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            • 1. 毒死蜱(C9H11C13NO3PS)是一种有机磷杀虫剂,长期使用将导致土壤中农药残留严重.某研究小组从长期施药的韭菜温室土壤(偏酸性)里分离出能降解毒死蜱的木霉,并对其降解特性进行初步研究.请回答:
              (1)用于分离木霉菌种的培养基属于______培养基.配制此培养基时,应加入______作为唯一碳源.接种前,将培养基在适宜温度下放置适当的时间,观察培养基______,以确定培养基是否被污染.
              (2)纯化木霉时,统计出0.2mL的稀释液在稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为40个,则每mL样液中的菌落数为______个.用此法测定木霉数量,实际活菌数量要比统计的菌落数量______,原因是______.
              (3)探究pH对木霉降解毒死蜱活性的影响
              ①研究小组向不同pH的培养基中分别加入100mg/L 毒死蜱,5天后检测毒死蜱的残留量(图1).由图可推知:在偏酸性的土壤中,______.

              ②研究小组向不同pH的培养基中分别加入100mg/L 毒死蜱,再分别接种1mL木霉悬液,混合均匀,5天后检测毒死蜱的残留量(图2).在此韭菜温室土壤中,若要提高木霉对毒死蜱的降解活性,可对土壤作何处理?______.
            • 2. (1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑 ______ 、 ______ 和渗透压等条件.由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、 ______ 、 ______ 等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料.
              (2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行 ______ (消毒、灭菌);操作者的双手需要进行清洗和 ______ ;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能 ______ .
              (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的 ______ .
              (4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的 ______ .
              (5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染.对于固体培养基应采用的检测方法是 ______ .
              (6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过 ______ 处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散.
            • 3.

              某兴趣小组对某蓄水池进行细菌数目测定,以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题:

              (1)用无菌三角瓶取水样前,水龙头需使用酒精棉擦拭消毒后,再通过_________灭菌。取水前进行无菌操作的目的是______________。

              (2)该小组通过滤膜法测定细菌总数,将10mL的水样进行过滤后,将滤膜放在牛肉膏蛋白胨培养基上培养,培养时应将平板倒置,其原因是__________(填2点原因)。所用培养基中的牛肉膏除为微生物提供碳源和氮源外,还能提供磷酸盐和__________。在培养过程中,不同时段观察到的平板上菌落特征的差异有__________(至少写出两点)。

              (3)该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目,可将滤膜放在__________培养基上培养一段时间,然后计算培养基上__________(颜色)菌落的数目。

            • 4. 下表中甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基的配方,如图所示为相关分离过程,回答下列问题(注:水解酪素,即水解酪蛋白,由酪蛋白水解得到):
              KH2PO4 1.4g 纤维素粉 5.0g
              Na2HPO4 2.1g NaNO3 1.0g
              MgSO4•7H2O 0.2g Na2HPO4 1.2g
              葡萄糖 10.0g KH2PO4 0.9g
              尿素 1.0g MgSO4•7H2O 0.5g
              琼脂 15.0g KCl 0.5g
              酵母膏 0.5g
              水解酪素 0.5g
              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到100mL 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL
              (1)从功能上看,甲培养基属于______.从物理性质上看,甲培养基属于______.其中提供氮源的物质是______.
              (2)如果将乙培养基配制成固体培养基,则在该培养基上长出的菌落是否都能分解纤维素?______.如果培养基中加入______可以筛选出具有分解纤维素能力的菌株,同时透明圈越______(大、小),表示该菌分解纤维素的能力越强.
              (3)为了计数微生物的数量,图丙采用______法进行接种培养计数,除此之外,还可以采用______法进行计数.其中前一种计数方法所得结果要比后一种计数方法所得结果______(大、小).
              (4)一位同学利用如图的方法步骤在4个平板培养基上分别接种0.1mL土壤稀释液④,培养后菌落数分别为180、155、176、129个,则1mL原土壤样液①中微生物数量约为______.
            • 5. 如图表示某种感染细菌的实验室培养过程,其中Ⅳ中出现6个菌落。请回答下列有关问题:

