为了调查某学校附近河流的水质状况，该学校生物兴趣小组测定了河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：

（1）如图，该小组采用的是_______________分离水样中的细菌。操作时，接种环通过_________灭菌，在第二次及以后的操作时，总是从上一次的末端开始，这样做的目的是____________________________________。

（2）该实验组将接种好的培养皿在恒温箱中培养时倒置，其目的是_________________________；在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为 __________________。

（3）根据培养皿上菌落的平均数可以计算河水中该细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是_____________________________________。除了上述的活菌计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：________________

（每空1分，共7分）某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的部分步骤如下图所示。请回答下列问题：

（1）培养基中的化合物A能为目的菌的生长繁殖提供________，筛选过程中所用的培养基的常用灭菌方法是________。

（2）实验中“重复多次”的目的是________，为了达到分离纯化目的菌的目的，在固体培养基上接种的方法可以是________。

（3）实验过程中振荡培养，“振荡”的目的是________。

（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌后才能倒掉，目的是________。

（5）某同学计划统计污水池中“目的菌”的数目，需要设计________作为对照组，此对照组的目的是证明培养基是否被污染。

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37, 据此可得出每升水样中的活菌数为___________。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过___________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是_____________________________________________________。

（3）示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

 （4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。

乳酸菌是一种厌氧型细菌，实验室常利用溶钙圈法对乳酸菌进行筛选，其原理是乳酸菌产生的酸性物质和CaCO₃反应而出现溶解圈，以下为乳酸菌筛选的步骤：

①制备乳酸菌筛选培养基（MRS培养基）（成分：蛋白胨、牛肉膏、无机盐、葡萄糖和水）

②调节pH，并将MRS培养基和CaCO₃溶液灭菌后混合，倒平板制备培养基。

③梯度稀释样品，选择合适的稀释倍数接种。

④挑选产生溶钙圈的菌落。

请回答下列问题：

（1）乳酸菌常用于制作泡菜，用于制作泡菜的泡菜坛要在坛盖边沿的水槽中注满水，其目的是___________，制作过程中亚硝酸盐含量的变化是______。

（2）MRS培养基中蛋白胨可以作为乳酸菌的____________，CaCO₃一方面可以用于鉴别乳酸菌，另一方面还可以________。对培养基一般采用________________法灭菌。

（3）乳酸菌筛选过程中所用的接种方法是_________。若要进一步纯化乳酸菌，可以采取的措施是________________。

在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。实验基本步骤如下：
―→―→―→
请回答下列有关问题：
(1)配制培养基时，各成分含量确定的原则是________                                   ________________。不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是__________________________________。
(2)倒平板的适宜温度是50℃左右，原因是_______________________________。待平板冷凝后，要将平板倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止________________________。
(3)纯化菌株时，若使用稀释涂布平板法进行接种，应选择的涂布工具是图中的________；若使用平板划线法进行接种，应选择的接种工具是图中的________。

(4)划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________________________________________。
(5)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

下列相应的操作流程中，不正确的是：

（一）酵母菌是日常生产和生活中应用极其广泛的一种微生物。下图是有关酵母菌的实验操作。请据图回答：

(1)实验中试管用滤膜（封口膜）封住，其目的是___________________________，A和C过程所采用的接种方法分别是______________和______________。

(2)为了扩增酵母菌，可将经D过程接种后的三角瓶置于______培养一段时间，若要测定三角瓶中酵母菌的细胞数，可借助显微镜和血细胞计数板进行计数，下列操作不正确的是____（A.压在方格线上的细胞只计左线和上线上的酵母菌数  B.用滴管取1滴培养液到血细胞计数板的方格区，盖上盖玻片进行计数 

C.如果酵母菌有芽体，因为没有分离成两个子体，要以一个计数 D.计数方格内酵母菌总数应不少于300个）。

(3)G过程利用酵母菌进行果酒制作，为适当提高果酒的生产速率，进气口应____________，制作好的果酒，还可继续生产果醋，用果酒制作果醋的原理是__________________________（写化学反应式）。

（二）玉米自交系（遗传稳定的育种材料）A具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需进行一系列试验。部分试验如图所示。

（1）为防止酶切产物自身环化，构建重组DNA分子需用2种限制性核酸内切酶，选择的原则是____。

①Ti质粒内，每种限制性核酸内切酶只有一个切割位点

②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

③酶切后，G基因形成的两个粘性末端序列不相同

④酶切后，Ti质粒形成的两个粘性末端序列相同

A．①③         B．①④        C．②③       D．②④

（2）下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的激素是__________，自交系_____的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体，用愈伤组织做受体细胞是因为其细胞表达___________的能力强，图示目的基因导入受体细胞的方法是_____________。

（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织，需使用含________的选择培养基。

（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K处理后出现蓝色的愈伤组织可能是无农杆菌附着的转化愈伤组织或________________________。