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          50条信息

            • 1.

              请回答下列与微生物培养相关的问题:

              (1)土壤中具有分解尿素的细菌,此类细菌能产生________酶,该酶能将尿素分解成____________。

              (2)某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1000ml,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4·7H2O

              蛋白胨

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              1.4g

              2.1g

              0.2g

              1.0g

              10.0g

              1.0g

              15.0g

              根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中能分解尿素的细菌?__________(填“能”或“不能”),原因是__________________。

              (3)某小组采用平板划线法分离某样品的细菌时,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是_______________________________。使用稀释涂布平板法检测土样中细菌含量时,在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养一段时间,这样做的目的是_________________。

              (4)在分离尿素分解菌的实验中,大部分同学从培养基上筛选出大约50个菌落,而有一个同学从培养基上筛选出大约150个菌落,这种实验结果差异产生的原因可能是________________、_______________。

            • 2.

              (1)若分离以尿素为氮源的细菌。在含有___酶的细菌菌落周围会出现,这是由于尿素被分解产生的氨气使PH升高,______指示剂产生颜色变化。采用______法将发酵菌株固定在锯末上制成固定化菌株,可大幅缩短生产周期,降低生产成本和提高生产效率。

              (2)亚硝酸盐测定原理:亚硝酸盐可与________________发生重氮化反应.这一产物再与____________________偶联,形成__________色产物。

              (3)获得目的基因,获取已知目的基因序列用化学方法合成或_________________

              基因工程的核心:通常用_________________分别切割目的基因和载体DNA,然后用________将目的基因和载体DNA连接在一起,形成重组DNA分子。

              (4)卵巢经超数排卵处理后,要使用__________________确定卵泡的位置。     

               科研人员单独培养胚胎干细胞,首先需要在培养皿底部制备一层______细胞,称为饲养层。 利用动物细胞培养技术中的细胞具有________________和__________________的特点可用烧伤患者自身的健康皮肤细胞培养出大量自身薄层皮肤细胞,用于移植。

              (5)植物克隆和动物克隆共有的培养方法是_______

              A.原生质体培养、传代培养     B.贴壁培养、传代培养 

              C.器官培养、愈伤组织培养     D.悬浮培养、器官培

            • 3. (一)回答与基因工程和植物克隆有关的问题。
              (1)将含某抗虫基因的载体和含卡那霉素抗性基因的载体pBI121均用限制性核酸内切酶EcoR I酶切,在切口处形成_______。选取含抗虫基因的DNA片段与切割后的pBI121用DNA连接酶连接。在两个片段相邻处形成_______,获得重组质粒。
              (2)已知用CaCl2处理细菌,会改变其某些生理状态。取CaCI2处理过的农杆菌与重组质粒在离心管内进行混合等操作,使重组质粒进入农杆菌,完成_______实验。在离心管中加入液体培养基,置于摇床慢速培养一段时间,其目的是_______,从而表达卡那霉素抗性基因,并大量增殖。

              (3)取田间不同品种水稻的幼胚,先进行_______,然后接种到培养基中培养,幼胚发生_______形成愈伤组织,并进行继代培养。用含重组质粒的农杆菌侵染愈伤组织,再培养愈伤组织,以便获得抗虫的转基因水稻。影响愈伤组织能否成功再生出植株的因素有:培养条件如光温、培养基配方如植物激素配比、以及_______(答 2点即可)。


              (二)请回答从土壤中分离产脲酶细菌有关问题
              (1)LB固体培养基:取适量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl,加入一定量的蒸馏水溶解,再加_________,灭菌备用。
              (2)尿素固体培养基:先将适宜浓度的尿素溶液用______灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤,因为G6玻璃砂漏斗_______,故用于过滤细菌。然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中,备用。

              (3)取适量含产脲酶细菌的10-4、10-5两种土壤稀释液,分别涂布接种到LB固体培养基和尿素固体培养基上,培养48h,推测固体培养基上生长的菌落数最少的是_____(A. 10-5稀释液+尿素固体培养基        B. 10-5稀释液+LB固体培养基     C. 10-4稀释液+尿素固体培养基         D. 10-4稀释液+LB固体培养基)。在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现_____,其原因是细菌产生的脲酶催化_____分解产生_____所致。

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