（1）实验过程中对培养基、培养皿和实验操作者的双手所采用的灭菌或消毒方法依次是___________、___________、___________。

（2）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是___________。

（3）图示是利用____________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因是____________。

（4）关于图示的操作方法和结果正确的是___________

B．划线操作须在火焰上进行

D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌

酸菜，古称菹，《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答：

（3）在实验室中可采用下图所示的________法进行菌种纯化，在下图中 ______（填图中序号）区域更易获得单菌落．

酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素，以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题：

（1） 从土壤中筛选酸性脲酶生产菌，其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，从功能上分析，该培养基属于________培养基。该培养基的氮源来自_________。

（2） 筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是___________和_____________。配制浓度梯度为10^-1的系列稀释液时，需用移液管将lmL菌液移入盛有____mL蒸馏水的试管中。

（3） 对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量___（多于／等于／小于）后者，其原因是________。

（4） 若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。下表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况，从表中看出，海藻酸钠的浓度应选用__g／dL。若利用固定化酶技术，它的优点是___________________。

（4）人类经常使用抗生素，细菌抗药性不断增强是________________的结果。

艾弗里等人的肺炎双球菌体外转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，回答下列问题：

（1）科研人员在实验室验证了艾弗里的实验，为了更直观的观察到培养基内有无转化发生，用于体外培养肺炎双球菌的培养基应选择___________（“固体”或“液体”），如果选用牛肉膏蛋白胨培养基培养，牛肉膏的作用是___________，接种方法为____________。

（2）为确保操作环境（接种室、接种箱、超净工作台等）无污染，应采用___________消毒，为加强消毒效果还应喷洒适量的______________等化学抑菌剂。

（3）接种后经过恒温培养24小时后，可通过________________________现象确定发生了肺炎双球菌的“转化”。

表格是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方，请结合所学知识，回答下列相关问题。

（1）根据用途划分，该培养基属于________培养基，若要分离能分解尿素的细菌，需对培养基作出的最关键的调整是_______________，若还需鉴定分解尿素的细菌，需作出的调整是____________。

（2）从培养基的成分上看，大肠杆菌的同化类型为__________。该培养基中能作为大肠杆菌碳源物质的有________________。

（3）在实验室培养微生物时，获得纯净培养物的关键是_______________，紫外线可对空气进行灭菌的原因是_____________。

传统发酵技术和微生物分离、纯化过程中，无菌操作是微生物接种技术的关键。某实验小组欲从污水污染的污泥中筛选出脲酶细菌(脲酶可将尿素分解为氨）。回答下列问题：

（1）配制培养基时各种成分在溶化后分装前一般需要先_______；平板冷却凝固后一般要_______放置，这样操作的目的是____________________。

（2）在菌株筛选过程中，应将污泥样品稀释液接种于______________固体培养基上；并加入_________指示剂加以鉴别。平板划线法时在第二次及其后的划线操作时，总是从____________开始划线，原因是_______________________________ 

（3）如何设计实验判断培养基是否被污染？_________________________________________________________

（4）对于频繁使用的菌种，可以采用______的方法进行保藏，但该方法具有________________________缺点。

磷是植物生长发育的必需元素，土壤中存在大量溶磷微生物，能够将难溶性磷酸盐转化为植物可吸收利用的有效磷，这种微生物统称为溶磷微生物，溶磷微生物主要包括溶磷细菌和溶磷真菌，溶磷真菌的溶磷效率远远高于细菌，某实验小组通过制备含有难溶性磷酸盐的培养基，根据微生物溶磷后形成的溶磷圈筛选出溶磷真菌，回答下列问题：

（1）和液体培养基相比，用于分离溶磷真菌的培养基需要加入的特殊物质（成分为多糖）是__________，其作用是_________________，实验室对培养基灭菌的常用方法是______________；菌落是指_______________，菌落特征包括菌落的______________等（至少答出3个）。配制培养大肠杆菌的培养基，一般都含有水、碳源、无机盐和氮源等四类营养物质。试从细胞的元素组成分析，其原因是____________。配制培养基时除了满足基本的营养条件外，还需满足微生物生长对特殊营养物质、____________的要求。由于实验中使用的平板较多，为避免混淆宜在使用前用记号笔在培养皿__________做好标记。

（2）该实验小组先制备一定稀释梯度的土壤悬浮液，将土壤悬浮液涂布于含有难溶磷酸盐的培养基中进行培养，然后分离出产生溶磷圈的菌株，在该培养基中还需要加入一定的抗生素，其作用是______________，分离时要每隔24h统计一次溶磷圈的数目，直至溶磷圈的数目不再发生变化，其目的是防止_____________________；分离出来的溶磷微生物可利用______________法进行长期保存，需在温度为______________条件下保存。

（3）接种时可选用的工具是_______，接种过程中应采用无菌技术，其目的是防止______________。若涂布后培养一段时间后，发现培养基上的溶磷圈连接成一片，则导致该现象的可能原因是___________________________________。

（4）该实验小组筛选出两株溶磷真菌，溶磷真菌在培养基上形成的菌落的直径(d)和溶磷圈的直径（D)大小如下表所示，据表分析溶磷能力较强的菌株是_______，最容易被真菌利用的磷酸盐是_______。

I．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为______________。

(2)在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________________________________________________________。

II．有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 

(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________、____________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是____________________________________________________________ 。

(2)纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有____________________________________________________ 。

(3)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是____________________________________________，该实验设计是否合理？为什么？__________________________________。