[生物——选修1：生物技术实践]

根据所学知识，回答下列问题

（1）用萃取法提取胡萝卜素的原因是________。萃取的效率主要取决于萃取剂的________，同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响；在对新鲜胡萝卜进行干燥时，要注意控制________，否则会引起胡萝卜素的分解。

（2）从橘皮中能提取出橘皮油，为提高出油率，需要将橘皮干燥，并用________浸泡。为探究浸泡时间对出油率的影响，应设置________作为对照。

（3）酒精发酵时，当酒精含量达到12～16％时，发酵就停止了。为获得耐酒精的酵母菌，用涂布器在含高浓度酒精的培养基上进行________操作。这种培养基只允许耐酒精的微生物生长，该培养基称作________培养基。再根据菌落的________、隆起程度和颜色等菌落特征获得酵母菌。

将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。回答下列问题：

（1）M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素一抑制__________的生长，加入了链霉素的培养基属于__________培养基。

（2）M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有____________________（答出两点即可）。氮源进入细菌后，可参与合成的生物大分子有____________________（答出两点即可）。

（3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物，加入的显色剂是__________，该方法能筛选出产生淀粉酶微生物的原理___________________________________。

（4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：

甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133。

乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。

有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是：_______________________________________。

在微生物连续培养时，一部分旧的液体培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜液体培养基流入以保证微生物对营养物质的需求。研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的液体培养基中，连续培养多代，然后取样分析其中存在的新菌株。请回答下列问题：

    （1）液体培养基中除了把葡萄糖作为____________外，还应该含有________________________。

    （2）样品中还发现了CV101、CV103新品种，对其菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，据此作出的推测是：_______________。请设计并完成下列实验，来验证你的观点。

    ①配制______________________的固体培养基（A组）和不含碳源的固体培养基（B组）；

    ②将等量且适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在____________条件下进行。

    ③预期实验结果：___________________________________________________________。

为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”某同学进行了如下实验:

请分析回答下列问题：

(1)配制的乳酸菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加人适量的_______和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是_________。

(2)接种微生物的方法有很多，图中过程①②③所示的方法为__________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是__________。用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘以10ⁿ后，才可表示乳酸菌的数量（单位：个/ml)，据图分析，这里的n=___________。

(3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤：

步骤1:分别取等量且适量的_______________________分别加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并冷却到 _________℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。

步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

步骤3:将接种后的三组培养基和一个__________________都倒置于适宜温度的恒温箱中培养一定时间，观察比较培养基中菌落生长情况。

某兴趣小组对某蓄水池进行细菌数目测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题：

（1）用无菌三角瓶取水样前，水龙头需使用酒精棉擦拭消毒后，再通过_________灭菌。取水前进行无菌操作的目的是______________。

（2）该小组通过滤膜法测定细菌总数，将10mL的水样进行过滤后，将滤膜放在牛肉膏蛋白胨培养基上培养，培养时应将平板倒置，其原因是__________（填2点原因）。所用培养基中的牛肉膏除为微生物提供碳源和氮源外，还能提供磷酸盐和__________。在培养过程中，不同时段观察到的平板上菌落特征的差异有__________（至少写出两点）。

​（3）该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目，可将滤膜放在__________培养基上培养一段时间，然后计算培养基上__________（颜色）菌落的数目。