（1）植物组织培养常用MS培养基，该培养基与微生物培养基成分相比，诱导愈伤组织的培养除了添加的糖类不同外，还应该                            。

（2）无菌技术是植物组织培养的关键，一般使用             法对培养基进行灭菌；外植体消毒一般采用70%的酒精和            溶液处理，但处理既要考虑药剂的消毒效果，又要考虑植物的耐受能力。

（3）如果采用剪秋罗的花药进行离体培养，一般来说选用           期的花粉可提高成功率。培育花粉植株的两条途径之间并没有绝对的界限，主要取决于          。

（4）剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则接种后容易从受损部位长出           ，形成的花粉植株数目会发生变化，所以需对培养出的植株作进二步的鉴定和筛选。

（5）用箭头写出从剪秋罗花粉离体培养的过程                                          

    （1）选取的水稻花药应为________期，此时细胞核由中央移向细胞一侧，花药培养成功率最高。为确定花粉是否处于该时期，最常用的镜检方法是                 。

   （2）通过花药培养产生花粉植株一般有两种途径：一种是花粉通过            阶段发育为植株；另一种是在诱导培养基上先形成               ，再将其诱导分化成植株。花粉植株的形成具体通过哪一条途径主要取决于                                       ，但最后获得的来源于未成熟花粉的完整植株都称为               植株(甲)。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明未成熟花粉具有                  。

（3）对植株甲进行处理，使其染色体加倍，才能使其结实产生后代(乙)，乙植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为      种，该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为         种。

（4）研究人员研究了茎尖外植体大小对苗的成活率和脱毒率的影响，实验结果如图所示，实验结果表明，茎尖越小，                                   ，因此脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为        mm。   

(1)该项生物技术利用的原理是                        ；过程②表示          。

(2)植物激素中生长素和细胞分裂是启动细胞生命活动的关键性激素，两者的用量比例会影响细胞的发育方向，生长素与细胞分裂素用量比值适中时，促进                    ；生长素与细胞分裂素用量比值低时，有利于             、抑制               。

（3）由于菊花茎段组织培养比较容易，故在配制MS固体培养基时，              （必需添加、不必添加）植物激素。接种前，工作台要用体积分数为70%的酒精擦试一遍。之后，所有的接种操作都必须在             旁进行，并且每次使用器械后，都需要用               灭菌。

 (4)通过花药培养可以得到单倍体植株，其过程一般有两种途径：一种是花粉通过

            阶段发育为植株，另一种是在诱导培养基上先形成              再将其诱导分化成植株。

43．(11分)为提高玉米产量，科学家在育种和栽培中进行研究。下图是关于玉米培养的过程，请回答：

(1).取茎尖进行组织培养，发育成植株D，取D的花药培养成幼苗，经秋水仙素处理后发育成为植株G。从细胞分裂方式上分析，E→F过程中进行了________分裂；从育种方式上分析，D→G属于____________育种。

(2).D植株上的小孢子母细胞形成精子所经历的分裂方式是____________________。在该过程中，首先要经过“小孢子四分体时期”，这里的“四分体”是指________________________________。在其后某个时期对离体刺激最敏感，一般来说在________期，花药培养成功率最高。

(3).选取茎尖放入A瓶中培养，是因为_____________________________________________________________________

如果选取D植株茎的切段放入A瓶培养，首先要进行____________，一般是刷洗后用流水冲洗 20min，无菌吸水纸吸干后再放入体积分数为70%的酒精中摇动2～3次，持续________s，立即取出，在无菌水中冲洗并用无菌吸水纸吸干，再放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中 1～2  min，取出后在____________中清洗至少3次，以____________________。

 (4).C和F试管苗不能直接栽培到大田中，要进行____________________________。

（1）在一定条件下，处于        状态的菊花组织或器官可经________过程形成愈伤组织。

（2）配制植物组织培养所需的MS固体培养基．除加入水、多种无机盐、各种有机营养物和植物激素外，还要加入__________

（3）选取菊花茎段时．要取生长旺盛的嫩枝，原因是 __                    。获得外植体后要对其进行                      （    填“消毒”或“灭菌”）．此后所进行的接种操作必须在      旁进行．上述操作的目的是为了防止_________ 的污染。

“夫树橘柚者，食之则甘，嗅之则香”，每年10月，正是柑橘大量上市的季节，橘子全身都是宝：不仅果肉的营养价值高，而且药用价值也较高，其皮、核、络、叶都是“地道药材”。结合下图回答相关问题：

（1）通过过程③制作果酒时常常接种的菌种是酵母菌，最适合其繁殖的温度为________℃左右。在过程③中一般不用灭菌也不会受到杂菌的污染，原因是（写出两点）________。

