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            • 1.

              高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示,请据图回答有关问题:



              (1)过程①②合称为______________________。从功能上看,Ⅰ号培养基属于____________;该培养基中必须以_______作为唯一碳源。 Ⅱ号培养基的接种方法为___________________。

              (2)对配制的培养基采用的灭菌方法是__________________________________。

              (3)在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的______________;也可将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养,得到若干菌落后用碘液作显色处理,看到如下图所示情况,可判断图中周围___

              _________的菌落含有所需菌种。


              (4)如果高温淀粉酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失,且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性,则应选择下图中的______(填写字母)固定化工艺。

            • 2.

              有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示.


              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________、____________四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是_________________。

              (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是___________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________。

              (3)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_________________________,该实验设计是否合理?为什么?_________________________________________________________________。

            • 3. 日前微博传言手机细菌比马桶多。如图,央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题:

              (1)图中接种细菌的方法是_________。用该方法接种的目的是观察菌落的________和________。

              (2)图中用于培养细菌的培养基能够为细菌提供的基本营养物质是_______________________,为确定马桶按钮上大肠杆菌数目,需在培养基中加入__________________用于鉴别。

              (3)两个电视台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同,你认为可能原因有:

                  ①__________________________      ②____________________________

              (4)根据实验结果为了保证健康我们使用手机一段时间后应对手机进行______________。

            • 4.

              樱桃番茄富含多种天然有机酸、人体必需氨基酸、维生素和多种矿物质,但因其含糖量不高,影响酒精发酵效果,经实践摸索,调整发酵工艺,樱桃番茄成为酿造保健酒的好原料。下图1是利用固定化酵母或游离酵母发酵樱桃番茄果酒的工艺流程,请分析回答:


              (1)主发酵结束后,需将上层酒液转移到另一灭菌容器中进行后发酵,为了防止醋酸菌污染,加入容器中液体的量应______(填“注满”、“2/3”或填“1/3”),以保证果酒品质。

              (2)图2是固定化酵母发酵与游离酵母发酵的对比结果,从图中可以看出,两者发酵速率相近,但发酵前期游离发酵比固定发酵产生的酒精量多,主要原因是________________;后期游离酵母发酵速度减慢,除了底物浓度降低外,还可能是因为_______________。

              (3)为探究固定化酵母重复使用的效果,对固定化酵母进行了2次连续的重复发酵实验,图3是实验的结果,试分析在第2次发酵前期,酵母降糖速度明显加快的原因___________。实验结果说明固定化细胞具有_________________的优点。

              (4)用海藻酸钠作载体包埋酵母细胞,溶解海藻酸钠时最好采用________的方法,以防发生焦糊。溶化好的海藻酸钠溶液应__________后,再与已活化的酵母细胞充分混合。若海藻酸钠浓度过低,会导致__________________,固定效果大大降低。

              (5)为分离纯化优良酵母菌品种,采用平板划线法进行如下操作,排序最合理的是________。

              A. ②①④③    B. ②①④①③②    C. ②①④②③②    D. ①④①③②

            • 5.

              研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如下图所示。


              (1)柚皮易焦糊,宜采用________法提取柚皮精油,新鲜的柚皮干燥去水,并用________浸泡处理。

              (2)培养基中的尿素和牛肉膏可为乳酸菌A生长提供________________________。

              (3)做抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

              (4)柚皮油也可以用萃取法来提取,原因是________________________。从下图分析,提高萃取效果的方法是__________________________、__________________________。

            • 6. 土壤中含有大量的难溶性磷酸盐,为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株,以便将其添加到有机肥中,改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验:

              实验原理:固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解,会在菌落周围形成透明圈(如图),透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。

              实验步骤:

              步骤1&; 取某地区土样 5g制得土壤溶液后稀释,取稀释液1mL接种到基础培养基A上,在适宜温度下培养72h。

              步骤2  在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种,培养3~4d后观察菌落特征和透明圈的大小,初步筛选出三种优良解磷菌株(如下表)。

              分析回答:

              (1)从物理形态看,培养基A属于      培养基。培养基中磷源应该是      

              (2)步骤1中接种方法是      ,步骤2中接种环的灭菌方法是      

              (3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是      

               (4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力,研究人员将它们接种到基础培养基B中,并在 37 ℃、200 r·min-1 摇床培养,定期取上清液,测定溶液中可溶性磷含量,得到下图所示曲线。

              ①用摇床进行培养的好处是      

              ②结果表明最优良的解磷菌株是      

            • 7.

