在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。

(1) 下图是利用____________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。

 (2) 分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述_______成分，并加入______物质，以补充______源。若用于培养纤维素分解菌，应加入________物质，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入_______染料，含纤维素分解菌将形成__________圈。

有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示.

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________。

（3）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_________________________，该实验设计是否合理？为什么？_________________________________________________________________。

葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题，引进果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工，获得了较好效益，其菌种筛选和生产流程如图所示。其中在纯化菌种A时，共接种了甲、乙、丙、丁、戊五个平板，每个平板接种量均为O.lmL。纯化菌种B釆用的是划线接种。请回答下列问题：

（1）候选菌种A和B在细胞结构上的最大差别是菌种A有           。图中筛选菌种所用的培养基在灭菌时温度为           。

（2）纯化菌种A时，乙平板的菌落分布如上图所示，则纯化菌种A的接种方法为           ，接种乙平板时的操作失误是           。

（3）纯化菌种A的过程中，除乙平板外，其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落数分别是180、 200、420、190，则样品中菌种A的密度为       个/mL，此方法计数的结果常常低于实际值，原因是                。

（4）果醋发酵与果酒发酵相比，提供的不同条件有                      。

下表为培养某种微生物的培养基配方，请回答有关问题：

(1)从此培养基的配方来看，最适合培养下列哪种微生物？(　　)

A．酵母菌 B．硝化细菌C．纤维素分解菌 D．大肠杆菌

(2)培养微生物的培养基可以分为液体培养基和________，两种培养基的配方中一般都含有水、________、________和无机盐，培养基还需要满足微生物生长对________、________以及氧气的要求。

(3)稀释涂布平板法是微生物接种常用的方法之一，该法是将菌液进行_________________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面，进行培养。稀释条件足够时，可形成由单个细胞形成的单个________，因此可用于微生物的________________。

(4)如果要分离出土壤中分解尿素的细菌，培养基中必须添加的成分是________，若要验证得到的细菌是否是尿素分解菌，常用的方法则是向培养基中加入___________，若变红，则说明存在该细菌。

某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的部分步骤如下图所示。请回答下列问题：

（1）培养基中的化合物A能为目的菌的生长繁殖提供_____   __   _，筛选过程中所用的培养基的常用灭菌方法是_____   ___     。

（2）实验中“重复多次”的目的是_____   ___          ，为了达到分离纯化目的菌的目的，在固体培养基上接种的方法可以是_____   ________         ___。

（3）实验过程中振荡培养，“振荡”的目的是_____   ________   _______   _______

（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌后才能倒掉，目的是_______   _______。

（5）某同学计划统计污水池中“目的菌”的数目，需要设计_______   _______培养基作为对照组，此对照组的目的是证明培养基是否被杂菌污染，如果被污染，则统计的“目的菌”菌落数可能比实际活菌数_   _______。

有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制是实验过程如图甲、乙所示。

（1）微生物生长繁殖所需要的主要营养物质有碳源、水、_____四类，该实验所用的选择培养只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_________。

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是______。划线的某个平板培养后，第一划线区域上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有                  （填二项）。

（3）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示的实验。该实验的假设是_________，该实验设计是否合理？为什么？

下图表示微生物的接种实验中的一些步骤。请回答下列有关问题。

①把接种工具燃烧至变红②将接种工具在火焰旁边冷却③接种

（1）图中接种工具的名称是____________，制备培养微生物的培养时，灭菌与调pH的先后顺序是________。

（2）步骤②中，将接种工具冷却的原因是____________。

（3）步骤③中，将接种工具灼烧____________次

（4）苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。

①小明纯化菌种的接种方法为________，该方法不仅可以进行纯化，还可以进行____________

②采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为____________。

如果废水为100mg/L苯酚溶液，降解后约有25%的苯酚残留，则需将残留液稀释____________（填序号：①10②20③30）倍后，再进行比色。

I:回答与微生物有关的问题：

（1）泡菜在发酵过程中，起作用的微生物主要是_____和乳酸菌，其发酵产物中含有有机酸和_____等．

（2）腌制的食物中往往含有少量的亚硝酸盐，对亚硝酸盐的定量测定可以用_____法，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与_______偶联成_____色化合物．在实验过程中，测定的是_____值，以反映溶液中亚硝酸的含量．

（5）若存在杂菌污染，欲消除污染的杂菌，最简单的方法是________

（6）在培养大肠杆菌过程中，有关操作正确的是_____．

A．玻璃刮刀和接种环一样，只需灼烧灭菌

B．培养基分装到培养皿后进行灭菌

C．倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行

D．获得的菌种如果需要保存，可置于37℃恒温保存．

II：回答与基因工程有关的问题：如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径．据图结合所学知识回答下列问题：

（1）①过程称为________，该过程中常用的酶有_________________，为了便于将含有目的基因的细胞筛选出来，所选择的质粒上应该具________．

（2）培育转基因羊的过程中，科研人员通过_______技术将重组质粒M转移到受体细胞A中，受体细胞A应该是_______（填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵）．

（3）莴苣为双子叶植物，过程②常用的方法是___________，导人该细胞后，需对该细胞进行培养，经_________过程形成愈伤组织，再分化成幼苗长成转基因莴苣植株，此过程涉及的细胞工程技术是__________，该技术的原理是 ________________。

（4）过程⑥常用的方法是用________来处理大肠杆菌，使其易于吸纳重组质粒M．

结合以下图表分析，有关说法正确的是( )

A.青霉素和利福平能抑制DNA的复制 
B.环丙沙星和红霉素分别抑制细菌的①②和③ 

C.结核杆菌的④和⑤都发生在细胞质中  

D.①～⑤可发生在人体健康细胞中