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            • 1. 生物-选修1:生物技术实践
              金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题。
              (1)按细胞结构分类,金黄色葡萄球菌属于______生物,从培养过程分析,金黄色葡萄球菌可进行______呼吸。
              (2)7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括______,用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是______。
              (3)操作中在血平板上的接种方法是______,接种操作前后需要对接种工具进行______灭菌。
              (4)在制备血平板时需将pH调节至______ (“微酸性”或“微碱性”)后灭菌,待培养基______后,再加入适量血液。按培养基功能分类,血平板属于______培养基。
              (5)经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现______的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是______。
            • 2. 从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定.
              (1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化.培养噬盐菌的菌样应从______环境采集.
              (2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法.对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择______的培养基,并在______条件下培养.
              (3)在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在______条件下进行.
              (4)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请分析接种的具体方法.

              获得图A效果的接种方法是______,图B效果的接种方法是______.一同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是______,应当怎样操作?______.
            • 3. 将葡萄球菌在含卵黄的固体培养基上培养时,葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂,形成的菌落周围会出现特有的乳白色乳浊环。某兴趣小组欲通过实验室培养和计数来检测某果汁中的葡萄球菌密度。回答下列问题:
              (1)配制分离葡萄球菌的培养基时,在培养基中加人一定量的卵黄液,卵黄液除了能给微生物提供______、水和无机盐等营养物质外,还具有的作用是______。在配制培养基时若加人高浓度的NaCl溶液,就更容易筛选出葡萄球菌来,最可能的原因是______。
              (2)检测果汁中的葡萄球菌密度时,需先将果汁稀释。若要制成101倍的稀释样液,可取待检测果汁2.5mL加入______mL无菌水中。稀释后的样液需用______法接种在固体培养基上,利用这一方法进行活菌计数的原理是______。
              (3)将103倍的稀释样液接种在固体培养基上培养一段时间后,统计三个平板上葡萄球菌菌落数分别是200、180、220.如果需要据此计算出果汁中葡萄球菌的密度,还需要知道的一个重要数据是______。
            • 4. 随着社会的发展,石油产品的使用越来越多,石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力更强的微生物,人们不断地进行研究。请回答与此筛选过程有关的问题:
              (1)一般来说,微生物生长过程中需要的营养物质包括碳源、氮源、水、无机盐等营养物质。分解石油烃的微生物一般要从土壤中分离,获取土壤样品的取样地点最好选在石油污染明显处。
              如图为获取土壤样品后的培养研究过程:

              (2)为了能有效地分离出分解石油烃的微生物,过程①~④所用培养基,其成分的特点是只有______为唯一碳源,从而有利于______的生长,抑制其他微生物的生长,这样的培养基可称做______培养基。
              (3)④中的培养基从物理特征看属于______培养基,这可以通过往培养基中加入一定量的______来实现,对④进行接种常采用的两种方法分别是______和______。
              (4)若发现在⑤中无法区分菌落,可以将③中取出的菌液______。
              (5)在实验室应采用______法对培养基进行灭菌处理。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在______条件下进行。
            • 5. 某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种、培养及菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。
              (1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了______和______。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是______和______。
              (2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是______。
              (3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于______中培养,培养的温度设定在37℃.要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。
              (4)培养20小时后,观察到平板上有各种形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有______种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越______。
              (5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐______细菌,这种培养基被称为______。
            • 6. 常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发醇,而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精。请分析回答下列问题
              (1)在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中,下列选项需要的是______(填序号)
              ①酒精灯②接种环③高压蒸汽灭菌锅④培养皿
              (2)将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以______为碳源的培养基中,______(填“有氧”或“无氧”)条件下培养一周后,有些酵母菌死亡,说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。
              (3)将搜集到的酵母苗放入培养液中扩大培养后,用稀释涂布平板法计算每克样品中的菌株数的公式为(C÷V)×M,其中C代表______。对于需要长期保存的菌种,可以采用______的方法。
              (4)纯化后的酶A可以用电泳法检测其分子量大小,在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明______。
              (5)生产上常将酶A固定化以反复利用,部分操作如下:将酶A固定在______(填“溶于水”或“不溶于水”)的载体上,将其装入反应柱内后,需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱,以除去未吸附的酶A.一般来说,酶不适合采用______法固定化。
            • 7. 某些农作物秸秆富含纤维素,纤维素经过水解可以形成葡萄糖,葡萄糖再经过发酵可以生产酒精。如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程,请回答下列问题:

