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            • 1. 如图为某转基因小鼠培育过程示意图,①~⑥表示相关过程.请回答:

              (1)过程①注射的A物质是 ______ ,目的是使供体母鼠 ______
              (2)过程③把目的基因和运载体连接需要在 ______  的催化下完成,过程④常用的方法是 ______
              (3)取自公鼠附睾中的精子需放入人工配置的 ______  中培养一段时间后,才可进行体外受精.
              (4)图中过程⑥称为 ______ ,为使代孕母鼠与供体母鼠生殖器官的生理变化相同,此前需对代孕母鼠作 ______  处理.
              (5)蛋白质水平检测目的基因的表达通常采用的方法是 ______ .采用胚胎分割移植的方法可获得较多基因组成相同的转基因小鼠,操作时需选择发育到 ______
              或囊胚期的胚胎进行.若选用囊胚期的胚胎,操作过程需要特别注意是 ______
              (6)若通过上述操作获得的蛋白质,不完全符合人类的需要,则需要通过 ______ 或基因合成,对现有蛋白质进行改造.
            • 2. 如图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题:

              (1)图中cDNA文库 ______ 基因组文库(填“大于”、“等于”或者“小于”).
              (2)①过程提取的DNA需要 ______ 的切割,B过程是 ______
              (3)为在短时间内大量获得目的基因,可用 ______ 扩增的方法,其原理是 ______
              (4)农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA具有 ______ 的特点.目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是 ______ ,可以用 ______ 技术进行检测.
              (5)如果要想使该酶活性更强或具有更强的耐受性,需要对现有蛋白质进行改造,这要通过基因工程延伸--蛋白质工程.首先要设计预期的 ______ ,再推测应有的氨基酸序列,找到相对应的 ______
            • 3. (1)下列有关现代生物技术的有关叙述正确的是 ______
              A.基因工程与蛋白质工程都能制造出新的蛋白质
              B.动物细胞培养时不一定需要添加血清
              C.动物的早期胚胎发育依次经过受精卵、卵裂、桑椹胚、孵化、囊胚、原肠胚等阶段
              D.DNA连接酶和DNA聚合酶都能使核苷酸之间形成磷酸二酯键,属于同一种酶
              (2)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤,其中的核心步骤是 ______ ;PCR技术扩增目的基因是基因工程中常用的技术手段,这一技术的原理是 ______
              (3)植物组织培养的主要原理是植物细胞具有 ______ ,具体过程是在 ______ 和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上,给予适宜的条件,诱导其经过 ______ 产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株.
              (4)克隆动物实际上是用 ______ 方法得到的动物,也就是将一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的 ______ 细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,最终发育为动物个体.
              (5)生态工程是实现循环经济最重要的手段之一,请写出它遵循的基本原理(至少答两项): ______
            • 4. 毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关.获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图.

              (1)过程①中最常用的运载工具是 ______ ,所需要的酶是限制酶和 ______
              (2)在过程②中,用 ______ 处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞.在培养过程中,将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中,CO2的作用是 ______
              (3)在过成③中,用 ______ 处理以获取更多的卵(母)细胞.成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行 ______ 处理.
              (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 ______ .在胚胎移植前,通过 ______ 技术可获得较多胚胎.
            • 5. 人的血清白蛋白(HSA)有许多作用,如对血液中的免疫球蛋白(抗体)有保护和稳定的作用.如果免疫球蛋白缺少了这种保护,免疫力就会变得不稳定,容易引起各种疾病,所以在临床上需求量很大.白蛋白通常从人血中提取,产量受到限制.如果应用基因工程、克隆等技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能.如图是利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的图解,请根据图解回答下列问题:
              (1)图中①一般经 ______ 处理可以得到③.将②导入③最为有效的方法是 ______
              导入前,需要将②与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,这一步骤是基因工程的核心,称为 ______
              (2)通过核移植技术能够得到胚胎④,精、卵在体外受精时也能得到早期胚胎.在体外受精过程中防止多精入卵的生理反应主要包括 ______ 反应和 ______ 作用.
              (3)若需要迅速得到大量转基因奶牛,可采用下列处理方法:将早期胚胎④处理后形成若干个胚胎⑤,此种方法称 ______ .进行上述操作时,应选择发育至 ______ 或囊胚阶段的胚胎进行操作,对后者操作时必须注意将 ______
            • 6. 如图为利用生物技术获得生物新品种的过程.据图回答:

