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            • 1. 微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节。图示为大肠杆菌分离和培养过程中部分操作示意图。请分析回答下列问题。

              (1)实验过程中对培养基、培养皿和实验操作者的双手所采用的灭菌或消毒方法依次是___________、___________、___________。

              (2)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是___________。

              (3)图示是利用____________法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线的原因是____________。

              (4)关于图示的操作方法和结果正确的是___________

              A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌  

              B.划线操作须在火焰上进行

              C.在5区域中才可以得到所需菌落    

              D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌

            • 2.

              酸菜,古称菹,《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答:


              (1)酸菜制作起主要作用的微生物是_____________。但是在发酵初期,很多杂菌会大量繁殖,其中导致泡菜水的表面长白膜且容易产生酒味的微生物是___________。
              (2)本实验所用的培养基都需经_________________法进行灭菌。

              (3)在实验室中可采用下图所示的________法进行菌种纯化,在下图中 ______(填图中序号)区域更易获得单菌落.




              (4)市场上购买的真空包装酸菜,在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象,A同学怀疑是杂菌污染导致的,B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的,说出你支持谁的观点并说出理由。支持___________,理由是_________________________________。 
            • 3.

              酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素,以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题:

              (1) 从土壤中筛选酸性脲酶生产菌,其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等,从功能上分析,该培养基属于________培养基。该培养基的氮源来自_________。

              (2) 筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是___________和_____________。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时,需用移液管将lmL菌液移入盛有____mL蒸馏水的试管中。

              (3) 对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液,分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数,若不存在实验误操作,则前者的数量___(多于/等于/小于)后者,其原因是________。

              (4) 若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时,应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。下表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况,从表中看出,海藻酸钠的浓度应选用__g/dL。若利用固定化酶技术,它的优点是___________________。

              海藻酸钠质量浓度(g/dL)

              凝胶强度

              凝胶气泡量

              成球难度

              凝珠形状

              1.0

              没有

              较易

              扁圆形

              2.0

              少量

              圆球形

              3.0

              较多

              稍难

              有托尾

              4.0

              大量

              难成球形

            • 4.

              为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:


              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是________________________;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。

              (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过_________灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是__________。

              (3)示意图A和B中,_________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。 

              (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液的__________________的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触。

            • 5. 为了检测抗生素作用,需要做细菌耐药实验。
              (1)为了统计某治病菌活菌数,可用________________法将样本接种于固体培养基表面。该接种方法中的接种工具是________________。
              (2)为了检测致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A  ________________;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该病菌对抗生素B________________;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明________________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________________。
              (3)根据(2),抗生素________________抗菌效果最好。

              (4)人类经常使用抗生素,细菌抗药性不断增强是________________的结果。

            • 6. 纤维素分解性细菌是能分解纤维素的细菌。这类细菌多见于腐植土中,下面是分离纤维素分解菌的实验流程。

              土壤取样→①→梯度稀释→接种到②→挑选产生透明圈的菌落

              (1)以上实验流程中①是_________,①过程中使用的培养基是___________(液体培养基、固体培养基);②是__________________。

              (2)过程②用到的培养基中加入了一种染料与______形成红色复合物,刚果红染色法有两种,一种是先培养__________,再加入刚果红进行颜色反应;另一种是在________加入刚果红。

              (3)菌落周围出现透明圈说明纤维素分解菌能分泌纤维素酶,该酶是一种复合酶至少包括_____________________,并最终把纤维素分解成______________。

              (4)某实验小组为了研究pH对纤维素分解菌产生的纤维素酶活性的影响,将纤维素分解菌分别接种在pH不同的刚果红—纤维素培养基中,通过观察出现透明圈的最早时间和24h后透明圈直径的大小来判断纤维素酶活性的高低,该实验小组设置了pH分别为6、7、8的三组实验进行观察,得到了如下的实验结果:

              pH

              出现透明圈的最早时间(h)

              24h后透明圈的直径(cm)

              6

              6

              4.42

              7

              10

              3.66

              8

              24

              1.33

              通过上述结果可知,该实验的自变量是_______,因变量是________和____________,纤维素分解菌更适合在偏_______(填“酸”、“碱”或“中”)性环境下生长。

              (5)纤维素酶的测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_________进行定量的测定。

            • 7.

              请完成与传统发酵技术有关的问题:

              (1)为什么制作泡菜的时候,要在泡菜坛盖边沿的水槽中注满水?因为坛内进行发酵的主要微生物是_________________,其发酵需要________________环境,在这种条件下,它们能将______________分解成__________________。

              (2)测定泡菜中的亚硝酸盐含量的原理是,在____________条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成________________________色染料,将显色样品与__________________________比较,找出________________________________________,估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

              (3)当氧气、糖源都_______________时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌将__________________转变成____________________,最后再转变成醋酸。

            • 8.

              部分科学家预言未来最理想的燃料是绿色植物,如秸秆等。回答下列相关问题:

              (1)秸秆的主要成分是纤维素,可构成植物细胞的______________,其单体为______________。

              (2)纤维素的分解需要纤维素酶,纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成_    

              (3)从土壤中分离分解纤维素的微生物的实验流程如下:

              (一)土壤取样→(二)选择培养→(三)梯度稀释→(四)将样品涂布到鉴别培养基上→(五)挑选菌落。

              该培养基从物理性质来看属于____________培养基;该过程中步骤(二)选择培养基的营养物质的特点是           ,步骤(三)中稀释的目的是           

              (4)我国每年都有大量的玉米秸秆被燃烧,科学家建议通过秸轩沼气池来利用秸秆,其中发挥作用的主要微生物有甲烷菌,甲烷菌的代谢类型最可能为           

            • 9.

              I.为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题:

              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是____________________________;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为______________。

              (2)在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________________________________________________________。

              II.有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 


              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________、____________四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是____________________________________________________________ 。

              (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是___________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有____________________________________________________ 。

              (3)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是____________________________________________,该实验设计是否合理?为什么?__________________________________。

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