ 处理,而后还要对供体母牛注射促性腺激素,做 ______ 处理.
              (3)胚胎移植应在胚胎发育到 ______ 阶段进行,被移植的胚胎之所以能够在受体母牛的子宫内存活,是因为受体母牛的子宫对外来胚胎基本上不发生 ______
              (4)若要获得同卵双胎或多胎的个体,则应采用 ______ 技术和 ______ 技术,后者也是胚胎工程的最后一道“工序”.
              (5)受体母牛产下犊牛,犊牛的遗传物质来源于供体母牛的比例应 ______ (填“大于”、“小于”、“等于”).
            • 5. 如图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程.请回答下列问题:

              (1)A细胞是 ______ ,在进行体外受精前要对精子进行 ______ 处理.
              (2)进行胚胎分割时,应选择发育到 ______ 时期的胚进行操作.
              (3)②指的是 ______
              (4)通过胚胎分割产生的两个或多个个体共有的根本特点是 ______
              (5)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,应注意 ______
              (6)受体母牛必须和供体牛属于 ______ .移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 ______
            • 6.
              随着我国奶牛养殖业的蓬勃发展,胚胎工程的应用日益广泛.胚胎工程的许多技术,实际是在体外条件下,对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作.回答下列相关问题:
              (1)在胚胎移植的基本程序中,首先要对供、受体母牛进行选择,供体牛要选择 ______ 性能和 ______ 性能优秀的个体,受体牛要选择有健康的体质和正常 ______ 能力的个体.
              (2)对供、受体母牛用激素进行 ______ 处理,而后还要对供体母牛注射促性腺激素,做 ______ 处理.
              (3)胚胎移植应在胚胎发育到 ______ 阶段进行,被移植的胚胎之所以能够在受体母牛的子宫内存活,是因为受体母牛的子宫对外来胚胎基本上不发生 ______ .
              (4)若要获得同卵双胎或多胎的个体,则应采用 ______ 技术和 ______ 技术,后者也是胚胎工程的最后一道“工序”.
              (5)受体母牛产下犊牛,犊牛的遗传物质来源于供体母牛的比例应 ______ (填“大于”、“小于”、“等于”).
            • 7.
              如图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图同答:

              (1)分析可知,科学家获取绿色荧光蛋白基因所运用的限制酶是图中所示的 ______ ,最终获得的绿色荧光蛋白基因的末端类型属于 ______ .
              (2)图示工程中,将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程③称为 ______ ,常用的方法是 ______ .
              (3)图示中,作为受体细胞的去核卵母细胞一般处在 ______ 期,常通过 ______ (物理方法)进行激活,使其完成减数分裂和发育进程.
              (4)培养图示重组细胞时,将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为 ______ 培养基.通常在培养基中还需要加入适量的 ______ 等天然成分.
              (5)图示重组细胞培养至一定阶段可通过 ______ 方法,从而一次获得多个转基因猪.过程⑧的实质是 ______ .
            • 8.
              毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关.获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图.

              (1)过程①中最常用的运载工具是 ______ ,所需要的酶是限制酶和 ______ .
              (2)在过程②中,用 ______ 处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞.在培养过程中,将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中,CO2的作用是 ______ .
              (3)在过成③中,用 ______ 处理以获取更多的卵(母)细胞.成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行 ______ 处理.
              (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 ______ .在胚胎移植前,通过 ______ 技术可获得较多胚胎.
            • 9.
              如图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程.请回答下列问题:

              (1)A细胞是 ______ ,在进行体外受精前要对精子进行 ______ 处理.
              (2)进行胚胎分割时,应选择发育到 ______ 时期的胚进行操作.
              (3)②指的是 ______ .
              (4)通过胚胎分割产生的两个或多个个体共有的根本特点是 ______ .
              (5)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,应注意 ______ .
              (6)受体母牛必须和供体牛属于 ______ .移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 ______ .
            • 10. (14分)

              Ⅰ.转基因克隆猪已在我国培育成功。研究组首先从猪胚胎皮肤细胞中分离出纤维细胞,进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞,经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆,再将重组胚胎移入代孕母猪子宫内,最终获得转基因克隆猪。请回答:

              (1) 在对猪纤维细胞进行培养时,需要在细胞培养液中添加一定量的           ,以防止培养过程的污染。此外,应定期更换培养液,防止              对细胞自身造成危害。

              (2) 筛选转基因细胞时,需要用到基因表达载体中的               

              (3) 在进行体细胞克隆前,先要从屠宰场收集猪卵巢,采集             ,并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞核注入           中,再经过一系列过程获得含有目的基因的重组胚胎。

              (4) 为了提高重组胚胎的利用率,可对处于           阶段的胚胎进行均等分割,再将重组胚胎移入代孕母猪子宫中继续发育成转基因克隆猪。一般地,代孕母猪需要用激素处理,促使其           以利于受孕。

              Ⅱ.土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验,请回答:

              (1) 分离培养细菌时必须进行无菌操作,包括培养基和各种器皿都必须是无菌的,常用的灭菌方法有              (至少答2种)。

              (2) 可用                法分离纯化得到能降解尿素的菌种。在接种活菌的过程中,要在          旁进行操作,接种后的培养皿            于37℃的            中培养。

              (3) 用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,若培养基中存在分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素被分解产生的            使PH升高,使酚红指示剂产生颜色变化,从而证明这一菌株以尿素为氮源。变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力                

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