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            • 1. 在自然条件下,土壤中混杂生活着各种细菌,淀粉分解菌就是其中的一类能分解淀粉的细菌。下图是某实验小组利用培养基从土壤中筛选淀粉分解菌的过程示意图,请据图回答下列问题:

              (1)若要将土壤中的淀粉分解菌筛选出来,则Ⅰ号培养基中的碳源应为__________,若发现Ⅰ号培养基中的菌落连成一片,最可能的原因是_____________________________。

              (2)平板培养基可用于微生物的接种,Ⅰ号和Ⅱ号培养基都必须要经过______法灭菌处理。为避免污染,需将培养皿呈_______状态放置。

              (3)稀释涂布平板法也可用于微生物的接种和计数,该实验小组将样液分别稀释了10倍、102倍、103倍、104倍,然后将102倍、103倍、104倍的稀释液分别涂布在不同的平板上,涂布多个稀释倍数的稀释液平板的目的是__________________________。若有三个平板均涂布了稀释倍数为103倍的稀释液0.1mL,分别形成了56、60和64个菌落,则每毫升原样液体中含有淀粉分解菌的个数为___________________,该方法测量值一般比实际值________。

            • 2.

              在光亮处用同一培养液分别培养单细胞绿藻和酵母菌,结果如图。原因是 ( )

              A.培养液中缺少无机盐  
              B.培养液中缺少O2  
              C.培养液中缺少CO2      
              D.培养液中缺少有机物
            • 3.

              传统发酵技术和微生物分离、纯化过程中,无菌操作是微生物接种技术的关键。某实验小组欲从污水污染的污泥中筛选出脲酶细菌(脲酶可将尿素分解为氨)。回答下列问题:

              (1)配制培养基时各种成分在溶化后分装前一般需要先_______;平板冷却凝固后一般要_______放置,这样操作的目的是____________________。

              (2)在菌株筛选过程中,应将污泥样品稀释液接种于______________固体培养基上;并加入_________指示剂加以鉴别。平板划线法时在第二次及其后的划线操作时,总是从____________开始划线,原因是_______________________________ 

              (3)如何设计实验判断培养基是否被污染?_________________________________________________________

              (4)对于频繁使用的菌种,可以采用______的方法进行保藏,但该方法具有________________________缺点。

            • 4.

              为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”某同学进行了如下实验:

               

              请分析回答下列问题:

              (1)配制的乳酸杆菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外,还应加入适量的______和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间,要进行的操作是_____________。

              (2)微生物接种的方法有很多,图中采用的方法为______________,其目的是在培养基表面形成____________________________________________。用该方法统计样本菌落数时,同时需要做A、B、C三个培养皿,原因是________________。用该方法统计样本菌落数后,所得数据需要乘以10n后,才可表示乳酸菌的数量(单位:个/ml),经正确操作培养后,3个平板上的菌落数分别为150、158和157。据此可得出每毫升样品中的活菌数约为_______个,统计的菌落数往往比活菌的实际数目____,这是因为________________________________________。

              (3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤:

              步骤1:分别取_____________________________加入三组无菌培养皿中,再加入灭菌并冷却到50°C左右的培养基,立即混匀,静置凝固成平板。

              步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

              步骤3:将接种后的三组培养基和一个________都置于适宜温度等条件下培养一定时间,观察比较培养基中菌落生长情况。

            • 5. 土壤中含有大量的难溶性磷酸盐,为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株,以便将其添加到有机肥中,改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验:

              实验原理:固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解,会在菌落周围形成透明圈(如图),透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。

              实验步骤:

              步骤1&; 取某地区土样 5g制得土壤溶液后稀释,取稀释液1mL接种到基础培养基A上,在适宜温度下培养72h。

              步骤2  在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种,培养3~4d后观察菌落特征和透明圈的大小,初步筛选出三种优良解磷菌株(如下表)。

              分析回答:

              (1)从物理形态看,培养基A属于      培养基。培养基中磷源应该是      

              (2)步骤1中接种方法是      ,步骤2中接种环的灭菌方法是      

              (3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是      

               (4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力,研究人员将它们接种到基础培养基B中,并在 37 ℃、200 r·min-1 摇床培养,定期取上清液,测定溶液中可溶性磷含量,得到下图所示曲线。

              ①用摇床进行培养的好处是      

              ②结果表明最优良的解磷菌株是      

            • 6.

              为了解鲜奶中细菌数量,某兴趣小组尝试对某品牌鲜奶中细菌含量进行测定。他们用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL鲜奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次,操作如下图所示。请回答有关问题:

              (1)鲜奶常采用_________法消毒,这种消毒方法可使鲜奶的营养成分不被破坏。

              (2)为了对牛奶中细菌进行计数,常采用_________法。使用该方法时,可取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上,选择下列工具中的_________进行实验操作。若其中一个平板经培养后的菌落分布如图1所示,出现图1结果可能的操作失误是_________。

              (3)若用上述方法培养设置3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为_________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值_________(填“偏大”或“偏小),原因是___________________________。

              (4)消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毐后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应做什么改动?____________________________________。

            • 7.

