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            • 1.
              科学家运用基因工程技术将结核杆菌MPT64基因(能控制合成MPT64蛋白)成功导入胡萝卜细胞,最终表达出肺结核疫苗.请回答下列问题:
              (1)为获取MPT64基因,可从结核杆菌的细胞中提取对应mRNA,在 ______  的作用下合成双链cDNA片段,获得的cDNA片段与结核杆菌中该基因碱基序列 ______ (填“相同”或“不同”).
              (2)通常采用PCR技术扩增MPT64基因,前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成 ______ ,在操作步骤中需要加热至90-95℃的目的是 ______ .
              (3)根据农杆菌的特点,如果将MPT64基因插入到 ______ 上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入胡萝卜细胞,并将其插入到植物细胞中的 ______ 上.要确认MPT64基因是否在胡萝卜植株中表达,应检测胡萝卜植株中是否含有 ______ .
              (4)研究发现,如果将MPT64蛋白20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸,其保存时间将大大延长,科学家可以生产上述耐储存的MPT64蛋白的现代生物工程技术是 ______ .
            • 2.
              对基因进行编辑是生物学研究的重要手段,如图是对某生物B基因进行定点编辑的过程,该过程中用sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点,相关说法正确的是(  )
              A.通过破坏B基因后生物体的功能变化可推测B基因的功能
              B.基因定点编辑前需要设计与靶基因部分序列完全配对的sgRNA
              C.核酸内切酶Cas9可断裂核糖核苷酸之间的化学键
              D.被编辑后的B基因因不能转录而无法表达相关蛋白质
            • 3.
              环境雌激素(EEs)影响动物和人类的性腺发育.斑马鱼在EEs的诱导下,会表达出卵黄蛋白原(vtg).已知绿色荧光蛋白(GFP)基因能使斑马鱼发光,欲获得能检测水中是否含有EEs的转基因斑马鱼,下列操作合理的是(  )
              A.将EEs基因的启动子与GFP基因重组
              B.将vtg基因的启动子与GFP基因重组
              C.将GFP基因的启动子与GFP基因重组
              D.将GFP基因的启动子与vtg基因重组
            • 4.
              利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示).图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础.以下叙述错误的是(  )
              A.由原来的母链为模板合成的两个新DNA分子中,只含有引物A或引物B
              B.推测第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为
              C.变性过程中被切断的是DNA分子内碱基对之间的氢键
              D.PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高
            • 5.
              目前科学家把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入到棉花细胞中,在棉花细胞中抗虫基因经过修饰后得以表达.下列叙述的哪一项不是这一先进技术的理论依据?(  )
              A.所有生物共用一套遗传密码子
              B.基因能控制蛋白质的合成
              C.苏云金芽孢杆菌的抗虫基因与棉花细胞的DNA都是由四种脱氧核苷酸构成
              D.苏云金芽孢杆菌与棉花可共用相同的mRNA和tRNA
            • 6.
              图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色,Ampr为氨卡青霉素抗性基因.图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列.请回答下列问题:

              (1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有 ______ 和 ______ ,构建重组质粒时需要的工具酶有 ______ .
              (2)采用PCR技术扩增目的基因所依据的原理是 ______ .
              (3)实验小组用BamHⅠ和BalⅡ两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中.在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了 ______ ;若大肠杆菌菌落显白色,说明导入了 ______ .没有导入任何外源DNA的大肠杆菌 ______ (填“能”或“不能”)在该培养基上生存.
              (4)将若干个质粒和目的基因用BamHⅠ和BalⅡ两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功连接后的产物,获得了长度为0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四种长度的DNA片段,则目的基因的长度为 ______ kb.(已知目的基因的长度大于1kb,1kb=1000个碱基对)
            • 7.
              基因疫苗指的是DNA疫苗,是将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上,然后将质粒直接导入人或动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导机体产生免疫应答.回答下列问题:
              (1)要获得编码抗原的基因,首先要提取出病原体的DNA或RNA,并将RNA ______ ,要大量获得表达特异抗原的基因,可采用 ______ 方法.
              (2)将抗原基因插入质粒的过程,即构建基因表达载体的过程,通常一个基因表达载体的组成,除了抗原基因(目的基因)外,还有 ______ .
              (3)一般将重组质粒利用 ______ 的方法送入受体细胞,进入细胞核并表达抗原蛋白.
              (4)与传统疫苗相比,基因疫苗不仅能在宿主体内较长时间存在,还可以诱导产生 ______ (填“体液免疫”“细胞免疫”或“体液免疫和细胞免疫”).
              (5)一个质粒载体可插入多个抗原基因组成多价疫苗,导入这样的疫苗可达到 ______ 的目的.
              (6)基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的.基因治疗是把 ______ 导入病人体内,使该基因表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的.
            • 8.

              回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。

              利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素,图甲中的三个DNA片段上以此表示出了EcoRI、BamH I和Sau3A I三种限制性内切酶的识别序列与切割位点,图乙为某种表达载体示意图(载体上的EcoRI、Sau3A I的切点是唯一的)。

              (1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有                      

              (2)可以从下列哪些人体细胞中获取生产人胰岛素的目的基因         (多选题)。

              A.消化道黏膜上皮细胞              B.胰岛A细胞

              C.胰岛B细胞                      D.造血干细胞

              (3)经BamH I酶切割得到的目的基因可以与图乙所示质粒被            酶切后的产物连接,理由是              。连接后的重组质粒________(能、不能、不一定)被BamH I切割。

              (4)将重组质粒导入到大肠杆菌受体细胞,可用含有          的培养基进行初步筛选。目的基因成功表达的标志是               

              (5)已知图乙所示质粒经EcoRI和Sau3AI联合酶切后形成2.0 kb和4.2 kb(1 kb = 1000对碱基)两种DNA片段,若将0.8 kb的单个基因插在质粒的Sau3AI位点处,所形成的重组质粒用EcoRI和Sau3AI联合酶切后,能形成的DNA片段分别为________

              A. 2.8  2.0  2.2               B. 1.8  2.0  2.2 

              C. 4.0 1.8  1.0                D. 2.0  0.8  4.2

            • 9. 要筛选含有重组质粒的Z细胞,应选择          

              A.卡那霉素和亮氨酸均含的培养基

              B.卡那霉素和亮氨酸均不含的培养基

              C.含卡那霉素但不含亮氨酸的培养基

              D.含亮氨酸但不含卡那霉素的培养基

            • 10. [生物——选修3:现代生物科技专题]

              疾病的诊断与治疗过程中,经常使用单克隆抗体。回答问题:

              (1)单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的,杂交瘤细胞具有的特点是________。体外培养杂交瘤细胞,首先应保证其处于________的环境,其次需要提供充足的营养和适宜的温度,培养箱中充入二氧化碳的作用是________。

              (2)单克隆抗体在诊断疾病的方面上具有________的优点;在治疗癌症方面可制成________治疗癌症。

              (3)科研工作者欲对单克隆抗体进行改造,生产出效果更好的嵌合抗体,用于治疗疾病。用蛋白质工程技术对单克隆抗体进行改造时,首先必须根据预期________,设计嵌合抗体的结构。最终通过基因拼接,将抗体基因改造成嵌合抗体基因,然后导入到淋巴细胞中表达。检测该基因在淋巴细胞中是否翻译成蛋白质.可使用________技术。

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