（2）过程③和过程④所用微生物在代谢方式上的主要区别是________。

（3）选用新鲜而不是干枯的柑橘果皮作为提取香精的材料，理由是新鲜柑橘果皮________。过程⑤最好采用的方法是________法，为了使橘皮油易于与水分离，还要加入NaHCO₃和________，并调节pH为7～8。

（4）橘皮精油的提取之所以不采用水蒸气蒸馏法，是因为水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分________等问题。

（5）现获得一株无子突变柑橘，研究人员要在较短时间内获得大量该突变植株，最好采用________的方法，该过程中需要对外值体使用酒精进行消毒处理。

【加试题】抗疟药青蒿素挽救了数百万人的生命。中国女科学家屠呦呦由于在青蒿素研发所做的重大贡献荣获2015年诺贝尔医学奖。青蒿中青蒿素的含量很低，科研工作者一直致力于提高青蒿素含量的研究。某研究小组给青蒿转入青蒿素合成的关键基因fps，通过该基因的过量表达来提高青蒿素的产量，其过程如下图所示（注：农杆菌中Ti质粒上只有T—DNA片段能转移到植物细胞中）。

（1）提取青蒿的总RNA，在        酶作用下获得青蒿的DNA片段。

（2）如果fps基因的基因序列已知，我们可以通过          合成目的基因或者用PCR扩增目的基因；如果fps基因的基因序列未知，可以从            获取目的基因。

（3）过程①需用同种                   酶对含fps基因的DNA和Ti质粒进行酶切。

（4）过程③中将青蒿细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让            进入青蒿细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是            。

（5）下列有关基因工程的叙述正确的是（   ）

A．大肠杆菌质粒上具有控制质粒DNA转移的基因

B．基因工程的基本原理是让目的基因在宿主细胞中稳定存在和高效复制

C．用氯化钙处理植物细胞，可增加细胞壁的通透性

D．将乙肝抗原导入酵母菌可以获得能生产乙肝疫苗的工程菌

（6）进行组织培养的一般培养基为MS培养基，该培养基由大量元素、微量元素和   组成。MS培养基含有十几种化合物，配制不方便也难称量，可将培养基的各种成分扩大5—10倍分别称量，配成       ，用时稀释。

（7）过程④要在        培养基中进行培养，使之长出较多的丛状苗。

（8）取出试管苗，在适宜的光照、温度和80%以上的         等条件下进行锻炼，再转移至土中培养（定植）。

（9）在植物组织培养中关于消毒和灭菌操作的叙述，正确的是（   ）

A．操作者的双手可以不消毒      B．外植体可以用酒精消毒

C．镊子等器械需用酒精灭菌      D．接种后培养基需用高压蒸汽灭菌

（3）月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植株产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过            阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于          。

(1)对菊花来说，要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养，其原因是________；对月季来说，适宜花粉培养的时期是花粉应处于________期。为确定该花粉是否处于该时期，最常用的方法是________。

(2)在培养嫩枝组织和花粉的培养基中都要加入一定的植物激素，常用的植物激素有________。

(3)某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。为了避免微生物对培养造成的影响，在进行接种时应注意________。

①接种室要消毒  ②只要戴口罩，操作时便可说话  ③外植体可预先用体积分数为70％的酒精浸泡，取出用无菌水冲洗后，再用0.1％的氯化汞溶液消毒，并用无菌水冲洗干净  ④接种操作要在酒精灯火焰旁进行  ⑤接种完毕应立即盖好棉塞

A．①②③④⑤    B．①②③④    C．①③④⑤    D．②③④⑤

(4)不同植物对各种条件的要求往往不同，进行菊花组织培养一般将温度控制在________℃，并且对光照的控制为每日光照________h。

(1)月季组织培养的实验操作流程是：制备MS固体培养基、________、接种、培养、移栽、栽培。该实验能成功培育出植株的理论依据是________。

(2)在配置培养基时，需要根据各种母液的________，计算各种成分的用量。

(3)通过花药培养产生花粉植株一般有两条途径，这两条途径主要取决于培养基中________。

(4)月季花药培养通常选择________的花蕾作为实验材料，对花药取样后用________对其染色，若镜检发现大多数的花粉含有两个核，则该时期的花药________(适宜、不适宜)进行接种。

(5)在花药培养过程中发现，接种花药的培养基中，花药边缘出现杂菌，其余部分正常，未接种的培养基正常。出现该现象的原因最可能是________。

(6)如图为培养基中蔗糖浓度对月季叶的愈伤组织诱导率的影响。

    ①蔗糖浓度为________时，最有利于愈伤组织的形成，原因是该浓度的蔗糖溶液既能________，又能为细胞提供充足的碳源和能源。

    ②外植体形成愈伤组织的过程称为________，将愈伤组织继续进行培养，为了使愈伤组织既分裂又分化，生长素和细胞分裂素的使用顺序是：________。