              (1)Ⅳ中是固体培养基,与Ⅱ(Ⅲ)中的液体培养基所含的基本成分相同,都含有______,不同的是制作Ⅳ时加入了______以使培养基呈固态。
              (2)鉴定前进行细菌培养,目的是______;两次接种均应在______条件下操作,防止杂菌污染。
              (3)Ⅳ中出现的理想菌落应分别由______所形成。若菌落连成片,则应对Ⅲ中的培养液进行______处理再接种;通过观察菌落的______能初步鉴定可疑细菌。
              (4)为进一步了解这种细菌对抗生素的敏感性以方便对症下药,现用青霉素、罗红霉素进行实验,请简述实验思路:______。
            • 6.
              自生固氮菌是一类能独立固定氮气的细菌,其中有些好氧的种类能产生PHB(一种可以被生物降解的塑料).现欲获得高产PHB的自生固氮菌菌种,操作流程如下:采集土样→富集培养→分离、纯化培养→初步筛选PHB固氮菌→筛选高产PHB固氮菌→保存备用.回答下列问题:
              (1)富集培养时,为达到筛选自生固氮菌的目的,在配制培养液时不应添加 ______ .培养时要将装有培养液的锥形瓶放置在摇床上,其目的是 ______ .
              (2)进行分离、纯化培养时,要先将培养基倒入培养皿中,制成平板.此时所使用的培养基与富集培养时有所不同,其中添加了一定量的 ______ .倒平板时,要待高压灭菌后的培养基 ______ ,再在 ______ 附近操作.平板冷凝后,需置于恒温箱中1-2天后再用于接种,目的是 ______ .
              (3)分离纯化培养后,得到8种形态特征有所不同的单菌落.经染色鉴定,其中3种能产生PHB.那么如何进一步筛选出高产PHB的菌种呢?请说出你的实验思路. ______ .
            • 7.

              为了获得纯度高的大肠杆菌,需要对大肠杆菌进行培养和分离。培养大肠杆菌一般用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。

              (1)培养大肠杆菌,配制固体培养基的基本步骤:计算→称量→________→_________→倒平板。 

              (2)称量时,由于牛肉膏比较黏稠,可以用______挑取,放在____上称量。由于牛肉膏和蛋白胨______,称量时动作要迅速,称量后要及时盖上瓶盖。 

              (3)在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上的大肠杆菌能生长,说明培养基含有_________等大肠杆菌生长所需的营养要素。 

              (4)微生物纯化培养可以通过多种接种方法_________和_________等,使大肠杆菌在固体培养基上形成单个_________,从而获得纯菌株

            • 8.

              下表是某培养液成分含量表,请回答:

              (1)若用于培养微生物,该培养液中有   类营养物质,可培养的微生物同化作用类是          

              (2)此营养液若用来培养固氮微生物,则应除去的成分是         ,加入的物质是                

              (3)若用该培养液培养大肠杆菌,应加入的物质是             ,为检测大肠杆菌的存在与否还应加入                      ,将呈现             反应。

              (4)此培养液若用于培养金黄色葡萄球菌并观察菌落形态,除有机物外还应加入       ,为使其正常生长繁殖,同时又抑制其他杂菌,还应加入         

              (5)此培养液若用于植物组织培养,还应加入                

            • 9. 办公和学习产生大量废纸,其主要成分是木质纤维,人类正努力将其转化为一种新的能源乙醇.如图是工业上利用微生物分解纤维素生产乙醇的基本工作流程,请回答相关问题:

              (1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在            的环境中.将从土壤中获得的微生物培养在以            为碳源,并加入            的培养基上,筛选周围有            的菌落.

              (2)分解废纸中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将           分解成           

              (3)根据测定结果,①环节常选择毛霉,则②中获得的酶是           .该酶至少包括三个组分                       

              (4)纸张加工过程中,有时要加入一些由植物芳香油制成的香精,芳香油的提取方法有                          等(至少写出2种);也可以用植物色素使纸张着色,根据植物色素易溶于有机溶剂的特点,可以考虑使用           法提取植物色素.

            • 10. 野菊花气味芬芳,具有清热解毒的功效,可用来制备芳香油,制备原料可从通过植物组织培养技术所获得的大量菊花中选取。

              (1)菊花的组织培养需在________培养基上进行,选取________冲洗干净,用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为70%的酒精中摇动2—3次。

              (2)外植体经过________过程培育成植株幼苗,该过程的关键激素是________

              (3)接种操作需在酒精灯火焰旁进行,每次使用完器械后,需采用________灭菌。

              (4)菊花精油具有易挥发,难溶于水,化学性质稳定的特点,适合采用________法提取。当蒸馏瓶中的原料和水的量一定时,蒸馏过程中影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和________。

              (5)如果蒸馏过程中不进行冷却,则精油提取量会减少,原因是________

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