              (1)A→B必需的工具酶有 ______
              (2)在基因工程中,B表示 ______
              (3)B→C为转基因绵羊的培育过程,其中④用到生物技术主要有 ______
              (4)若使用棉花的体细胞为受体细胞,⑤表示的生物技术是 ______ .请简述利用棉花受体细胞培育成转基因抗虫棉幼苗的过程: ______
              (5)要确定目的基因(抗虫基因)是否导入受体细胞,检测的方法是 ______ .目的基因(抗虫基因)是否能稳定遗传并表达,在个体水平上通过 ______ 进行检测和鉴定.
              (6)转基因工程改良动植物的品种,最突出的优点是 ______
            • 7.

              一种重症联合免疫缺陷病(简称SCID),这种患者缺乏正常的人体免疫功能,只要稍被细菌或病毒感染,就会发病死亡。经研究证实,SCID病人细胞的一个常染色体上编码腺苷酸脱氨酶(简称ADA)的基因ADA发生了突变。目前,人们已经找到了治疗该疾病的方案。如下图:

              (1)运载体必须具备的条件是(    )

              a.能在宿主细胞中复制并保存     b.具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接

              c.具有标记基因,便于进行筛选      d.是环状形态的DNA分子

               (2)在此图过程中用到的基因操作工具分别是                                

               (3)研究人员将ADA注入淋巴细胞,而不是其他细胞,其原因是什么?

               (4)图中的治疗方法是_______(体内或体外)基因治疗法,这是___________生物技术的应用。请列举除了在医学领域,该生物技术在其他领域的一些成就。                

               (5)可用SCID病人的血液来作为实验“DNA粗提取”的实验材料吗?为什么?

            • 8. 生物学家通过转基因体细胞克隆技术获得转基因牛,以便通过乳房生物反应器生产人的血清蛋白.请回答下列问题:
              (1)请完善主要步骤:从人的 ______ 获得目的基因;构建含目的基因的表达载体;然后把基因表达载体导入牛的受精卵,目前最有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法是 ______
              (2)目的基因的检测与鉴定分三个层次.若要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因及目的基因是否转录出了mRNA,检测方法是 ______ ,若要检测目的基因是否翻译成蛋白质,检测方法是 ______
            • 9. 拟南芥某突变体可用于验证相关基因的功能.野生型拟南芥的种皮为深褐色(TT),某突变体的种皮为黄色(tt).如图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因(Tn)功能的流程示意图.请据图回答下列问题:

              (1)图中①为 ______ ,形成过程中需要 ______ 酶;Tn基因能够和质粒连接成①的主要原因是 ______
              (2)拟南芥t基因的mRNA的末端序列为“-AGCGCGACCUGACUCUAA-”,而油菜Tn基因的mRNA与其相比,只有末端序列中的UGA变为AGA,则Tn比t多编码 ______ 个氨基酸(起始密码子位置相同,UGA、UAA为终止密码子).油菜Tn基因能在油菜突变体中表达的原因是 ______
              (3)若②不能在含抗生素Kan的培养基上生长,则原因是 ______ .若转基因拟南芥的种皮颜色为 ______ ,则说明油菜Tn基因与拟南芥T基因的功能可能相同.
              (4)采用PCR技术扩增目的基因时,需在PCR反应体系加入引物等物质,若共用了引物30个,则目的基因扩增了 ______ 代.
            • 10.
              某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:

              材料处理:称取新鲜的菜花、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于20 ℃,另一组置于-20 ℃条件下保存24 h。

              DNA粗提取:

              第一步,将上述材料分别放入研钵中,各加入15 mL 研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。

              第二步,先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地沿一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。

              第三步,取6支试管,分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物。

              DNA检测:在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂,混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液颜色的深浅,结果如下表。

              材料保存温度

              菜花

              辣椒

              蒜黄

              20 ℃

              ++

              +

              +++

              -20 ℃

              +++

              ++

              ++++

              注:“+”越多表示蓝色越深。

              分析上述实验过程,回答下列问题。

              (1)该探究性实验课题的名称是                                          。 

              (2)第二步中“缓缓地”搅拌,这是为了减少     。 

              (3)根据实验结果,得出结论并分析。

              ①结论1:与20 ℃相比,相同实验材料在-20 ℃条件下保存,DNA的提取量较多。

              结论2:                                                          

              ②针对结论1,请提出合理的解释:                                    

              (4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度,依据氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是:                           。然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。 

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