治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下：

（1）过程①采用的是细胞工程中的__________技术，过程②采用的是胚胎工程中的_____技术。

（4）胚胎干细胞可以来自于囊胚中的___________。在一定条件下，胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体_____（填“A”或“B”），则不会发生免疫排斥反应。

为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示回答下列问题。

(3)在受精的过程中，精子入卵后会立即发生一种反应叫_______反应，以防止多精入卵受精。判断卵子是否受精的标志通常是______________________。

(4)要培育高产奶率的转基因牛，如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，科学家要将___________和乳腺蛋白基因的启动子、终止子重组在一起，通过显微注射等方法导入牛的受精卵中。受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。

(5)“试管牛”的形成用到的生物技术有____ (填序号)

①早期胚胎培养   ②体外受精   ③胚胎移植   ④核移植

(6)早期胚胎中的胚胎干细胞，不仅可以应用于哺乳动物胚胎性别鉴定，还可应用于治疗人类的某些疾病，如老年痴呆症、糖尿病等； ES细胞体外诱导分化培育出人造组织器官用于_______、研究体外细胞分化等领域。 

    图3

（1）微载体的直径很小，其培养原理是将对细胞无害的颗粒——微载体加入到培养液中，使细胞在其表面____生长，而且操作中需要通过搅动使微载体始终保持悬浮状态，从而让细胞与培养液充分接触，这样细胞就可以在载体表面繁殖成 ______（“单层”、“多层”）细胞。

（2）培养罐中培养细胞时，要注意保持适宜的温度和pH，还需要提供细胞所需的营养、气体环境等，为维持培养液的pH，应在培养液中加入95%空气和___的混合气体。图3是某科研小组培养的细胞，由于培养用具灭菌不严格，结果出现曲线2的情况，为了避免这种情况通常可以在培养液中加入抗生素，其作用是______。

（3）在生产单克隆抗体的过程中，杂交瘤细胞在加入培养罐前，需筛选出符合条件的细胞群，还要对选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和_________方能加入培养罐培养。单克隆抗体作为诊断试剂，具有________________的优点。

（4）科研人员利用明胶微载体培养出了胚胎干细胞，并在培养液中加入______因子，成功构建了骨组织。

（5）在试管动物的培育中，涉及的关键技术是体外受精和___________的培养，再将这些胚胎进行移植，就可以实现良种动物的大量繁殖。移植中要求受体母牛要具有健康的体质和____________的能力。

Ⅰ．上世纪诞生的试管婴儿技术，解决了部分夫妇不育的问题，随着生物技术的发展，现代的试管婴儿技术还能解决部分肿瘤疾病、遗传性疾病的治疗等，实现优生优育。

（1）设计试管婴儿时，为了提高受孕率，胚胎移植时多采用多胚胎移植，因此需注射________，促进母亲排出更多的卵子。

（2）胚胎发育的卵裂期在________内进行。受精卵经72小时体外培养发育成32个细胞左右的胚胎，叫做________。为产生多胎，还可以采用_____________技术，但需要注意对内细胞团____________，否则______________________________。

（3）为了某些需要，需对胚胎的性别进行鉴定。目前最有效最准确的方法是SRY—PCR法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取出几个________（填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，与SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎性别为________。

Ⅱ．设计试管婴儿、克隆人等都是引起人们广泛争论的问题。我国不反对治疗性克隆，下图是治疗性克隆时获取病人胚胎干细胞的过程，请回答下列问题。

（4）图中细胞①是病人的体细胞（如皮肤细胞），细胞②往往是处于________期的卵母细胞，去除其细胞核时，可用微型吸管把位于______________之间的第一极体一并吸出。

（5）图示方法一和方法二都使用了去核卵母细胞，主要是因为_________________。两种方法得到的细胞③和④相当于________，处于⑤时期的胚胎叫________。

（6）将分离出的胚胎干细胞在形态上具有________的特点。其在________细胞上培养可维持不分化状态。

下图为绿色荧光小鼠制备流程图，Gfp是绿色荧光蛋白基因，请分析回答：

(1)构建表达载体需要的酶是_______，表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp、_      __、_______________、终止子和复制原点等。

(2)图中载体上的Neo基因是一种抗生素抗性基因，图中步骤③所用的G418是一种抗生素(对细胞有毒害作用)，添加G418的目的是________________________________。

(3)图中所用的胚胎干细胞来自于________________________。

(4)图中步骤⑤要将细胞注射入图中囊胚的____________位置，图中步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素进行_________________处理。

(5)可以使用_________________方法在蛋白质水平上鉴定小鼠是否存在绿色荧光蛋白。

下图表示利用胚胎干细胞(简称ES细胞)所做的一系列研究，请据图分析回答：

(1)上图中的胚胎干细胞(ES细胞)可以从________和________中分离获取。

(2)过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的________，加入抗生素是为了__________，这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。

(3)过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有____________的特点。

(4)过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须去除小鼠的胸腺，使其存在免疫缺陷，其目的是__________。该过程研究的意义在于解决___________问题。

(5)该研究中，包含的生物技术有___________(至少写出两种)。

下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解。请据图回答：

（1）细胞②是囊胚的_________________中分离得到的，在功能上具有_________________，对该细胞进行定向诱导分化，通常需要加入_________________，例如牛磺酸等。

（2）步骤④常用的方法是_________________，这一步骤的操作对象如果是植物细胞，我国科学家独创的一种方法是_________________。

（3）上述治疗方法在基因工程的水平上可以称为_________________。

Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如图：

下图表示利用胚胎干细胞(ES细胞)所作的一系列研究，请据图分析回答：

(1)上图中的胚胎干细胞（ES细胞）可以从         和         中分离获取

(2)过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的__________，加入抗生素是为了__________，这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。

(3)过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有________的特点。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是___________

(4)过程Ⅲ中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是___________，

(5)过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须用X射线照射去除胸腺的小鼠，获得免疫缺陷小鼠，其目的是___________。该过程研究的意义在于解决________