研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如下图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用________法提取柚皮精油，新鲜的柚皮干燥去水，并用________浸泡处理。

（2）培养基中的尿素和牛肉膏可为乳酸菌A生长提供________________________。

（3）做抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

(4)柚皮油也可以用萃取法来提取，原因是________________________。从下图分析，提高萃取效果的方法是__________________________、__________________________。

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如图），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤：

步骤1&; 取某地区土样 5g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h。

步骤2  在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如下表）。

分析回答：

（1）从物理形态看，培养基A属于      培养基。培养基中磷源应该是      。

（2）步骤1中接种方法是      ，步骤2中接种环的灭菌方法是      。

（3）根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是      。

 （4）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在 37 ℃、200 r·min^-1 摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到下图所示曲线。

①用摇床进行培养的好处是      。

②结果表明最优良的解磷菌株是      。

目前，某市很多小区门口均有未经消毒的生牛奶出售。为了检测生牛奶中细菌含量变化，做如图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中，混合均匀，如此再重复2次。请回答下列有关问题：

(1)超市所售鲜奶常采用巴氏消毒法消毒，使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是______________；而从小区门口所购买的鲜奶，人们一般是买回家后采用_______________进行消毒。

(2)为了对牛奶中细菌进行计数，常采用______________法。使用该方法时，可取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上，选择下列工具中的___________进行实验操作。

(3)若设置3个培养皿用上述方法培养，菌落数分别为35个、33个、34个，则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为_____________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值____________(填“偏大”或“偏小”),原因是_____________________________________。

(4)消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死，若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量，则在操作步骤上应做什么改动?___________________。

豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品，但易变质，保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离，并研究了乳酸链球菌素对腐败细菌的抑制效果，为生产豆浆时，优化保质方法提供依据。主要研究过程如下：

①豆浆变质处理 将2种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250mL三角瓶中，密封、37℃条件下，放置7d后，豆浆发生变质。

②腐败细菌的初步分离和计数 取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上，培养一段时间后，统计各培养基上菌落种类和数量。结果如下表：

③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果 以自制的新鲜豆浆为材料，经相应处理后，在37℃下放置35d后，统计豆浆中腐败细菌数量，结果如图。

请回答下列问题：

（1）步骤①中三角瓶的常用灭菌方法是         ，步骤②中培养基的常用灭菌方法是                。

（2）步骤②中适宜采用的接种方法是              。区分菌落种类的依据是                  。统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止              。

（3）乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂，它是由34个氨基酸组成的多肽。步骤③结果表明，最能耐受乳酸链球菌素的细菌是         ；为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在              左右。

（4）与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的优点是                。

2017年7月郑州市卫生计生委发布的第3期卫生监测信息显示有15家美容美发场所的毛巾、理发(美容)用具大肠杆菌严重超标。如图甲为大肠杆菌含量检测操作简图，图乙为伊红美蓝培养基配方。

回答下列相关问题：

(1)图甲中滤膜的孔径应________(“大于”或“小于”)大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？____________________。

(2)配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入________(一种营养成分)，以及____________。待各成分都溶化后和分装前，要进行的是____________，对培养基进行灭菌的常用器具是________________。倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是________________________________。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于________培养基。

(3)用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线的目的是_______________ _______。要检测样液中的大肠杆菌含量，取25 cm²毛巾样本，加5 mL蒸馏水，浸润半小时，然后在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL样液；在37 ℃的培养箱中放置48小时，3个平板上的黑色菌落数分别为49、48和47。据此可得出25 cm²毛巾样液中的活菌数为________。

A．缺乏25万单位抗生素X的实验数据

B．避免抗生素滥用

C．10万单位抗生素X对B.subtilis亦有作用

D．25万单位抗生素X会对人体细胞造成损害

胡萝卜素用途广泛，价格不菲。请回答下列有关胡萝卜素的问题：

①孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是________。过程①的原理是____________。

②培养基中的葡萄糖含量对菌体生长影响最大。葡萄糖为菌体生长提供           。为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加_________________，该培养基按用途分是________培养基。

③进行③过程时，应选取________色的菌落接种至液体培养基。为_______________β━胡萝卜素产量高的菌种，⑤中采取重复________过程（填过程中的数字）。

④某同学进行过程甲的正确操作，平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_________________；只有少数菌能生长形成菌落的原因是_____________________。

⑤另一同学为了获得高产菌株的单个菌落，接种时可用接种环在固体培养基上进行            操作，为了使聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，进行该操作时应该特别注意两点，一是________，二是________。

⑥让高产菌株大量繁殖的过程叫菌种培养，大量产生胡萝卜素的过程叫发酵培养。这两个过程中，               的培养基中碳／氮比例更高，原因是              。

（3）胡萝卜的肉质根富含胡萝卜素，可作为提取胡萝卜素的良好原料。

①完成提取胡萝卜素的实验流程示意图：

胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→       →胡萝卜素

②萃取剂不能选用无水乙醇的最主要原因是            。

③如图为提取胡萝卜素的装置:

a、在烧瓶瓶口安装了                  装置，其目的是                 。

b、过滤步骤是为了除去萃取液中的        。

（4）甲乙两同学将各自提取的胡萝卜素粗品用纸层析法进行鉴定，结果如图所示，据图分析回答：

图中①代表的物质是         ，甲同学实验结果的可能原因有                。

（1）实验步骤：

①配制以_____________ 为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是 _____________ 。

②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上出现 _____________ 。

③将接种针用 _____________ 法灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种入_____________（固体、半固体、液体）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖。

④配制与①相同的培养基，并加入少量碘液，使培养基呈蓝紫色。用 _____________ 法将上一步大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上。

⑤培养一段时间后，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现较大__________  现象的菌落即为初选菌落，经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。

（2）上述所有倒平板和接种操作，都应在超净台上酒精灯 _____________   附近进行。

（3）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于 _______培养基，⑤所用培养基属于_______培养基。

下图是生物兴趣小组为研究“XXX牌酸奶中乳酸菌种类及其耐药情况”而制定的流程图。请分析回答：

—→—→

(1)与酵母菌相比，乳酸菌在结构上的主要区别是________________________，________(填“有”或“无”)染色体。

(2)本研究使用的细菌培养基中特别加入了一定量的碳酸钙，乳酸菌在________(生理过程)中产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈。从物理形态分析，本研究使用的培养基属于________(类型)。

(3)在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，把锅内水加热煮沸，必须将锅内冷空气彻底排除后，将锅密闭，继续加热以保证锅内气压上升，达到121℃。灭菌后的培养基应适当冷却后，在________附近倒平板。

(4)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”实验操作步骤：

步骤1：分别取__________________加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并冷却到50℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。

步骤2：向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

步骤3：将接种后的三组培养基和一个__________都置于适宜温度等条件下培养若干天，观察比较培养基中菌落生长情况。

（1）酸菜制作过程中，起主要作用的微生物是___________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是_____________。

（2）实验室可采用__________法进行菌种纯化，在对该菌种进行培养时，与常规培养基相比，还需要额外在培养基中添加_________________。

（3）为了保持所获得的菌种纯净，需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏，需将菌种接种在___________上。放入4℃冰箱中可保藏3-6个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的_______ ___混匀，放在-20℃的冰箱中保存一年。

（4）在市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学认为是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持_______的观点，理由是______________。