[生物——选修1：生物技术实践]

[生物——选修l：生物技术实践]

研究人员从土壤中筛选获得能降解苯酚的细菌菌株，以降解工业废水中的苯酚，其主要步骤如图所示。请回答下列问题：

(1)图②中培养目的菌株的培养基中应以________为唯一碳源，从功能上讲，该培养基属于________培养基。若要测定②中活细菌数量，应采用的接种方法是__________。在显微镜下用血细胞计数板直接计数所得到的细菌数目往往比实际活菌数目偏大，原因是______________________。

(2)若要长期保存目的菌，不采用图中⑦的保存方法，而用__________的方法。实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后才能倒掉。

(3)在接种到图中⑥之前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是______________。

为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是                        ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为        。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过         灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是          。

（3）示意图A和B中，         表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的            的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高      的利用率。

第三步：微生物的培养与观察。将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，并在适宜的条件下培养。分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖，而                       则不能生长繁殖。（注：实验中所用的培养基经检测符合要求，且均在无菌条件下操作）

若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定，需在上表培养基配方中添加的物质是__________________。若分离得到的是尿素分解菌，则培养基中pH升高使酚红指示剂变为_____色（1分），pH升高的原因是______。

（4）细菌的数目可以通过滤膜法来测定，例如测定饮用水中大肠杆菌的数目。将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现__________，根据培养基菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以       为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于       培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即       和       。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力       。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、        和         。无菌技术要求试验操作应在酒精灯       附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。