胚胎工程技术包含的内容很丰富，下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题：

(1)应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于__________，细胞B的名称是___________。

(2)应用2中牛完成体内受精的场所是_________，此时卵子需要达到________期，才具备与精子受精的能力。

(3)获得更多基因型完全相同的牛，可采用图中的应用______（填数字）的培养技术。

(4)胚胎干细胞可以从细胞C__________或细胞D__________中分离出来。相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是____________的结果。

人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛，以便通过乳腺生物反应器生产HSA，其主要技术流程如下图所示。回答下列问题：

(1)如上图所示，将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中，该技术称为_______________技术；供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是____________________________________________________。

(2)胚胎移植时，为使代孕母牛能处于适合的生理状态，需要用激素对其进行_______处理。

(3)SRY～PCR法性别鉴定的基本程序是：提取牛胎儿成纤维细胞的DNA，经PCR反应体系扩增SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段，然后对扩增产物进行检测。

①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外，还应含有______________；其中，dNTP的作用是___________________，引物应选用下图中的_________(填图中标号)。

②若扩增产物含大量SRY基因片段，则该种牛胎儿成纤维细胞________(选填“能”或“不能”)用作技术流程中转化过程的受体细胞。

(4)从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是_______________。

    (一)要获得遗传特性单一的大肠杆菌菌种，一般必须对原有的大肠杆菌菌种进行扩大培养、并利用纯化技术得到单菌落的菌种。请回答下列有关大肠杆菌的培养和分离实验的相关问题：

    (1)对买回来的大肠杆菌菌种进行扩大培养，一般用LB培养基，在培养基中为微生物提供碳源、氮源和能源的物质主要是__________，为调节渗透压，要加入一定量的___________。为进行大肠杆菌的分离，还要加入琼脂配制成固体培养基，并进行倒平板的操作。

    (2)获得纯净微生物培养物的关键是_____________________，为此，必须对培养器皿、接种用具和培养基进行严格灭菌。培养器皿和培养基一般采用_____________________法灭菌，接种环采用灼烧法灭菌。同时在接种或倒平板操作时，除了在超净台上进行操作并对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外，还必须_________________________，以防止空气中的杂菌污染。

    (3)大肠杆菌菌种的扩大培养一般采用液体培养基，接种后将培养基置于37℃摇床振荡条件下培养12小时。菌种的分离时一般在固体培养基上采用____________法，并将培养皿_______________状态。

    (二)科学家将蜘蛛的蛛丝基因导入山羊体内，创造出转基因山羊，使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白。生产原理如下图。请回答：

    (1)将蛛丝蛋白基因和质粒通过甲过程形成的X物质为_____________。如果选取的受体细胞为体细胞，当在培养过程中出现接触抑制现象时，需要进行____________培养。要使重组细胞具有发育的全能性，乙过程需要的技术操作是____________。

    (2)下列关于丙过程的叙述，正确的是______。

    A．该过程为动物细胞培养，目的是获得更多的重组细胞

    B．该过程所用培养液的成分往往是相同的

    C．该过程在无菌条件下进行，需要提供CO₂来调节pH

    D．通过现代生物技术可以将重组细胞在体外培养成山羊个体

    (3)为了快速繁殖转基因山羊，还可在丁过程前对早期胚胎进行____________，经培养后再分别移植到____________________的代孕母羊的相应部位。

【加试题】回答下列（一）（二）小题

（一）随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力强的微生物，人们不断地进行研究。下图为获取能分离出分解石油烃的微生物的土壤样品后的研究过程，请回答有关问题：

（1）获取土壤样品的取样地点最好选在  。为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①④所用的选择培养基只能以石油烃作为唯一碳源,其原因是  。

（2）根据⑤平板上生长的菌落，对④进行接种采用的方法是  ，若发现在⑤中无法区分菌落，可以将图中③取出的菌液    。

（3）纯化菌株时,通常使用的划线工具是  。采用  方法对其进行灭菌。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是  （写出一点即可）。

（二）毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

（2）在过程②中，用  酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，叫细胞克隆。未经克隆化的细胞系具有  性。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的  ，在培养过程中应将培养瓶置于  培养。

（3）若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行  后进行胚胎移植。

（4）下列有关转基因山羊培育过程的叙述，错误的是  。

A.图中重组细胞的细胞核来自导入目的基因的细胞

B.重组细胞最初分裂时开始进行DNA复制和基因的转录

C.将早期胚胎（如早期囊胚）植入到代孕母羊的输卵管或子宫角部位

D.如果KIFⅡ基因的序列是已知的，则可用化学方法合成或用聚合酶链式反应扩增该基因

蜘蛛丝纤维在国防、军事（防弹衣）、建筑等领域具有广阔应用前景。科学家利用基因工程培育出了乳汁内含有蜘蛛丝蛋白的羊，简称“蜘蛛羊”。请回答以下问题：

⑴从蜘蛛体内获得的蛛丝蛋白基因，可利用               技术进行体外扩增，进而为实验获得足够的目的基因。得到的目的基因应                       等调控组件组在一起，然后与载体构建成基因表达载体，再通过显微注射法，将表达载体导入羊的                ，获得重组细胞。

⑵将获得的重组细胞在添加               这种天然成分的培养基中培养至早期胚胎，移植到经过                    处理的受体母羊的子宫内。若一次产生两头转基因“蜘蛛羊”，可将早期胚胎进行                   处理。

⑶若所得的“蜘蛛羊”（已知表达载体已进入细胞）乳汁中没有检测到蛛丝蛋白。科学家为判断问题所在，应该用                      技术，先检测蛛丝蛋白基因是否整合到染色体上，若已确定此步成功，则应该继续检测                                  。

(1)在图1中注射到小鼠体内的物质是________。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，此类细胞的特点是________。该过程所用的生物技术有_______________。

(2)图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和________的过程，才能使卵细胞受精。若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2中囊胚中的__________均等分割后进行胚胎移植。以上技术是在__________(填“体内”或“体外”)完成的。

(3)图3中过程①是植物细胞形成_______的阶段，该阶段所用的酶是_______。在形成再生植株的过程中与组织培养有相似之处的步骤是__________。

请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题：

（1）某动物排卵时，减数第一次分裂尚未完成，此时卵子处于初级卵母细胞阶段，当该细胞发育至减数第二次分裂_______期时，才具备受精能力。若在卵黄膜和透明带之间看到两个极体，则表明_________过程已完成。 

（2）动物的早期胚胎移植到同种且_______与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个 体的技术叫做胚胎移植。为了获得更多的早期胚胎，常用________激素对供体进行处理，其目的是获得更多的卵母细胞，经人工受精后可得到早期胚胎。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜_____________。

（3）若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到桑葚期或囊胚 期阶段的早期胚胎进行____________处理，再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于________________条件下。