              (1)农作物秸秆含有丰富的纤维素,纤维素要经过纤维素分解菌分解成葡萄糖。人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌。筛选纤维素分解菌常用的方法是__________________。

              其实验流程是:土壤取样→选择培养→________→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生__________的菌落。

              (2)纤维素分解菌能合成纤维素酶,纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少含有三种组分,即_____________________________。前两种酶使纤维素分解成________,第三种酶将它分解成葡萄糖。

              (3)利用葡萄能生产果酒,进而生产果醋,生产果醋常用的菌种是醋酸杆菌,醋酸杆菌与酵母菌在代谢类型上的区别是____________________________________________。

            • 8.

              从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。

              (1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。如培养噬盐菌的菌样应从___________环境中采集。

              (2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择___________的培养基,并在___________条件下培养。 

              (3)接种前要对培养基进行相应的灭菌处理。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在_____________条件下进行。 

              (4)如图是微生物纯化培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请分析接种的具体方法。获得图A效果与图B效果的接种方法分别是_______。某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是___________。应当怎样操作才可避免此种现象?__________________。 

              (5)如果探究温度对纤维素酶活性的影响,自变量是_______,应该保持____________等不变(至少答两项)。 

            • 9.

              回答下列有关微生物培养的相关问题:

              Ⅰ.已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可以用于生物柴油的生产。回答下列问题:

              (1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用____________染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可用____________(填"萃取法"或"水蒸气蒸馏法")从菌体中提取。

              (2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以_______为碳源的______(物理状态)培养基进行培养。培养的结果发现没有得到微生物B的菌落或者数量极少,可在此操作之前增加____________这一操作步骤。

              (3)若要测定微生物B的菌体数,可在显微镜下用____________直接计数,若要测定活菌数量,可选用____________法进行计数。

              Ⅱ.某医院有一个罕见的细菌感染患者,医生想通过抑菌实验,从常用的抗生素一青霉素(A),氨苄青霉素(B),庆大霉素(C),氯霉素(D),环丙沙星(E)中寻找对病人最有效的一种.部分实验步骤如下:

              第一步:按下方所列配方配置培养基:

              牛肉膏

              蛋白胨

              NaCl

              H2O

              5.0g

              10.0g

              5.0g

              1000mL

              第二步:取单菌落适当稀释,用3支无菌滴管吸取从此病人体内分离到的细菌悬浮液2滴,滴于3个平板培养基表面,然后分别用3个无菌涂布棒涂匀,37℃恒温箱中培养,使细菌长满平板表面。

              (4)上述培养基配方中作为蛋白胨为微生物的生长提供了____________________。

              (5)如图圆环表示一个培养皿平面,用浸有不同抗生素的圆纸片间隔放到培养基土,如下图所示。

              培养2d后,A滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对青霉素____________;B滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对氨苄青霉素____________;C滤纸片周围的透明圈比A滤纸片周围的透明圈小,说明____________;D滤纸片周围的透明圈比A滤纸片的也小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是氯霉素的____________。

              (6)经测量透明圈大小,得到如下结果(单位mm):

              A

              B

              C

              D

              E

              7

              0

              3

              5

              10

              那么,你建议医生使用哪一种抗生素?____________.

            • 10.

              回答下列与酵母菌有关的问题:

              (1)培养酵母菌的培养基应采用________法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后会观察到菌落,菌落的含义是_______________。

              (2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进_______(填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培养,可促进______(填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”)。

              (3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是___________。

              (4)为筛选和纯化酵母菌,根据用途应选用 ____________培养基,常用的接种方法____________和____________.扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数,取0.2mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计了三个平板,菌落数分别是200、180、220.则样品中微生物的数量为__________个/mL.该统计结果_____________(低于、高于)实际值。

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