              目前,某市很多小区门口均有未经消毒的生牛奶出售。为了检测生牛奶中细菌含量变化,做如图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次。请回答下列有关问题:


              (1)超市所售鲜奶常采用巴氏消毒法消毒,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是______________;而从小区门口所购买的鲜奶,人们一般是买回家后采用_______________进行消毒。

              (2)为了对牛奶中细菌进行计数,常采用______________法。使用该方法时,可取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上,选择下列工具中的___________进行实验操作。


              (3)若设置3个培养皿用上述方法培养,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为_____________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值____________(填“偏大”或“偏小”),原因是_____________________________________。

              (4)消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应做什么改动?___________________。

            • 8.

              豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品,但易变质,保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离,并研究了乳酸链球菌素对腐败细菌的抑制效果,为生产豆浆时,优化保质方法提供依据。主要研究过程如下:

              ①豆浆变质处理 将2种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250mL三角瓶中,密封、37℃条件下,放置7d后,豆浆发生变质。

              ②腐败细菌的初步分离和计数 取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上,培养一段时间后,统计各培养基上菌落种类和数量。结果如下表:

              ③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果 以自制的新鲜豆浆为材料,经相应处理后,在37℃下放置35d后,统计豆浆中腐败细菌数量,结果如图。

              请回答下列问题:

              (1)步骤①中三角瓶的常用灭菌方法是         ,步骤②中培养基的常用灭菌方法是                

              (2)步骤②中适宜采用的接种方法是              。区分菌落种类的依据是                  。统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次,直到各类菌落数目稳定,以防止              

              (3)乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂,它是由34个氨基酸组成的多肽。步骤③结果表明,最能耐受乳酸链球菌素的细菌是         ;为有效防止豆浆腐败,在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在              左右。

              (4)与用抗生素防腐相比,使用乳酸链球菌素防腐的优点是                

            • 9.

              2017年7月郑州市卫生计生委发布的第3期卫生监测信息显示有15家美容美发场所的毛巾、理发(美容)用具大肠杆菌严重超标。如图甲为大肠杆菌含量检测操作简图,图乙为伊红美蓝培养基配方。

              回答下列相关问题:

              (1)图甲中滤膜的孔径应________(“大于”或“小于”)大肠杆菌。受此启发,对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌?____________________。

              (2)配制图乙中的基础培养基时,除了水分、无机盐以外,还应加入________(一种营养成分),以及____________。待各成分都溶化后和分装前,要进行的是____________,对培养基进行灭菌的常用器具是________________。倒平板时要待平板冷凝后,将平板倒置,其主要原因是________________________________。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色,从功能上划分,该培养基属于________培养基。

              (3)用平板划线法分离样液中的大肠杆菌,操作时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线的目的是_______________ _______。要检测样液中的大肠杆菌含量,取25 cm2毛巾样本,加5 mL蒸馏水,浸润半小时,然后在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL样液;在37 ℃的培养箱中放置48小时,3个平板上的黑色菌落数分别为49、48和47。据此可得出25 cm2毛巾样液中的活菌数为________。

            • 10.

              图1表示微生物实验室培养中的部分操作。请分析回答:


                                                               图1                                                                                        图2

              (1)步骤①的后一步的正确操作应是将平板____________________,这样可以防止_____________________________。

              (2)步骤②→③之间需要进行的正确操作应是__________________________________。

              (3)甲同学按步骤④进行操作,据图分析,采用的接种方法称为________________,其操作的两处不当之处分别是__________、_________。在老师的指导下,该同学按正确的方法重新操作,则经培养后菌落的分布情况最可能是下图中的_____________________。

                

              (4)乙同学尝试采用不同于甲同学的接种方法进行实验,其中一个平板经培养后的菌落分布如图2所示,推测该同学接种时可能的操作失误是_________________________。

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