              下列叙述错误的是

              A.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素               
              B.培养霉菌时需将培养基的PH调至碱性
              C.培养细菌时需将PH调至中性或微碱性                         
              D.培养乳酸菌时需要提供无氧的条件
            • 8.

              自生固氮菌可不与其他植物共生,能独立完成固氮作用,在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮菌株,并对其固氮能力进行了研究。请回答下列问题:

              (1)在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中,下列选项不需要的是________(填序号)

              ①酒精灯         ②接种环        ③高压蒸汽灭菌锅        ④棉塞

              (2)下表是某种培养液成分含量表。请据表回答:

              编号 

              ① 

              ② 

              ③ 

              ④ 

              ⑤ 

              ⑥ 

              成分 

              NH4HCO

              KH2PO4 

              CaSO4 

              FeCl2 

              维生素 

              H2

              含量 

              0.5g 

              3.0g 

              0.5g 

              0.5g 

              少许 

              100mL 

              ①此培养液若用来培养自生固氮微生物,则应除去的成分是_______________,应加入的物质是_______________。

              ②若用该培养液培养纤维素分解菌,表中的营养物质应该怎样处理____________________。

              (3)要从土壤样品中分离出自生固氮菌,可以采用稀释涂布平板法。在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是________________。

              (4)涂布培养四天后,可通过观察________ 的形态特征来统计土壤中自生固氮菌的种类。

              (5)为了进一步筛选高效固氮菌,研究人员将上述获得的等量的四种固氮菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后,对固氮菌进行计数并测定培养液中的含氮量,结果如下表:

                

              甲菌 

              乙菌 

              丙菌 

              丁菌 

              菌量(个/mL) 

              2.1×105 

              2.5×10

              1.8×105 

              2.0×105 

              含氮量(K) 

              3.32 

              4.38 

              5.34 

              5.32 

              ①培养过程中需不断振荡的目的是____________________。

              ②可以采用_______________________方法对固氮菌进行计数,如果小方格中固氮菌的数量太多,无法数清,则应____________________。

              ③由上述结果可知,________菌的固氮效率最高

            • 9.

              磷是植物生长发育的必需元素,土壤中存在大量溶磷微生物,能够将难溶性磷酸盐转化为植物可吸收利用的有效磷,这种微生物统称为溶磷微生物,溶磷微生物主要包括溶磷细菌和溶磷真菌,溶磷真菌的溶磷效率远远高于细菌,某实验小组通过制备含有难溶性磷酸盐的培养基,根据微生物溶磷后形成的溶磷圈筛选出溶磷真菌,回答下列问题:

              (1)和液体培养基相比,用于分离溶磷真菌的培养基需要加入的特殊物质(成分为多糖)是__________,其作用是_________________,实验室对培养基灭菌的常用方法是______________;菌落是指_______________,菌落特征包括菌落的______________等(至少答出3个)。配制培养大肠杆菌的培养基,一般都含有水、碳源、无机盐和氮源等四类营养物质。试从细胞的元素组成分析,其原因是____________。配制培养基时除了满足基本的营养条件外,还需满足微生物生长对特殊营养物质、____________的要求。由于实验中使用的平板较多,为避免混淆宜在使用前用记号笔在培养皿__________做好标记。

              (2)该实验小组先制备一定稀释梯度的土壤悬浮液,将土壤悬浮液涂布于含有难溶磷酸盐的培养基中进行培养,然后分离出产生溶磷圈的菌株,在该培养基中还需要加入一定的抗生素,其作用是______________,分离时要每隔24h统计一次溶磷圈的数目,直至溶磷圈的数目不再发生变化,其目的是防止_____________________;分离出来的溶磷微生物可利用______________法进行长期保存,需在温度为______________条件下保存。

              (3)接种时可选用的工具是_______,接种过程中应采用无菌技术,其目的是防止______________。若涂布后培养一段时间后,发现培养基上的溶磷圈连接成一片,则导致该现象的可能原因是___________________________________。

              (4)该实验小组筛选出两株溶磷真菌,溶磷真菌在培养基上形成的菌落的直径(d)和溶磷圈的直径(D)大小如下表所示,据表分析溶磷能力较强的菌株是_______,最容易被真菌利用的磷酸盐是_______。

              菌株

              磷酸盐

              Ca3(P04)2

              Zn3(P04)2

              FePO4

              D

              d

              D/d

              D

              d

              D/d

              D

              d

              D/d

              P1

              5.9

              3.7

              1.59

              2.6

              0.9

              2.89

              6.4

              5.2

              1.23

              P2

              5.8

              3.3

              1.76

              3.8

              1.2

              3.17

              6.6

              5.1

              1.29

            • 10.

              下列关于微生物分离和培养实验操作正确的是( )

              A.为了防止污染,接种环经过火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
              B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上
              C.在微生物培养中,一般将培养皿倒置,在皿底上用记号笔做标记
              D.高压灭菌结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,才能开启锅盖
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