[生物——选修1：生物技术实践]

下图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，据图回答：

（1）细菌培养基的成分一般都含有碳源、水、________、________四类，该实验所用的选择培养基只能以________作为唯一氮源，其原因是________。鉴别培养基还需添加________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成________色。

（2）统计样品中活菌数目常用的方法是________：在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁵的土壤样品溶液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191，每毫升土壤样品溶液中的细菌数量为________×10⁸个；与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数目较________。

（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________（需答两条）。

某些农作物秸秆富含纤维素，纤维素经过水解可以形成葡萄糖，葡萄糖再经过发酵可以生产酒精。如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程，请回答下列问题：

（2）纤维素分解菌能合成纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即_________________________。有两种酶使纤维素分解成___ _____，另一种酶将它分解成葡萄糖。

（3）发酵后是否有酒精产生，可在       条件下用______ _______来检验。

（4）利用葡萄能生产果酒，进而生产果醋，生产果醋常用的菌种是醋酸杆菌，醋酸杆菌与酵母菌在代谢类型上的区别是__________________________。

请回答下列与玉米秸杆处理有关的问题：

(1)秸杆的主要成分是纤维素，牛本身没有相应的消化酶，但胃内有一种微生物可以帮助其分解，这种微生物与牛的种间关系为________________。尿素并不是牛马的必须营养，过多甚至有害，但有经验的农民常在其草料内喷少量尿素，据此题的信息你认为尿素的作用是__________________。

(2)分离纯化能分解秸秆的微生物时，需对培养基和接种针进行灭菌处理，常用的方法依次是____________________、____________________。

(3)将玉米秸秆人工收获后，将其铡碎、压实、密封储藏。秸杆经此处理后，气味微酸芳香(主要由乳酸菌代谢产物造成)。上述“压实密封”的目的是：人为造就一个_____ __     _环境，利于乳酸菌的________________。

苹果酒、苹果醋、苹果汁等是人们餐桌上的常见食品。请结合相关知识回答以下问题：

（1）如图所示是在苹果酒的基础上制作苹果醋的流程图。写出过程②发生的化学反应式：                                   ；过程②常用的发酵菌是             ，

可以在食醋中获得，分离和纯化该微生物的方法如下：

第一步：配制培养基。根据物理性质，培养该微生物的培养基为              。

第二步：采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌处理，并倒平板。

第三步：               。

第四步：培养。温度控制在                  。

第五步：挑选符合要求的菌落。

（2）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10⁴、10⁵、10⁶稀释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是                        　　　　　　　    ，此对照实验的目的是证明                是否被杂菌污染。

（3）果胶酶能分解果胶，瓦解植物的___________________，使榨取果汁变得更容易；果胶分解成可溶性的__________________，从而使浑浊的果汁变得澄清。果汁生产时，为了使果胶酶得到充分的利用，节约成本，在控制好温度和PH的基础上还需要控制好              。

[生物——选修1：生物技术实验]植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:

（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将        分解成       。

（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成       色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的       。

（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

注：“+”表示有，“－”表示无。

据表判断，培养基甲          （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是                   ；培养基乙          （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是                   ；

（1）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用         法进行接种。

（2）用于分离微生物的培养基除水、无机盐外，还必须含有                        等基本成分。

（3）所用培养基以          为唯一碳源，目的是只允许能产生        的微生物生长，而其他微生物均不能生长。在培养基中加入适量的刚果红染料，若观察到         即可初步筛选到目的菌。

（4）该实验中对培养基、接种环、实验操作者的双手通常所采用的灭菌或消毒方法的标号依次是              。 (①高压蒸汽灭菌        ②灼烧灭菌      ③化学消毒)

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以       为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于       培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即       和       。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力       。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、        和         。无菌技术要求试验操作应在酒精灯       附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。